大片段的精確擴增實驗
用 10 對不同的引物擴增約 5kb 的片段,模板 DNA 是一樣的,反應體系是 50ul, 對照中未加模板,含有單一引物。對于循環數較多(25?40) 的反應,一般應設置一個沒有模板或單引物對照。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒甜菜堿PCR 反應緩沖液TEN+BSA酶和酶緩沖液核酸及引物儀器、耗材PCR 儀實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑滅菌水配制的下列試劑,儲存在指定的溫度條件下。(1) 5mol/L 甜菜堿(SigmaB-2629 或 SigmaB-2754)過濾滅菌,室溫保存。(2) 10XKLA PCR 反應緩沖液,pH9.2500 mmol/LTris 堿 (Sigma;Trizma 堿)169 mmol/L(NH)4SO425 mmol/LMgCl21%Tween20不 用調節,pH 約 9.2(大片段擴增最佳),對于一些質粒,如 col El,pH7.9 比較適宜......閱讀全文
大片段的精確擴增實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 甜菜堿 PCR 反應緩沖液 TEN+BSA 酶和酶緩沖液 核酸及引物
大片段的精確擴增實驗
用 10 對不同的引物擴增約 5kb 的片段,模板 DNA 是一樣的,反應體系是 50ul, 對照中未加模板,含有單一引物。對于循環數較多(25?40) 的反應,一般應設置一個沒有模板或單引物對照。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒甜菜堿PCR 反應緩沖液TE
大片段的精確擴增實驗
試劑、試劑盒 甜菜堿PCR 反應緩沖液TEN+BSA酶和酶緩沖液核酸及引物儀器、耗材 PCR 儀實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑滅菌水配制的下列試劑,儲存在指定的溫度條件下。(1) 5mol/L 甜菜堿(SigmaB-2629 或 SigmaB-2754)過濾滅菌,室溫保存。(2) 10X
高 GC 含量片段的 PCR 擴增實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 甜菜堿 dNTP 溶液 二甲基亞砜 四甲基砜 Taq 酶和酶緩沖引物 儀器、耗材
高 GC 含量片段的 PCR 擴增實驗
試劑、試劑盒甜菜堿dNTP 溶液二甲基亞砜四甲基砜Taq 酶和酶緩沖引物儀器、耗材PCR 儀實驗步驟一、材料1. 試劑甜菜堿(Sigma 公司)dNTP 溶液(含四種 dNTP, 每種 25 mmol/L)二甲基亞砜(DMSO)(Sigma 公司)四甲基砜(Sigma 公司)2. 酶和酶緩沖液Taq
高 GC 含量片段的 PCR 擴增實驗
試劑、試劑盒 甜菜堿dNTP 溶液二甲基亞砜四甲基砜Taq 酶和酶緩沖引物儀器、耗材 PCR 儀實驗步驟 一、材料1. 試劑甜菜堿(Sigma 公司)dNTP 溶液(含四種 dNTP, 每種 25 mmol/L)二甲基亞砜(DMSO)(Sigma 公司)四甲基砜(Sigma 公司)2. 酶和酶緩沖液
PCR擴增分離目的DNA片段
一、目的了解多聚合酶鏈反應DNA 擴增技術的基本原理和實驗應用,掌握PCR反應基本技術。二、原理PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶鏈式反應是1986 年由Kallis Mullis 發現。這項技術已廣泛地應用于分子生物學各個領域,它不僅可用于基因分離克隆和核酸序列分
PCR擴增分離目的DNA片段實驗原理、材料和步驟
一、目的了解多聚合酶鏈反應DNA 擴增技術的基本原理和實驗應用,掌握PCR反應基本技術。二、原理PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶鏈式反應是1986 年由Kallis Mullis 發現。這項技術已廣泛地應用于分子生物學各個領域,它不僅可用于基因分離克隆和核
PCR擴增分離目的DNA片段實驗原理、材料和步驟
PCR擴增法實驗材料 DNA 模板 試劑、試劑盒 電泳緩沖液 加樣緩沖液 溴化乙錠溶液 瓊脂糖 TaqDNA 多聚酶 5′反應緩沖液
PCR擴增分離目的DNA片段實驗原理、材料和步驟
PCR(Polymerase Chain Reaction)即聚合酶鏈式反應是1986 年由Kallis Mullis 發現。這項技術已廣泛地應用于分子生物學各個領域,它不僅可用于基因分離克隆和核酸序列分析,還可用于突變體和重組體的構建,基因表達調控的研究,基因多態性的分析,遺傳病和傳染病診斷,腫瘤