病毒的血清學實驗
間接免疫熒光法檢測人類巨細胞病毒早期抗原（HCMV-EA）實驗方法原理人類巨細胞病毒（HCMV）感染細胞后，經短期培養48～72 小時，可產生早期蛋白抗原（HCMV-EA），應用已知抗HCMV-EA 的單克隆抗體（McAb-20 K）與之結合，再加入熒光素（FITC）標記羊抗人IgG 熒光抗體，在熒光鏡下檢查，可見細胞核內或胞漿內有黃綠色熒光。實驗步驟將已經處理的待檢尿液混合于人胚肺纖維母細胞（HEL）中，然后用4 號針頭滴加于印有小孔的滅菌玻片上，放CO2 孵育箱中，37 ℃短期培養（48～72 小時）制抗原滴片。取出抗原滴片，冷丙酮固定30 分鐘。用0.0l mol/L pH7.8 PBS 漂洗一次，滴加一定稀釋度的HCMVAb-20 K 37 ℃孵育2 小時。取出抗原滴片再用PBS 沖洗三次，吸干滴加FITC 標記的羊抗人IgG 熒光抗體，置37 ℃2 小時。再經PBS 洗滌三次，吸干，滴加甘油緩沖液于熒光顯微鏡......閱讀全文
慢病毒包裝實驗
慢病毒載體包裝之后成為假病毒顆粒后，可用于：（1）感染原代培養細胞；（2）制備穩定表達/沉默特定基因的單克隆細胞株；（3）in vivo的基因操作、轉基因動物，特別是轉基因大鼠的制備。實驗方法原理慢病毒是反轉錄病毒的一種，具有反轉錄病毒的基本結構和特性：整合入宿主細胞基因組，長期表達，可用于轉基因動
慢病毒包裝實驗
實驗材料 病毒試劑、試劑盒 無血清培養基脂質體胰酶含血清的培養基DMEM儀器、耗材 EP管6孔板CO2培養箱高速離心機-80°C冰箱實驗步驟 以六孔板中的1孔為例，每個樣品需要1×106個293T細胞。?1. 取1.5ml滅菌EP管，加入1.5μg包裝混合質粒和0.5μg表達質粒以及250μl的無血
慢病毒包裝實驗
慢病毒包裝實驗 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 慢病毒是反轉錄病毒的一種，具有反轉錄病毒的基本結構和特性：整合入宿主細胞基因組，長期表達，可用于轉基因動物制備；但也有不同于反轉
痘苗病毒純化實驗
痘苗病毒通常采用蔗糖密度梯度離心的方法純化。純化的病毒可用于制備痘苗病毒 DNA ，用于不允許存在感染細胞蛋白污染的研究中，同時也可以用作高滴度的病毒儲液。對于大規模的純化（至少 1 L 的培養物），最好的方法是用 HeLa 細胞懸液作為感染的對象，而不要用單層培養的細胞。內容來源于《精編分子生物學
痘苗病毒純化實驗
大規模純化 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 對于很多研究，部分純化的病毒就足夠了（進行到本實驗步驟 14）， 如果是純化 MVA 病毒，則不能用胰酶消化，也不能用 CEF 細胞
病毒免疫熒光實驗_病毒染色標本的制備
實驗材料待檢測病毒試劑、試劑盒丙酮0. 01mol L PBS95%乙醇二甲苯儀器、耗材玻片實驗步驟1. 培養細胞小玻片標本的制備 根據所檢測病毒種類，選擇敏感細胞進行培養，如乙型肝炎病毒用乳地鼠腎細胞 (BHK21 細胞）培養，森林腦炎病毒用綠猴腎細胞 (Vero 細胞）培養，登革熱病毒用白紋伊蚊
血清學篩選克隆新抗原/新基因——血清學篩選法
通過以血清的各種反應為中心的機體免疫反應和變態反應的研究體系來篩選新抗原和新基因。實驗材料大腸桿菌試劑、試劑盒TBST 裂解液 血清 NZY top IPTG 一抗 二抗 SM 封閉液 MgSO4 LB AP BCIP-NBT 顯色液儀器、耗材硝酸纖維素膜 濾紙 冰箱 培養箱 水浴鍋 平板 脫色搖床
軍團病的血清學檢查
（1）間接熒光抗體法雙份血清抗體效價增高4倍以上，且≥1：128，或者恢復期單份血清效價≥1：956者可以診斷本病，多于3周末（少數6周）血清抗體效價可達診斷標準。本法陽性率約80%。（2）直接熒光抗體法：由已知抗體檢測患者呼吸道分泌物的致病菌，陽性率可達50%，可做早期診斷。[6]
血清學的主要成分
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等，這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
血清學的鑒別方法
血液凝固析出的淡黃色透明液體。如將血液自血管內抽出，放入試管中，不加抗凝劑，則凝血反應被激活，血液迅速凝固，形成膠凍。凝血塊收縮，其周圍所析出之淡黃色透明液體即為血清，也可于凝血后經離心取得。在凝血過程中，纖維蛋白原轉變成纖維蛋白塊，所以血清中無纖維蛋白原，這一點是與血漿最大的區別。而在凝血反
蘇云金桿菌的血清學鑒定
一、目的： 1、學習抗原 ?及抗體的制備方法 2、學習試管凝集反應的方法及效價的測定 3、學會分析不同抗原（o抗原、H抗原）的方法 二、實驗原理 將生物細胞或它們的磨碎物。提取物等注射到熱血動物體內，動物血液中可以產生與注射物起作用的物質——抗體。能誘發抗體產生的注射物稱為抗原。含有抗體的血清稱為免
炭疽桿菌的血清學檢查
1、Ascoli沉淀反應 由Ascoli于1902年創立，是用加熱抽提待檢炭疽菌體多糖抗原與已知抗體進行的沉淀試驗。在一支小玻璃管內把疑為炭疽病死亡動物尸體組織的浸出液與特異性炭疽沉淀素血清重疊，如在二液接觸面產生灰白色沉淀環，即可診斷。本法適用于各種病料、皮張，甚至嚴重腐敗污染的尸體材料，方
細菌感染的血清學試驗
血清學試驗指在體外用已知抗體（或抗原 ?）檢測抗原（或抗體），是臨床細菌性疾病診斷和病原菌鑒定的重要手段之一。血清學試驗可分為血清學鑒定和血清學診斷兩部分。用已知抗體(即含特異抗體的免疫血清或單克隆抗體等)檢測標本中或分離培養物中未知細菌的種、型或細菌抗原，稱為血清學鑒定；而用已知細菌或特異性抗原檢
血清學檢測方法的原理
血清學檢測方法,在醫學及生物學研究中起著重要的作用,并被廣泛應用。其基本原理,就是利用抗原(antigen)抗體(antibody)特異反應來實現的。抗原,分成完整抗原和半抗原,完整抗原是一種具有生物學活性物質或化合物,當它被注射到動物中時能誘導產生特異抗體,抗原和它誘導產生的特異抗體能產生免疫反應
血清學檢測方法的原理
血清學檢測方法，在醫學及生物學研究中起著重要的作用，并被廣泛應用。其基本原理，就是利用抗原（antigen）抗體（antibody）特異反應來實現的。抗原，分成完整抗原和半抗原，完整抗原是一種具有生物學活性物質或化合物，當它被注射到動物中時能誘導產生特異抗體，抗原和它誘導產生的特異抗體能產生免疫反應
病毒的分離實驗_標本法
實驗步驟標本的采集：病毒分離常用的標本有血液，腦脊液，糞便，直腸拭子，咽喉含漱液，咽拭子，尸檢組織等。所取標本的種類視疾病性質而異。如呼吸道疾病常取咽喉洗液，咽拭子；消化道疾病取糞便，直腸拭子；神經系統疾病取腦脊液，糞便等。采取標本時應避免污染，有些標本如糞便，咽喉洗液，雖本身含有大量雜菌，但為保持
病毒的滴定實驗——稀釋法
實驗步驟1. ?以維持液（0.5% 水解乳蛋白Hank's 液）將病毒作連續10 倍稀釋（每一稀釋度換一新吸管）。2. ?如選擇滴定的稀釋度為l0-6～10-8，則于試管架上排列8 支試管。l0-1～10-5共5 支管，每管如入1.8 毫升維持液；l0-6～10-8共3 管，每支加入4.5
JAMA：接種HIV疫苗可誘發病毒血清學假陽性反應
美國學者的一項研究表明，在接種HIV疫苗的受試者中疫苗誘發的血清學陽性反應（VISP）相當常見，其原因可能與疫苗免疫原性和所用的檢測方法有關。論文發表于《美國醫學會雜志》（J Am Med Assoc 2010，304(3):275）。 誘發保護性抗HIV免疫反應是HIV疫苗的主要目
時間分辨熒光免疫分析技術－(TRFIA)－在乙肝病毒血清學標...
時間分辨熒光免疫分析技術 (TRFIA) 在乙肝病毒血清學標志物檢測中的應用【摘要】 目的 調查時間分辨熒光免疫分析技術 (TRFIA) 在乙型肝炎血清學標志物檢測中的應用情況。方法 采用 AT-2000 時間分辨熒光免疫分析儀及配套試劑對 180 例正常人血清及 46 例乙型肝炎患者血清用 T
病毒－DNA－的提取實驗——培養細胞中病毒－DNA－的提取
實驗材料細胞試劑、試劑盒裂解液TE 緩沖液儀器、耗材培養瓶EP管真空泵實驗步驟1. 貼壁培養細胞傾去培養液，加 PBS 洗 2次,加胰蛋白酶消化 (37℃, 5~10 min)后移入Ep管中，2000 r/min 離心 10 min, 棄上清液，用 PBS 懸浮細胞，離心洗滌 2~3次，用 PBS
血清學篩選噬菌體
1. 準備 NZY agar plates（至少用前 24 小時倒好） ，用前在37℃培養箱中烘烤1-2 小時以去除水滴。2. 將過夜培養的 XL1-blueMRF' 細菌 2000 轉/ 分，離心10 分鐘，將細菌溶解在10mMMgSO4 中，調整細菌濃度為 OD600=0.5。3. 融化
血清學抗體檢測
隨著世界上越來越多的國家和地區將重啟社會經濟、恢復人們日常生活提到日程上來，針對新冠病毒疾病（COVID-19）的血清學檢測（serological test）成為人們關注的焦點之一。這種檢測能夠幫助發現曾經受過新冠病毒感染的人群，而受過感染的人群可能對新冠病毒已經產生免疫力。發現產生免疫力的人
病毒中和實驗_固定抗血清－稀釋病毒法
實驗材料已知標準的抗病毒血清 (20抗體單位 0. 1 ml)試劑、試劑盒已知陰性血清 (56℃ 30 min 滅活）宿主：敏感細胞、敏感動物、雞胚儀器、耗材細胞培養板水浴鍋細胞培養箱實驗步驟（以細胞培養為例）：①用細胞維持液連續 10倍稀釋病毒分離物10-1~10-8);②取 0. 6ml不同濃度
病毒中和實驗_固定病毒－稀釋抗血清法
中和試驗 (neutralization test)是在體外適當條件下孵育病毒與特異性抗體的混合物，使病毒與抗體相互反應，再將混合物接種到敏感的宿主體內，然后測定殘存的病毒感染力的一種方法。凡是能與病毒結合，并使其失去感染力的抗體稱為中和抗體。因為病毒要依賴于活的宿主系統復制增殖，因此，中和試驗必須
病毒包裝技術——病毒包裝實驗經驗總結
第一，細胞狀態、載體系統、目的基因對病毒包裝影響(基因大小、序列情況、蛋白功能毒性等）是三個主要影響病毒質量的因素。第二，細胞狀態需要有豐富的細胞培養經驗來判斷，比如包裝或轉染感染前一定要重視細胞干凈細微污染與否、飽滿立體感是否好、鋪板均勻細胞密度適中否等性狀。另外轉染時細胞的密度要十分注意，一般在
甲狀腺結節的血清學檢查介紹
甲狀腺功能異常不能排除甲狀腺癌但說明其可能較小，有甲亢或TSH降低，均提示自主性功能性甲狀腺腺瘤、結節或毒性多結節性甲狀腺腫。甲狀腺髓樣癌患者血清降鈣素水平升高，但在C細胞增殖早期需要用五肽促胃液素和鈣刺激。
血清學反應的臨床意義
異常結果： (1) 抗原與抗體的結合具有高度特異性，但當兩種不同抗原分子上有共同抗原決定簇存在時，則與抗體結合時可出現交叉反應。 (2) 抗原與抗體的結合是分子表面的結合。兩者的結合雖相當穩定，但是可逆的，在一定條件下可發生解離，解離后的抗原、抗體性質不變。 (3) 抗原、抗體的結合按一定
血清學反應的正常值
異常結果： (1) 抗原與抗體結合時沒有交叉反應。 (2) 解離后的抗原、抗體性質不變。 (3) 沒有未結合的抗原或抗體游離于上清液中。
血清學反應的臨床意義
異常結果： (1) 抗原與抗體的結合具有高度特異性，但當兩種不同抗原分子上有共同抗原決定簇存在時，則與抗體結合時可出現交叉反應。 (2) 抗原與抗體的結合是分子表面的結合。兩者的結合雖相當穩定，但是可逆的，在一定條件下可發生解離，解離后的抗原、抗體性質不變。 (3) 抗原、抗體的結合按一定
血清學反應的注意事項
不合宜人群：反復溶血。 檢查前禁忌：避免服用氧化性藥物，保持空腹抽血。 檢查時要求：無特殊要求。
