這一步僅為基因表達的系列分析 cDNA 合成中實驗方案 A 的一部分,在實驗方案 B 中,cDNA 已經結合到鏈霉抗生物素包被的 PCR 試管上,因此不必用磁珠結合。實驗材料磁珠試劑、試劑盒Dynabead M-280鏈霉抗生物素儀器、耗材磁設備實驗步驟實驗方案 A振蕩 lmin 以使 Dynabead M-280 鏈霉抗生物素重新成為混懸液。將 2X 的 100 ul Dynabeads 轉移至 U—個 1.5 ml 的 Eppendorf 試管中。用磁設備固定磁珠,移去上清液。用 200 ul 的 IX 結合及沖洗緩沖液重懸磁珠沖洗 3 次,固定磁珠,移去沖洗液。將 NlaIII 酶消化后的 cDNA 分成兩份各 10ul,每份中加入 90ul 的重蒸水和 100ul 的 2X 結合及沖洗緩沖液;混合后加入一份沖洗過的磁珠。混合后,在室溫下 W 育 30 min(每 IOmin 混合 1 次)。用磁設備固定磁珠,棄去上清液。......閱讀全文
1、磁珠的概念磁珠是生物磁珠的簡稱,是生物化學與材料學的有效結合,磁珠兼具液體流動性和固體磁性材料的特點,在外磁場的作用下可以定向移動和集中,當外磁場撤去后,稍加振蕩或抽吸即可均勻分散于液體中。隨著生物學研究的深入和材料技術的進步,生物磁珠在生物技術領域的應用越來越廣泛和深入。2、磁珠的結構生物磁珠
一、懸浮時間懸浮時間的長短對加樣均一性有較大影響,懸浮時間越長的DNA提取磁珠,加樣均一性越好。GNT系列的磁珠緩沖液,懸浮時間能穩定在5-10min或30-40min。(測試方法:1ml磁珠溶液,沉降至500ul所用的時間) 二、磁吸時間磁吸時間對實驗操作效率有較大影響,磁吸
實驗方法原理噬菌體展示技術是將外源基因與噬菌體的表面蛋白基因融合,在融合了外源基因的噬菌體顆粒的表面就會表達相應的外源蛋白,即外源基因編碼的蛋白被展示在噬菌體顆粒的表面。實驗材料載體tRNA抗體寡核苷酸試劑、試劑盒抗生素儲存液BCIP葡萄糖儲存液X-Gal磁珠洗液蛋白酶抑制劑RNase 抑制劑TEN
4. 免疫印跡檢測外源蛋白的展示情況pDTSPLAY-B 空載體生成的噬菌體表面不含外源基因,僅有帶有 6 個組氨酸標簽和 Myc 標簽的錨定蛋白(基因 Ⅲ 編碼),此蛋白 SDS-PAGE 中的條帶在 65 kDa 的位置(實際 Mr 為 45 kDa)。pDISPLAY-B 載體中插入外
關于GNT磁珠能否回收利用的三種情況分析 文章來源:洛陽吉恩特生物科技有限公司 磁珠法核酸提取在當前生物科技行業內已經受到了越來越廣泛的關注,很多公司都開始從傳統的核酸提取方式向自動化磁珠法轉移,生物磁珠也自然成為關鍵技術的核心。 最近有很多老師詢問,GNT系列
磁珠法核酸提取在當前生物科技行業內已經受到了越來越廣泛的關注,很多公司都開始從傳統的核酸提取方式向自動化磁珠法轉移,生物磁珠也自然成為關鍵技術的核心。 最近有很多老師詢問,GNT系列的生物磁珠是否可以回收利用。從理論上來說,磁珠在整個使用過程中,只要性質和結構不發生變化,與目的物質(核酸或
一. 實驗目的1. 掌握重組蛋白誘導表達的方法;2. 親和層析法純化His 標記的融合蛋白二. 實驗原理將目的基因連接在表達載體后,通過加入誘導劑IPTG誘導目的基因表達。表達載體除具有蛋白表達所需要的啟動子外,在終止子前有6個His編碼序列,便于蛋白的親和層析純化。親和層析以蛋白質或生物大分子和結
磁珠法核酸提取在當前生物科技行業內已經受到了越來越廣泛的關注,很多公司都開始從傳統的核酸提取方式向自動化磁珠法轉移,生物磁珠也自然成為關鍵技術的核心。最近有很多老師詢問,GNT系列的生物磁珠是否可以回收利用。從理論上來說,磁珠在整個使用過程中,只要性質和結構不發生變化,與目的物質(核酸或蛋白)的結合
試劑、試劑盒 擴增緩沖液 DNA 聚合酶 DNaseI 限制性內切核酸酶 ATP 鏈霉親和素-磁珠結
試劑、試劑盒 擴增緩沖液DNA 聚合酶 DNaseI限制性內切核酸酶ATP鏈霉親和素-磁珠結合緩沖液T4DNA 連接酶熱穩定 DNA 聚合酶瓊脂糖凝膠BACDNA缺口平移緩沖液雜交液平末端 cDNACot1 基因組 DNA胞漿 poly(A)+RNAdNTP 溶液DNA 分子質量標志物寡
本方案使用克隆在 BAC 載體上的一段 500kb 的人基因組 DNA 連續序列,直接篩選與其互補的的 cDNA。但本方法也可適用于任意大小的基因組靶 DNA。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)上冊,作者:黃培堂。試劑、試劑盒擴增緩沖液DNA 聚合酶 DNaseI限制性內切核酸酶ATP鏈霉親和素
細胞因子是機體免疫反應中不同細胞分泌的一類小蛋白質。例如,當白細胞介素4(IL-4)單獨發揮作用時,它使得B細胞增殖,并生產出特定類型的抗體。但干擾素-γ(IFN-γ)同時存在時,會減少B細胞的數目并改變它們產生抗體的類型。麥吉爾大學蒙特利爾神經學研究所的實驗治療計劃主任Amit Bar-O
實驗步驟一、膜的制備從細胞或組織中分離質膜是純化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分離去污劑增溶的膜蛋白的生化方法,因此在質膜成分純化上投人一些時間會對后續步驟的結果有利。大多數膜蛋白的含量較低, 因此選擇易于大量獲取并能高表達目的膜蛋白的組織或細胞系就很重要。最近,人們對于將細胞表面蛋白質作為鑒定不同
實驗步驟 一、膜的制備 從細胞或組織中分離質膜是純化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分離去污劑增溶的膜蛋白的生化方法,因此在質膜成分純化上投人一些時間會對后續步驟的結果有利。 大多數膜蛋白的含量較低, 因此選擇易于大量獲取并能
分子診斷是以核酸作為檢測對象,主要應用于臨床各科的診斷中,如腫瘤、感染、遺傳等各方面,而核酸提取是分子診斷實驗的“第一步”。通過對磁珠進行一定的包被(如硅基、氨基、羧基等),從而可以實現對核酸的高通量、自動化提取,這一技術產生于20世紀80年代,已經有了成熟的試劑盒并形成為產業。磁珠的用武之地:體外
近年來隨著現代醫學研究技術的進步和CTC臨床應用價值凸顯,許多研究機構和研發團隊都在推出不同的CTC檢測技術。由于血液中CTC的含量極低,目前主流的檢測方法是先捕獲(富集)后檢測,少量方法是不捕獲(富集)直接檢測。CTC檢測技術包括CTC的富集(分離)和CTC的分析鑒定(識別)。本篇文章將介紹C
目前市場上有四種高通量測序儀,分別是Solexa,454 (GS-FLX),SOLiD和Polonator。根據測序原理,它們可以被分為兩大類:使用合成法測序(Sequencing by Synthesis)的Solexa和454,及使用連接法測序(Sequencing by Ligation
目前市場上有四種高通量測序儀,分別是Solexa,454 (GS-FLX),SOLiD和Polonator。根據測序原理,它們可以被分為兩大類:使用合成法測序(Sequencing by Synthesis)的Solexa和454,及使用連接法測序(Sequencing by Ligation
目前市場上有四種高通量測序儀,分別是Solexa,454 (GS-FLX),SOLiD和Polonator。根據測序原理,它們可以被分為兩大類:使用合成法測序(Sequencing by Synthesis)的Solexa和454,及使用連接法測序(Sequencing by Ligat
Applied BioCode,Inc.是一家專注于數碼液相芯片技術研發及應用的高科技公司,總部位于美國加州洛杉磯。 數碼液相芯片Applied BioCode? 首創的數碼液相芯片(Digital Liquid Chip)核心技術,是基于數碼磁珠(Barcoded Magnetic Be
實驗步驟基本方案材 料抗 凝 血(附 錄 3 G) , 或 者 從 全 外 周 血 中(單 元 8 . 1 ) 或 組 織 中(單 元 7. 8 ) 分離的新 鮮 PBM C 或冷藏保存的 PBMC (附錄 3B)1 % FBS (熱滅活)溶于冷的 PBS (附 錄 1 ,無鈣離子)中免疫磁珠偶聯的
實驗概要機械力在生物過程中發揮著顯著作用。這些機械力可以通過骨架長絲網絡傳送到細胞,誘導胞漿內不同的生化反應。雖然已經有充足的報告顯示,細胞質酶可被細胞表面的局部應力直接激活,但一直沒有證據表明,機械力可以直接改變核功能,包括卡哈爾體蛋白質復合物的結構變化。本實驗描述了通過利用磁場扭曲力改變,流式細
實驗概要本實驗用以血小板內皮細胞粘附分子(PECAM或CD31)為靶分子的活性篩選技術分離和培養純的人毛細血管內皮細胞。實驗原理PECAM是130kDa內膜糖蛋白,屬于細胞粘附分子的免疫球蛋白超家族。該分子在細胞中呈組成型表達,基本上為內皮細胞和血小板所獨有,只有一些骨髓譜系的亞種例外。PECAM在
試劑、試劑盒 退火緩沖液 B&W(結合洗脫)緩沖液 dNTP溶液 甲酰胺染液 羥胺
磁珠提核酸磁珠法純化DNA主要是利用利息交換吸附材料吸附核酸,從而將核酸和蛋白質等其細胞中其他物質分離。本文主要概述了核酸分離與純化的原則、核酸分離與純化的步驟、磁珠法純化DNA原理。核酸分離與純化的原則核酸在細胞中總是與各種蛋白質結合在一起的。核酸的分離主要是指將核酸與蛋白質、多糖、脂肪等生物大分
試劑、試劑盒退火緩沖液B&W(結合洗脫)緩沖液dNTP溶液甲酰胺染液羥胺KMnO4 TEAC嘧啶Taq DNA聚合酶Taq DNA聚合酶緩沖液待測和對照基因組DNA儀器、耗材磁力架微孔滴定板或微管振蕩器鏈霉抗生物素蛋白包被的磁珠熱循環儀實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑(1)退火緩沖液
磁珠法純化DNA主要是利用利息交換吸附材料吸附核酸,從而將核酸和蛋白質等其細胞中其他物質分離。本文主要概述了磁珠法純化DNA原理、核酸分離與純化的原則、核酸分離與純化的步驟。磁珠法 純化DNA原理磁珠法核酸純化技術采用了納米級磁珠微珠,這種磁珠微珠的表面標記了一種官能團,能同核酸發生吸附反應。硅磁(
核酸提取儀(Nucleic Acid Extraction System)是應用配套的核酸提取試劑來自動完成樣本核酸提取工作的儀器。廣泛應用在疾病控制中心、臨床疾病診斷、輸血安全、法醫學鑒定、環境微生物檢測、食品安全檢測、畜牧業和分子生物學研究等多種領域。分類:1. 根據儀器型號大小不同劃分 [1]
(二)方法1. 均一標記探針的制備(1)取一無菌離心管置于冰上,加入如下組分。基因組DNA 50~100ng引物5A &
磁珠法純化DNA原理 磁珠法核酸純化技術采用了納米級磁珠微珠,這種磁珠微珠的表面標記了一種官能團,能同核酸發生吸附反應。硅磁(Magnetic Silica Particle)就是指磁珠微珠表面包裹一層硅材料,來吸附核