血管內皮細胞的分離和培養_分離人臍靜脈內皮細胞
實驗方法原理本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改寫的。實驗材料D-PBSA胰蛋白酶EDTA人臍帶膠原蛋內酶H冷的新生小牛血試劑、試劑盒Hank平衡鹽溶液HBSS PSG70%乙醇HUVRC生長培養液儀器、耗材培養瓶手術刀和22號刀片手術針20ml注射器鱷魚夾動脈夾尖頭剪棉紙鋁箔塑料薄膜或莎綸封皮軟木板很堅韌的線Luer接合管實驗步驟內皮細胞的分離1. 用鋁箔覆蓋軟木板。2. 將棉紙鋪在鋁箔上面,然后用 70 % 乙醇浸泡。3. 擠出臍帶中的血液。4. 切除臍帶一端 2 cm 或 2 cm 以上,包括動脈夾痕跡處。5. 將 Luer 接合管外套插入靜脈。6. 用針將臍帶釘在軟木板上,但注意勿穿經血管腔。7. 用手術刀和手術鑷剝出一段靜脈,長約 2 cm。8. 縫線固定接合管,緊緊打結兩次。9. 夾閉臍帶另一端,將 20 ml 注射器接在接合管上,再將 25 ml D-PBSA (放在冰上)注入臍帶。靠 D-PBS......閱讀全文
血管內皮細胞的分離和培養_分離人臍靜脈內皮細胞
實驗方法原理本方法是由 Jaffe 等 [ 1973 ] 的方法改寫的。實驗材料D-PBSA胰蛋白酶EDTA人臍帶膠原蛋內酶H冷的新生小牛血試劑、試劑盒Hank平衡鹽溶液HBSS PSG70%乙醇HUVRC生長培養液儀器、耗材培養瓶手術刀和22號刀片手術針20ml注射器鱷魚夾動脈夾尖頭剪棉紙鋁箔塑料
人臍靜脈內皮細胞分離培養儀器試劑和操作步驟
溶液以及器材:1、用RPMI-1640配I型膠原酶 0.1g/100ml2、配三抗:青霉素:100ku/L鏈霉素:100ku/L慶大霉素:100ku/L3、培養液(M199+ECGS[3ug/ml]+15%胎牛血清)有EGF可以適當加點10ng/ml4、大瓶生理鹽水5、廣口瓶(臍帶數+1)6、止血鉗
人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)培養
人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)可用于:(1)作為體外實驗模型細胞;(2)研究血管內皮細胞的生物學特性及其與各種疾病的關系。實驗方法原理本實驗采用新鮮的健康產婦新生兒臍帶,采用膠原酶Ⅰ型用消化分離得到臍靜脈內皮原代細胞。膠原酶是最理想的血管內皮細胞分離酶,對細胞間質有較強的消化作用,能使上皮細胞與膠原
人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)培養
人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)培養1 ).?將15-20cm長的新生兒臍帶放入無菌的PBS溶液中儲存。(注:4℃下最多貯存24小時,室溫下不超過6小時,否則廢棄)2 ).?用一個鈍頭的針頭扎入臍帶靜脈管中,用無菌的PBS溶液沖洗3-5次,將污血沖洗干凈為止。3 ).?用手術鉗夾緊臍帶下端,加入15m
人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)培養
人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)培養?1. 將 15-20cm 長的新生兒臍帶放入無菌的 PBS 溶液中儲存。(注:4℃下多貯存 24 小時,室溫下不超過 6 小時,否則廢棄)?2. 用一個鈍頭的針頭扎入臍帶靜脈管中,用無菌的 PBS 溶液沖洗 3-5 次,將污血沖洗干凈為止。?3. 用手術鉗夾緊臍帶
人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)培養
1. 將 15-20cm 長的新生兒臍帶放入無菌的 PBS 溶液中儲存。(注:4℃下最多貯存 24 小時,室溫下不超過 6 小時,否則廢棄)2. 用一個鈍頭的針頭扎入臍帶靜脈管中,用無菌的 PBS 溶液沖洗 3-5 次,將污血沖洗干凈為止。3. 用手術鉗夾緊臍帶下端,加入 15ml 的膠原酶(1mg
人臍靜脈內皮細胞(HUVEC)培養
實驗材料 新生兒臍帶試劑、試劑盒 PBS膠原酶M199培養基胰酶EDTADMEM培養基儀器、耗材 針頭手術鉗離心管低溫離心機彎管明膠恒溫培養箱顯微鏡實驗步驟1. 將15-20cm 長的新生兒臍帶放入無菌的PBS 溶液中儲存。(注:4℃下最多貯存24 小時,室溫下不超過6 小時,否則廢棄)2. 用一個
血管內皮細胞的分離和培養_分離小鼠心臟內皮細胞
實驗方法原理本方法是由 Marelli-Berg 等 [ 2000 ] 的方法改寫的。實驗材料小鼠心臟膠原蛋白酶A無關對照抗體大鼠抗小鼠內皮糖蛋白(endoglin)(CD105)抗體山羊抗大鼠IgG微珠試劑、試劑盒MCEC生長培養液非內皮細胞培養液HBSS PSHHSS FBCMF胰蛋白酶和EDT
血管內皮細胞的分離和培養_分離人心臟內皮細胞(HCEC)
實驗方法原理根據 McDouall 等 [ 1996 ] 的方法可以分離人的 CEC。實驗材料Ⅱ型膠原蛋白酶試劑、試劑盒HCEC生長培養液儀器、耗材磁珠實驗步驟1. 按分離小鼠心臟內皮細胞的步驟操作。2. 在步驟 7 用 Ⅱ 型膠原蛋白酶(1 mg/ml)消化組織。3. 按照方案23.28C 的步驟
分離和培養人角膜內皮細胞實驗——分離人角膜內皮細胞
實驗材料完整的人角膜試劑、試劑盒CMF-SalineG胰蛋白酶 EDTADMEM F-12 GASPDMEM F-12 2FB:DMEM:Ham’sF-12 1:1 含2%FBSCMF GASP儀器、耗材手術刀或單刃安全刀片彎虹膜剪 11cm(4-3 8 in.)Jeweler’s懾子 10cm(4