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    蛋白質定量實驗_考馬斯亮藍蛋白質濃度分析法

    實驗方法原理蛋白質分子中的芳香族氨基酸酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸殘基,其化學結構中的共軛雙鍵,具有吸收紫外光的特性,吸收高峰在280 nm處,蛋白質溶液的吸光度(A280)與蛋白質含量成正比關系,可作為樣品中蛋白質定量測定。該方法簡便、靈敏、快速,且樣品用量少且可回收,低濃度的鹽類也不干擾測定,但測定的準確度比Lowry法低,這是由于對于測定那些與標準蛋白質中酪氨酸和色氨酸殘基含量差異較大的蛋白質時有一定的差距。若樣品中含有嘌呤、嘧啶等吸收紫外光的物質,會出現較大的誤差。實驗材料蛋白樣品試劑、試劑盒考馬斯亮藍 G250乙醇磷酸儀器、耗材紫外分光光度計實驗步驟(1) 準備 100~1500 ug/ml 的標準品, 溶于 Bradford 法相兼容緩沖液中。對于較稀的樣品,可能通過增加樣品在試劑體積中的比率而擴大靈敏度(microBradfordassay:1~25ug/mL)。如果樣品與染料的比值太高, 可能會增加反應混合物的 PH......閱讀全文

    蛋白質純度測定實驗

    蛋白質純度測定實驗             實驗步驟 在評價樣品

    蛋白質純度測定實驗

    實驗步驟在評價樣品純度之前,首先需要鑒定待測雜質的類型,如核酸、碳水化合物、脂質、無關蛋白質、同工酶類、失活蛋白質,進而確定在特定溶液條件中, 能夠區分假定雜質和目標蛋白質的理化特性 (化學分析或物理特征)。而純度則是指待測雜質含量低于某個特定水平。需要注意的是,上述說明中并沒有要求描述雜質的性質。

    蛋白質定量實驗

    考馬斯亮藍蛋白質濃度分析法 堿性銅還原分析法 胺衍生法             實驗方法原理 蛋白質分

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