CTABPAGE實驗
實驗方法原理該方案由方案 蛋白質的SDS-PAGE實驗 中介紹的標準 SDS-PAGE 衍變而來。雖然在進行變性凝膠電泳時多選用 SDS-PAGE, 但陰禽子去污劑 SDS 仍然存在一些局限。例如,SDS 在低溫下會結晶,某些情況下還會使蛋白質聚集或沉淀,而且有些蛋白在 SDS 凝膠中不能很好地溶解或者出現異常的遷移現象。這些情況下,可選擇采用陽離子去垢劑進行 PAGE。這里講到的不連續、陽離子去垢劑 PAGE 方法參照了 Atkins 等(1992)。這個系統中使用的是陽離子去垢劑 CTAB(十六烷基三甲基溴化銨),其濃縮膠以兩性離子精氨酸(作為濃縮溶液)和 tricine[N-三(羥甲基)甲基甘氨酸] 為緩沖體系。如果樣品沒有經過煮沸和外加還原劑,一些由 CTAB 電泳系統分離的蛋白質仍保持其酶學活性。實驗材料冷凍干燥后的蛋白樣品或塊狀蛋白樣品試劑、試劑盒丙烯酰胺貯存液CTAB 上樣緩沖液2-巰基乙醇分離膠混合物5 X tr......閱讀全文
CTAB-PAGE實驗
實驗方法原理該方案由方案 蛋白質的SDS-PAGE實驗 中介紹的標準 SDS-PAGE 衍變而來。雖然在進行變性凝膠電泳時多選用 SDS-PAGE, 但陰禽子去污劑 SDS 仍然存在一些局限。例如,SDS 在低溫下會結晶,某些情況下還會使蛋白質聚集或沉淀,而且有些蛋白在 SDS 凝膠中不能很好地溶解
單向聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗
蛋白質的SDS-PAGE實驗 傳統的考馬斯亮藍染色實驗 快速考馬斯亮藍染色實驗 InstaStain Blue 凝膠紙染色實驗 InstaStain Blue 凝膠紙染色實驗 SYPRO Ruby 熒光染色實驗 SYPR
實驗室實驗器材使用實驗
1、了解化學試劑的等級和保管原則2、掌握玻璃器械的規范使用3、明確各玻璃器械的功用試劑、試劑盒純水儀器、耗材量筒容量瓶吸管移液管吸球天平溫度什移液瓶實驗步驟一、實驗材料:不同等級的化學試劑 量材 量筒 容量瓶 吸管(移液管 無分度兩標線管 有分度吸管 微量吸管)吸球二、實驗步驟:1. 根據試劑瓶上的
實驗室實驗器材使用實驗
試劑、試劑盒 純水儀器、耗材 量筒 容量瓶 吸管移液管 吸球天平溫度什 移液瓶實驗步驟 一、實驗材料:不同等級的化學試劑 量材 量筒 容量瓶 吸管(移液管 無分度兩標線管 有分度吸管 微量吸管)吸球二、實驗步驟:1. 根據試劑瓶上的標志說明該試劑的等級及保管方法2,玻璃量器的使用:按照玻璃量器上的標
實驗動物實驗標本的采集實驗
(1) 大鼠、小鼠的采血方法:①剪尾采血:適用于少量采血,如制作血涂片、白細胞計數等。動物麻醉后,將尾尖剪去約 5 mm, 待血液流出采集。也可用刀割破尾動脈或尾靜脈,讓血液自行流出。小鼠可每次采血約 0. 1 ml, 大鼠約 0.4 ml。②眼眶后靜脈叢采血:一手拇指及食指抓住鼠兩耳之
實驗動物實驗標本的采集實驗——實驗動物腦脊液采集
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒消毒液儀器、耗材注射器實驗步驟(1) 狗、兔腦脊液的采集:通常采取脊髓穿刺法,穿刺部位在兩髂連線中點稍下方第七腰椎間隙。動物麻醉后側臥位固定,頭尾部盡量彎向腰部,去被毛。消毒后一手固定穿刺部位的皮膚,腰穿針垂直刺入,當有落空感及動物的后肢跳動時,針已達椎管內,抽去針芯,即
實驗動物實驗標本的采集實驗——實驗動物尿液采集
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒水儀器、耗材收集器實驗步驟尿液的采集 常用的采集方法較多,一般在實驗前需給動物灌服一定量的水。(1) 代謝籠法:此法較常用,適用于大、小鼠。將動物放在特制的籠內。一般需收集 5 小時以上的尿液,最后取平均值。(2) 導尿法:常用于雄性兔、狗。動物輕度麻醉后,固定于手術臺上
實驗動物實驗標本的采集實驗——實驗動物腹水的采集
實驗材料實驗動物試劑、試劑盒消毒液儀器、耗材注射器實驗步驟抽取大鼠、小鼠的腹水時,抓取固定動物,使動物腹部朝上,消毒皮膚,針頭在腹股溝和腹中線之間刺人腹腔,腹壓高時腹水自然流出,腹水少時可用注射器抽取。
細胞劃痕實驗實驗步驟
一.準備:所有能滅菌的器械都要滅菌,直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內)二.流程:1.先用marker筆在6孔板背后,用直尺比著,均勻得劃橫線,大約每隔0.5~1cm一道,橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。2.在空中加入約5X105個細胞,具體數量因細胞不同而不同,掌握為過一夜能鋪
實驗動物標記實驗
實驗材料兔子 小鼠試劑、試劑盒3%~5%苦味酸 0.5%中性品紅 2%硝酸銀實驗步驟1.?染色法 適用于小動物,如兔子、大鼠、小鼠等。此方法是將化學藥品涂在動物的被毛上,以不同顏色來區分動物。常用的化學藥品有:3%~5%苦味酸溶液(黃色)、0.5%中性品紅(紅色)、2%硝酸銀(咖啡色)。標記的原則是