石蠟切片免疫組化實驗3
卵白素-生物素-過氧化物酶復合物（ABC）法實驗材料蠟塊切片試劑、試劑盒多聚甲醛蒸餾水蔗糖過氧化氫甲醇PBS酒精KPBS牛血清白蛋白疊氮納一抗二抗儀器、耗材冰箱顯微鏡燒杯實驗步驟1. 4%多聚甲醛常規灌注固定，取材并置20%蔗糖溶液（4℃）中過夜。蠟塊制作。切片，貼片。0.01 M KPBS清洗5 min×3后； 2. 加入配好的0.3%的過氧化氫甲醇溶液（甲醇80 ml+0.01 M KPBS 100 ml+30%過氧化氫）30 min，以消除內源性過氧化物酶的影響，0.01 M PBS清洗5 min×3； 3. 加入配好的0.3% Triton X100（30% Triton X100+0.01 M KPBS 100 ml）30 min，以增加細胞的通透性，0.01 M KPBS清洗5 min×3； 4. 加入用血清稀釋液（......閱讀全文
石蠟切片免疫組化實驗3
卵白素-生物素-過氧化物酶復合物（ABC）法實驗材料蠟塊切片試劑、試劑盒多聚甲醛蒸餾水蔗糖過氧化氫甲醇PBS酒精KPBS牛血清白蛋白疊氮納一抗二抗儀器、耗材冰箱顯微鏡燒杯實驗步驟1. ?4%多聚甲醛常規灌注固定，取材并置20%蔗糖溶液（4℃）中過夜。蠟塊制作。切片，貼片。0.01 M KPBS清洗5
石蠟切片免疫組化實驗
即用型(Envision)快速酶免疫組化二步法 鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結SP法 卵白素-生物素-過氧化物酶復合物（ABC）法 鏈霉親和素—生物素—過氧化物酶復合物（SABC）法 ? ? ? ? ? ?
石蠟切片免疫組化實驗
即用型(Envision)快速酶免疫組化二步法免疫組化可應用于：（1）確定組織細胞內抗原 (多肽和蛋白質)，對其進行定位、定性及定量的研究；（2）診斷異常細胞，指導治療。實驗方法原理根據聚合酶技術把辣根過氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子結合在多聚酶上形成多聚物分子,其與待檢的抗原特異性的結合后，加入
石蠟切片免疫組化實驗
實驗方法原理 根據聚合酶技術把辣根過氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子結合在多聚酶上形成多聚物分子,其與待檢的抗原特異性的結合后，加入底物顯色。實驗材料 石蠟切試劑、試劑盒 PBS檸檬酸鹽緩沖液蒸餾水增強劑酶標抗鼠 兔聚合物蘇木素酒精二甲苯樹膠鹽酸二氨基聯苯胺儀器、耗材 烘箱微波盒塑料切片架顯微鏡膠頭
石蠟切片免疫組化實驗4
實驗方法原理SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一種顯示組織和細胞中抗原分布的簡便而敏感的免疫組化染色方法，是眾多免疫組織化學方法的一種。SABC法：一抗+ 生物素標記二抗+ 滴加試劑SABC（鏈霉卵白素+ 辣根酶標記生物素）+ 辣根酶底物顯色。目前常用的親和素從
石蠟切片免疫組化實驗2
鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結SP法實驗方法原理SP（streptavidin-perosidase）法，即鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結法。SP法是最常使用的方法。試劑、試劑盒二甲苯酒精PBS雙氧水枸櫞酸緩沖液羊血清工作液辣根過氧化物酶鏈霉素卵白素蘇木素DAB儀器、耗材冰箱顯微鏡燒杯玻璃缸
石蠟切片免疫組化實驗步驟
脫蠟和水化1. 將切片依次浸入二甲苯Ⅰ10 min，二甲苯Ⅱ（10 min）。2. 再次浸入無水乙醇Ⅰ（5 min）-無水乙醇Ⅱ（5 min）-95%酒精（5 min）-80%酒精（5 min）-70%酒精（5 min），然后去離子水沖洗2次，每次2 min。 抗原修復?(可選)3. 將組織切片放入
石蠟切片免疫組化染色實驗操作流程
1．石蠟切片脫蠟至水：（石蠟切片染色前應置 60℃ 1 小時） 。① 二甲苯 、II，各 10 分鐘。② 梯度酒精：100%，2 分鐘 95%，2 分鐘 80%，2 分鐘 70% 2 分鐘。③ 蒸餾水洗：5 分鐘，2 次（置于搖床）。2．過氧化氫封閉內源性過氧化物酶：3%H2 O2 ，室溫 10 分
石蠟切片免疫組化染色
實驗概要掌握石蠟切片免疫組化染色實驗中載玻片的處理，常用酶消化，抗原熱修復及基本實驗步驟。實驗步驟1. 載玻片的處理 ??? 1) APES：現用現配。將洗凈的玻片放入以1:50比例丙酮稀釋的APES中，停留20~30秒鐘，取出稍停片刻，再入純丙酮溶液或蒸餾水中涮去未結合的APES，置通風櫥
石蠟切片免疫組化染色
實驗概要掌握石蠟切片免疫組化染色實驗中載玻片的處理，常用酶消化，抗原熱修復及基本實驗步驟。實驗步驟1. 載玻片的處理 ??? 1) APES：現用現配。將洗凈的玻片放入以1:50比例丙酮稀釋的APES中，停留20~30秒鐘，取出稍停片刻，再入純丙酮溶液或蒸餾水中涮去未結合的APES，置通風櫥