融合蛋白化學降解實驗3
實驗材料融合蛋白試劑、試劑盒天冬氨酸脯氨酸甲酸乙酸鹽酸胍儀器、耗材電泳儀離心機水浴鍋實驗步驟1. 進行預實驗確定最佳的水解條件。準備四個反應混合物：（1）反應1：20 μg 溶解在70%甲酸中的融合蛋白。（2）反應2：20 μg 溶解在70%甲酸/6 mol/l 鹽酸胍中的融合蛋白。（3）反應3：20 μg 溶解在13%乙酸中的融合蛋白。（4）反應4：20 μg 溶解在13%乙酸/6 mol/l 鹽酸胍中的融合蛋白。（5）將所有樣本置37℃下溫育反應。 2. 分別在0、24、48和72 h 的反應時刻，從各反應混合物中取5 μl 凍干。3. 將凍干的蛋白重懸于20 μl 1×SDS樣品緩沖液，逐滴加入0.1 mol/l Tris 堿中和至樣品顏色由黃變藍。用SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析樣品的消化程度。4. 選擇達到預定裂解程度的最溫和條件及最短溫育反應時間，據此按比例擴......閱讀全文
融合蛋白化學降解實驗3
實驗材料 融合蛋白 試劑、試劑盒 天冬氨酸脯氨酸甲酸乙酸鹽酸胍 儀器、耗材 電泳儀離心機水浴鍋 實驗步驟 1. ?進行預實驗確定最佳的水解條件。準備四個反應混合物： （1）反應1：20 μg 溶解在70%甲酸中的融合蛋白。 （2）反應2：20 μg
融合蛋白化學降解實驗
實驗材料 融合蛋白 試劑、試劑盒 CNBr甲酸SDS 儀器、耗材 離心機分光光度計水浴鍋 實驗步驟 1. ?進行預試驗以確定最短溫育反應時間。凍干兩小份50 μl 的融合蛋白溶液，將其中一份重懸于5050 μl 50 mg/ml CNBr/甲酸中，另一份重懸于50 μl 含CNBr 的7
融合蛋白化學降解實驗
基本方案 用溴化氰 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 1 mg ml 融合蛋白
融合蛋白化學降解實驗
基本方案 備選方案1 備選方案2 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 融合蛋白
融合蛋白化學降解實驗1
實驗材料 融合蛋白 試劑、試劑盒 CNBr甲酸SDS 儀器、耗材 離心機分光光度計水浴鍋 實驗步驟 1. ?進行預試驗以確定最短溫育反應時間。凍干兩小份50 μl 的融合蛋白溶液，將其中一份重懸于5050 μl 50 mg/ml CNBr/甲酸中，另一
融合蛋白化學降解實驗2
實驗材料融合蛋白試劑、試劑盒Tris·ClNaCl鹽酸胍羥胺裂解緩沖液SDS儀器、耗材離心機水浴鍋培養箱實驗步驟1. ?進行預試驗以確定最短保溫反應時間。將50 μl 1 mg/ml? 融合蛋白與50 μl 2×羥胺裂解緩沖液混合在1.5 ml 微量離心管中，45℃溫育反應。?2. ?在0、2、4、
融合蛋白化學降解實驗—— 用溴化氰
實驗材料1 mg ml 融合蛋白試劑、試劑盒50 mg ml CNBr70%（V V）甲酸1 × SDS 樣品緩沖液實驗步驟1. 進行預試驗以確定最短溫育反應時間。凍干兩小份各 50 μl 的融合蛋白溶液，將其中一份重懸于 50 μl 50 mg/ml CNBr / 70% 甲酸中，另一份重懸于 5
融合蛋白的酶解實驗3
實驗材料融合蛋白試劑、試劑盒SDS鈉鹽凝血酶裂解液凝血酶儀器、耗材水浴鍋培養箱離心機實驗步驟1. ?準備兩個小量預試驗以確定最佳裂解反應條件：?（1）反應1：20 μl 1 mg/ml 融合蛋白溶液（在合適的緩沖液中）及0.2 μg 凝血酶。（2）反應2：5 μl 1 mg/ml?融合蛋白溶液（模擬
GST 融合蛋白沉降實驗
GST 沉降實驗與 far western(方案 2) 相比有—個優點：探針蛋白是在更自然的環境下與可能的搭檔蛋白孵育，因而增強了相互作用的有效性。本實驗來源于分子克隆實驗指南（第三版）下冊，作者：〔美〕J. 薩姆布魯克 D.W. 拉塞爾。實驗材料細胞裂解液其中蛋白質 35S 用標記試劑、試劑盒裂解
GST 融合蛋白沉降實驗
? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞裂解液 其中蛋白質 35S 用標記 試劑、試劑盒 裂解緩沖液 SDS 聚丙烯酰胺凝膠