實驗材料牛小腸堿性磷酸酶羧肽酶Y目標磷酸化蛋白TPCK 修飾的膜蛋白酶試劑、試劑盒乙酸EDTAFeCl3NH4HCO3MALDI 基質鎳-次氨基三乙酸(Ni-NTA)樹脂檸檬酸鈉儀器、耗材致密的反應柱子(CRC)過濾器孵育器MALDI 質譜儀MALDI 靶板微量離心管實驗步驟一、固定化金屬離子親和柱的制備二、磷酸化多肽與 IMAC 柱的結合三、堿性磷酸酶處理親和結合的磷酸化多肽四、羧肽酶 Y 消化親和結合的磷酸化多肽五、質譜展開......閱讀全文
方案1 用帶有 Fe(Ⅲ) 和 Ga(Ⅲ)的 IMAC 純化磷酸化多肽 方案2 在 MALDI 分析之前或之后對磷酸化多肽進行堿性磷酸酶處理 方案3 結合固定化金屬離子親和介質和 MALDI-TOF-MS 直接分析方法對磷酸化多肽進行特征分析實驗 方