病毒感染細胞實驗
病毒感染細胞實驗可以用于：（1）將目的基因整合到大多數真核細胞。（2）將目的基因包裝成病毒來感染細胞，從而得到表達滿足實驗需求。實驗方法原理病毒包裝的原理質粒DNA為能轉錄出慢病毒遺傳物質（RNA），但不能翻譯出慢病毒的外殼及蛋白成分的載體質粒，其同時連有目的基因和報告基因，psPAX2為能表達慢病毒外殼的質粒，其表達產物可通過粘附機制更易穿過細胞膜， pMD2.G為慢病毒的膜蛋白質粒，通過 lipofectamine2000進行三質粒共轉到靶細胞基因組中，宿主基因組在表達時，隨宿主基因轉錄出的目的基因RNA與psPAX2、pMD2.G基因翻譯出的蛋白組裝為慢病毒。在上述程序中提及的“第四天”收集病毒。在第五天再用該病毒感染靶細胞，病毒進入細胞后，其遺傳物質RNA反轉錄出DNA，該基因再整合到靶細胞的基因組中，完成轉染過程，因為質粒DNA只能轉錄出病毒RNA和表達目的基因卻不能表達出病毒的外殼和膜蛋白成分，因此其不能像普通的病毒......閱讀全文
病毒感染細胞實驗
病毒感染細胞實驗可以用于：（1）將目的基因整合到大多數真核細胞。（2）將目的基因包裝成病毒來感染細胞，從而得到表達滿足實驗需求。實驗方法原理病毒包裝的原理質粒DNA為能轉錄出慢病毒遺傳物質（RNA），但不能翻譯出慢病毒的外殼及蛋白成分的載體質粒，其同時連有目的基因和報告基因，psPAX2為能表達慢病
病毒感染細胞實驗
病毒感染細胞實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 病毒包裝的原理質粒DNA為能轉錄出慢病毒遺傳物質（RNA），但不能翻譯出慢病毒的外殼及蛋白成分的載體質粒，其同時連有目的基因和
病毒感染細胞實驗（一）
實驗方法原理 一、病毒的種類病毒有很多種，常見的有慢病毒和腺病毒1.1慢病毒1.1.1原理慢病毒（Lentivirus）是逆轉錄病毒的一種。構建的siRNA / miRNA慢病毒載體，與化學合成的siRNA 和基于瞬時表達載體構建的普通 siRNA 載體相比，一方面可以擴增替代瞬時表達載體使
病毒感染細胞實驗（二）
三、質粒DNA在大腸桿菌里轉化連接上目的基因的質粒轉化大腸桿菌是為了讓目的基因在大腸桿菌里擴增，然后提取質粒，以下是質粒DNA在大腸桿菌里轉化的三步驟。3.1大腸桿菌感受態細胞的制備1）從大腸桿菌平板上挑取一個單菌落于3mlLB培養基的試管中，37℃振蕩培養過夜。2）取0.4ml菌液轉接到40mlL
慢病毒感染目的細胞實驗步驟
1. 感染預實驗以 24 孔培養板為例，同時進行目的細胞和工具細胞的感染預實驗。工具細胞可選擇 293T（人胚腎上皮細胞）、H1299（人肺癌細胞）或其它細胞。實驗材料：培養基、24 孔培養板，移液槍，槍頭， EP 管，細胞計數板、冰盒、廢液缸等。（根據目的細胞情況，可酌情使用 Polybrene）
有什么方法可以提高病毒感染細胞實驗效率
1.提前一天細胞鋪板提前一天將細胞種植在24孔板中，以感染時細胞融合度在50%左右為宜(懸浮細胞根據需要調整，不要采用過高的細胞密度)。2.感染⑴將2ul的EnvirusTM-LV用25μl無血清稀釋液稀釋，充分混勻，制成EnvirusTM-LV稀釋液。4℃靜置5分鐘。注：感染懸浮細胞，建議增大En
病毒感染的實驗室診斷
四、特異性抗體的檢測特異性抗體的檢測病毒感染后通常誘發針對病毒一種或多種抗原免疫應答，特異性抗體效價升高或lgM抗體出現有輔助臨床診斷的價值。(一)補體結合試驗(CF) CF分二個階段：1.抗原與抗體(一個為已知，一個為待檢)混合，加入定量補體，若抗原與抗體相對應，則補體被消耗；2.在上述混合物
Science揭開致命病毒感染細胞之謎
由來自荷蘭癌癥研究所、哈佛醫學院、德國基爾大學和美國陸軍傳染病醫學研究所(USAMRIID)的科學家們組成的一個國際研究小組，闡明了在西非流行的一種致命病毒：沙拉沙病毒（lassa virus）感染細胞的機制，他們發現拉沙病毒利用了出乎意料的兩步過程來進入細胞。發表在《科學》（Science）雜
巨細胞病毒感染診斷方案
? 巨細胞病毒感染診斷方案 ??? 中華醫學會兒科學分會感染消化學組? (1998年11月，湖北宜昌) ??? 巨細胞病毒感染( cytomegalovirus infection )是由人巨細胞病毒( human cytomegalovirus，CMV )引起的人類感染性疾病。CMV感染
昆蟲細胞--高MOI桿病毒感染
高MOI（?Multiplicity Of Infection，等于用于感染的病毒數目與細胞數目的比值）感染是生產蛋白的最好方法。這有兩個原因。一是不用考慮DIP（Defective Interfering Particles，即只包裝入部分基因組的病毒顆粒）的形成，因為關心的是細胞或者培養液中的蛋