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    酪蛋白激酶分析實驗_用多肽底物

    實驗方法原理酪蛋白激酶 I 可用多肽 AspAspAspGluGluSerIleThrArgArg 進行分析,最近釀蛋白激酶 II 也已被特異性的多肽底物分析,如 ArgArgArgGluGluGluThrGluGluGlu(下劃線殘基是磷酸受體)。兩個多肽均可通過精氨酸殘基結合到 P81 磷酸纖維素膜上。第一個多肽對酪蛋白激酶 I 相對比較特異,但它的磷酸化反應動力并不理想,其 Km 值大小在毫摩爾范圍。因此只有在此酶的純度很高時用于酪蛋白激酶 I 分析比較理想。實驗材料合成肽底物溶液有酪蛋白激酶活性的酶樣品試劑、試劑盒[γ-32P] ATP 溶液酪蛋白激酶反應緩沖液TCASDS-PAGE 樣品緩沖液儀器、耗材30°C 水浴P81 磷酸纖維素膜離心管離心機實驗步驟1. 每個分析反應按以下比例將各反應組分加入 1.5 ml 微量離心管中:10 μl 5 × 酪蛋白激酶反應緩沖液5 μl 10 mmol/L用于酪蛋白激酶......閱讀全文

    酪蛋白激酶分析實驗

    基本方案 用 β-酪蛋白 備擇方案 用多肽底物             實驗方法原理

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