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    斑馬魚胚胎細胞的培養——細胞系

    實驗材料鏈酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L EDTAZEM-2細胞(或等同物)試劑、試劑盒LDF基礎培養液LDF原代培養液LDF維持培養液D培養液Holtfreter緩沖液實驗步驟鱒魚胚胎提取物:(a)收集胚胎(受精后 28 天的 Shasta Rainbow 或其他鱒魚種系,在 10°C 條件下飼養,或者受精后 3 天的斑馬魚,在 28°C 條件下飼養),在 -80°C 條件下凍存(b)為了制備提取物,將約 150 g 胚胎融化后,采用 Tissuemizer 勻漿器(Tekmar ) 用 10 ml LDF 在冰上勻漿 2 min(c)將勻漿通過數層紗布過濾后去除絨毛膜,然后在 4°C 條件下離心(20000 g,30 min )(d)離心后收集上清液,留下表面的亮橘色脂層(e)將上清液移入 1 只新離心管,按操作步驟(c ) 離心(f)收集上清液,留下剩余的脂質,然后在 4°C 條件下超速離心(10......閱讀全文

    斑馬魚胚胎細胞的培養——細胞系

    實驗材料鏈酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L EDTAZEM-2細胞(或等同物)試劑、試劑盒LDF基礎培養液LDF原代培養液LDF維持培養液D培養液Holtfreter緩沖液實驗步驟鱒魚胚胎提取物:(a)收集胚胎(受精后 28 天的 Shasta Rainbow 或其他鱒魚種系

    斑馬魚胚胎細胞的培養

    成纖維細胞飼養層 原代培養 細胞系 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過用鏈酶蛋白酶除去絨毛膜、用添加成分的 FGF 培養液培養細胞和采用不同的胰蛋白酶消化

    斑馬魚胚胎細胞的培養——原代培養

    實驗方法原理收集胚胎,除去絨毛膜,用胰蛋白酶分散胚胎細胞,然后在胚胎成纖維細胞飼養層上培養從斑馬魚囊胚和原腸期胚獲得的原代細胞。實驗材料鏈酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L EDTA胚胎成纖維細胞飼養層人重組白血病抑制因子試劑、試劑盒LDF基礎培養液LDF原代培養液LDF維持培

    方案27.6 斑馬魚胚胎細胞的培養

    成纖維細胞飼養層 原代培養 細胞系 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過用鏈酶蛋白酶除去絨毛膜、用添加成分的 FGF 培養液培養細胞和采用不同的胰蛋白酶消化

    斑馬魚胚胎細胞的培養——成纖維細胞飼養層

    實驗方法原理 通過用鏈酶蛋白酶除去絨毛膜、用添加成分的 FGF 培養液培養細胞和采用不同的胰蛋白酶消化篩選成纖維細胞,用原腸胚期斑馬龜的胚胎成纖維細胞制備飼養層 [ Sun et al., 1995a ]。 實驗材料 鏈酶蛋白酶E用D-PBSA配制1%胰蛋白酶和1mmol L E

    斑馬魚胚胎DNA的制備

    材料和試劑 1.????????蛋白酶K(羅氏03115836001) 2.??????? 1M的Tris,pH值8.3 3.??????? 氯化鉀 4.??????? 吐溫20(10%,EMD4 biosciences,655207) 5.??????? NP40(10%,

    組織靶向性胚胎嵌合體—斑馬魚囊胚細胞移植

    真核生物的基因調控比原核生物復雜得多。這是因為這兩類生物在三個不同水平上存在著重大的差別: ①在遺傳物質的分子水平上,真核細胞基因組的DNA含量和基因的總數都遠高于原核生物,而且 DNA不是染色體中的唯一成分,DNA和蛋白質以及少量的RNA構成以核小體為基本單位的染色質; ②在細胞水平上,真核

    人胚胎干細胞系:衍生與培養實驗—人胚胎干細胞系的建立

    實驗步驟 方 案 2. 6 人 胚 胎 干 細 胞 系 的 建 立 試劑與材料 無菌或無菌制備 □ 5?6 天的人胚泡,經 H F E A 允許,并且像先前討論的完全經病人同意。 HFEA所要求的全部細節能夠在 H E F A 的網站找到(http//:www.hfea.g0v.u

    通過流式細胞儀研究斑馬魚胚胎中細胞周期分析

    [精華提要]結合綠色熒光蛋白表達的細胞周期分析廣泛的用于研究綠色熒光蛋白標記的細胞的細胞周期分布。這個方案是一種用綠色熒光蛋白標記的斑馬魚胚胎來分析細胞周期的方法。 材料與試劑 1.??????? PBS(Invitrogen公司14040) 2.??????? 胎牛血清 3.?

    人胚胎干細胞系:衍生與培養—小鼠胚胎飼養細胞的制備

    實驗步驟 2.3 小 鼠 胚 胎 飼 養 細 胞(MEF) 的 制 備 最廣泛地用于支持 h E S 的伺養層細胞來自小鼠胚胎 [丁]^〇 1113 〇 1161&1,, 1998;Reu-binoffetal. , 2000],如小鼠胚胎飼養細胞(MEFs) ,盡管它們可能是最原始的

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