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改良的 EnVision-HRP/AP 雙酶雙底物的雙重免疫染色（間接法）——Ki-67-CK20 等多種組織抗原配對的雙重酶實驗步驟1. 恒冷切片或石蠟切片，厚 4～6 μm，常規處理。2. 0.1％NaN3+0.3％H2O2/TBS（50 mmol/L，pH 7.8）或 0.3％H2O2/甲醇，室溫 20 min（阻斷內源性過氧化物酶活性）。3. TBS 洗 5～10 min×3。4. 一抗 CK20（McAb）1:100，4℃，過夜。5. TBS 洗 5 min×3。6. EnVision-HRP（羊抗鼠）試劑，室溫 30 min。7. TBS 洗 5 min×3。8. 正常鼠血清 1:10，室溫 15 min（封閉前重標記一抗的游離位點）。9. TBS 洗 5 min×3。10. 第二種特異性一抗 Ki-67（McAb）1:100，37℃ 孵育 120 min，TBS 洗 5 min×3。11. 生物素化羊抗鼠 IgG1......閱讀全文
改良的 EnVision-HRP/AP 雙酶雙底物的雙重免疫染色（間接法）——Ki-67-CK20 等多種組織抗原配對的雙重酶 實驗步驟 1. 恒冷切片或石蠟切片，厚 4～6 μm，常規處理。 2. 0.1％NaN3+0.3％H2O2/TBS（50 mmol/L，pH
實驗步驟 1. 石蠟切片常規脫蠟至水（若用含汞固定液固定的組織，則需用內含 0.5％ 碘的乙醇溶液脫汞 5 min，乙醇濃度為 70％，經自來水洗后以 2.5％ 硫代硫酸鈉浸洗 1 min，水洗）。 2. 0.3％H2O2 甲醇液浸泡切片 30 min，自來水洗，蒸餾水洗，
1 病歷摘要患者女，64 歲。 因左側頭面及右側腰腹部出現簇 集水皰伴疼痛 7 d 至我院就診。患者 7 d 前無明顯誘因 左側頭皮、額面部疼痛不適，呈間歇性刺痛，不久左側 頭皮、額部開始出現片狀紅斑，其上見散在丘皰疹、水 皰，且右腰腹開始出現簇集丘皰疹，疼痛明顯，無明顯 發熱等癥狀。未行相關治療，
?? ???泛素-蛋白酶體（ubiquitin-proteasome system，UPS）途徑介導的蛋白降解是機體調節細胞內蛋白水平與功能的一個重要機制。負責執行這個調控過程的組成成分包括泛素及其啟動酶系統和蛋白酶體系統。泛素啟動酶系統負責活化泛素，并將其結合到待降解的蛋白上，形成靶蛋白多聚泛
實驗概要掌握質粒DNA雙酶切的原理和操作方法。實驗原理分子生物學實驗中，基因的重組與分離涉及到一系列的酶促反應。許多種酶在基因克隆實驗中有著廣泛的用途。限制性內切酶是一類能識別雙鏈DNA分子特異性核酸序列的DNA水解酶。多種細菌能合成限制性核酸酶，這是它們保護自己，降解外來DNA分子的重要手段。每一
1、 在雙酶切載體時如果2個酶切位點靠得很近，必須注意酶切順序。因為有的限制性內切酶要求其識別序列的兩端至少保留有若干個堿基才能保證酶的有效切割。有的酶要求識別序列兩端有多個堿基的，則必須先切，否則就可能造成酶切失敗。2、 回收PCR產物：回收的PCR產物片段=1：10 ，一般取前者0.03pmol
雙酶切buffer的選擇： 1、U ：Supplied with its own unique reaction buffer that is different from the four standard NEBuffers. Its compatibility with the fou
同步雙酶切是一種省時省力的常用方法。選擇能讓兩種酶同時作用的最佳緩沖液是非常重要的一步。NEB每一種酶都隨酶提供相應的最佳 NEBuffer，以保證100%的酶活性。NEBuffer的組成及內切酶在不同緩沖液中的活性見《內切酶在不同緩沖液里的活性表》及每支酶的說明書。能在最大程度上保證兩種酶活性
在復合物體系中連接更多的PAP復合物，來進一步放大抗原，從而使靈敏度更為增強，適用于檢測微量抗原。實驗方法：?將固定后的標本用PBS漂洗；2.?于室溫下用1%H2O2或1%H2O2甲醇浸泡涂片10~20min，用來密封內源性過氧化物酶；3.?PBS漂洗2次，每次3min；4.?在室溫下用二抗的正常血
同步雙酶切是一種省時省力的常用方法。選擇能讓兩種酶同時作用的最佳緩沖液是非常重要的一步。NEB每一種酶都隨酶提供相應的最佳NEBuffer，以保證100%的酶活性。NEBuffer的組成及內切酶在不同緩沖液中的活性見《內切酶在不同緩沖液里的活性表》及每支酶的說明書。能在最大程度上保證兩種酶活性的緩