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實驗材料腦組織試劑、試劑盒PME 緩沖液儀器、耗材勻漿器實驗步驟一、分離驅動蛋白1. 以每克組織 1.5 ml PME 緩沖液的比例進行組織勻漿，勻漿物在 39000 g 離心 30 分鐘。PME 緩沖液：0.1 mol/L PIPES，pH 6.92 mmol/L EGTA1 mmol/L MgSO41 mmol/L DTT ( 或 DTE )0.1 mmol/L GTP2. 轉移上清并在 100000 g 離心 1 小時。3. 轉移上清，加紫杉醇至 20 μmol/L，根據所研究組織的特征上升到一定溫度培養 15~30 分鐘。4. 39000 g 離心 30 分鐘收集微管。5. 轉移上清，加入三磷酸腺苷雙磷酸酶使濃度為 2 單位/ml，在 25℃ 孵育 30 分鐘。6. 從冰箱拿出一份不含微管相關蛋白的紫杉醇穩定的微管，加到二磷酸腺苷雙磷酸酶處理的上清中，使終濃度為 0.1 mg/ml。所加微管可以是通過用鹽抽提紫杉醇穩定的......閱讀全文
通過組裝/解聚從缺少組裝驅動成分的緩沖液中分離微管 在含甘油的緩沖液中通過組裝/解聚分離微管 在紫杉醇這種微管穩定劑存在時通過組裝的方法分離微管 從用紫杉醇穩定的微管中分離微管相關蛋白 通過ATP釋放法從用紫杉醇穩定的微管中分離基于微管的運