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非標記抗體免疫電鏡實驗技術

（一） 原理標記抗體法雖然具有許多優點，但也存在一些難以克服的問題，如標記抗體的分子增大，對細胞膜和組織的穿透力減弱；化學交聯反應對抗體和酶的活性有所影響；結合物中未標記的抗體可與抗原競爭結合，影響檢測方法的敏感性等。不標記抗體法可以避免上述的不利影響因素，通過一系統的非標記抗體的免疫學反應，對組織中的抗原進行定位檢測。不標記抗體法又可分為用標記物顯示和不同標記物顯示兩種方法。前者利用基因工程方法制備雙特異性抗體的F(ab′)2，一個Fab片段與標本中的抗原結合，一個Fab是抗體蛋白的結合片段。在抗體與標本作用后，再加入鐵蛋白與抗體結合，從而顯示組織內抗原的所在部位。后者則用磷酸鎢負染后，直接電鏡觀察。（二）材料及試劑1．待檢病毒材料 如糞便，氣管分泌物、腦脊髓液、組織培養液等。2．高速離心機3．已知抗體4．磷鎢酸5．瓊脂糖6．其它（三）操作方法1．經典法（1）將被檢病毒材料0.9ml，加1︰5～1︰10稀釋的特異性免疫血清0.......閱讀全文