凝膠遷移或電泳遷移率實驗(EMSA)
實驗概要凝膠遷移或電泳遷移率實驗是一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用的技術，可用于定性和定量分析。通常將純化的蛋白或細胞粗提液和標記的DNA探針一同保溫，在非變性的聚丙烯凝膠電泳上，分離復合物和非結合的探針。DNA-復合物比非結合的探針移動得慢。標記的探針依研究的結合蛋白的不同，可是雙鏈或者是單鏈。當檢測如轉錄調控因子一類的DNA結合蛋白，可用純化蛋白，粗蛋白或核細胞抽提液。競爭實驗中采用含蛋白結合序列的DNA片段和寡核營酸片段(特異)和其它非相關的片段(非特異)來確定DNA結合蛋白的特異性。在競爭的特異和非特異片段的存在下，依據復合物的特點和強度來確定特異結合。實驗步驟1. 探針的標記探針為含有與蛋白特異結合的中心盒，大約20 bp左右，使用pierce公司的3’末端標記試劑盒(PIERCE，Rockford，IL，USA)標記。操作步驟參照說明書，具體步驟如下： 1) 將試劑盒中除......閱讀全文
凝膠遷移實驗（EMSA）——凝膠遷移
凝膠遷移或電泳遷移率實驗（EMSA）可以：（1）研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用；（2）可用于DNA定性和定量分析；（3）用于研究RNA結合蛋白和特定的RNA序列的相互作用。實驗方法原理一種研究DNA結合蛋白和其相關的DNA結合序列相互作用的技術，可用于定性和定量分析。這一技術最初
凝膠成像儀凝膠成像定義
圖像分析程序，適用于ID膠、斑點/狹縫印跡、平板、菌落、放射自顯影、多排膠、蛋白膠、GFP、PCR、考馬斯亮藍及銀染的膠及ZYMA膠；可進行凝膠圖像分析、克隆計數分析、手動條帶定量和斑點分析。
凝膠色譜儀凝膠的特征
凝膠色譜儀凝膠的特征參數有排阻極限、滲透極限、吸水率、凝膠粒徑、床體積和空隙體積等。一、排阻極限：指不能進入凝膠色譜柱凝膠顆粒孔內的zui小分子的相對分子質量。二、滲透極限：指能夠完全進入凝膠色譜柱凝膠顆粒孔內的zui大分子的相對分子質量。三、吸水率（溶脹率）：吸水率 = [（m溶脹平衡后凝膠－m干
凝膠電泳中凝膠的意義
凝膠電泳儀需要使用形成為平板的凝膠,該凝膠通常由純化后的海藻瓊脂糖瓊脂糖制成。瓊脂糖凝膠制成多孔基質,各種大小的帶電分子可以通過多孔基質以不同的速度傳播。在將凝膠倒入模具之前,將一種稱為溴化乙錠(EtBr)的化學物質添加到凝膠溶液中。如果要分離的DNA或蛋白質分子很小,則可能需要使用聚丙烯酰胺凝膠代
凝膠色譜
凝膠色譜1．原理凝膠色譜的原理比較特殊，類似于分子篩。待分離組分在進入凝膠色譜后，會依據分子量的不同，進入或者不進入固定相凝膠的孔隙中，不能進入凝膠孔隙的分子會很快隨流動相洗脫，而能夠進入凝膠孔隙的分子則需要更長時間的沖洗才能夠流出固定相，從而實現了根據分子量差異對各組分的分離。調整固定相使用的凝膠
凝膠層析
凝膠層析?凝膠層析又稱為分子篩層析或凝膠過濾。具有分子篩作用的物質很多，如浮石、瓊脂、瓊脂糖、聚乙烯醇、聚丙烯酰胺、葡聚糖凝膠等。以葡聚糖凝膠應用最廣，商品名是sephadex型號很多，從G10到G200，它的主要應用范圍是：①分級分離各種抗原與抗體；②去掉復合物中的小分子物質。如除鹽、熒光素和游離
凝膠阻滯
一、原理 電泳遷移率分析，也可稱作遷移電泳，凝膠電泳分析，凝膠遷移率分析，條帶移動分析或者凝膠阻滯分析，這種方法常用來研究蛋白質-DNA，蛋白質-RNA的相互作用，對照泳道（不含蛋白質的DNA/RNA探針）將出現單一的條帶。如果蛋白質與片段結合，形成大的復合物，因此在凝膠上遷移的速度慢從來遷移率減
凝膠成像儀的凝膠成像種類
（1）UV凝膠成像分析系統：可以對蛋白電泳凝膠，DNA凝膠樣品進行圖象采集并進行定性和定量分析，樣品包括：EB、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸監測；以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、
凝膠過濾層析的凝膠層析的應用
⑴脫鹽：高分子（如蛋白質、核酸、多糖等）溶液中的低分子量雜質，可以用凝膠層析法除去，這一操作稱為脫鹽。本法脫鹽操作簡便、快速、蛋白質和酶類等在脫鹽過程中不易變性。適用的凝膠為SephadexG-10、15、25或Bio-Gel-p-2、4、6.柱長與直徑之比為5-15，樣品體積可達柱床體積的25%-
凝膠/化學發光成像系統凝膠成像種類
（1）普通凝膠成像分析系統：可以對蛋白電泳凝膠，DNA凝膠樣品進行圖象采集并進行定性和定量分析，樣品包括：EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸監測；以及Coomassie Blue、SYPR
蛋白質凝膠電泳凝膠的制備
【材料與試劑】（1）30%的丙烯酰胺：分別稱取29g 丙烯酰胺，1g N,N -亞甲雙丙烯酰胺加溫熱的去離子水60ml，加熱至37℃溶解，補加水至終體積為100ml,過濾，即配成30%（w/v）丙烯酰胺貯存溶液。丙烯酰胺和雙丙烯酰胺在貯存過程中緩慢轉變為丙烯酸和雙丙烯酸，這一脫氨基反應是光催化或
蛋白質凝膠電泳凝膠的制備
【材料與試劑】（1）30%的丙烯酰胺：分別稱取29g 丙烯酰胺，1g N,N -亞甲雙丙烯酰胺加溫熱的去離子水60ml，加熱至37℃溶解，補加水至終體積為100ml,過濾，即配成30%（w/v）丙烯酰胺貯存溶液。丙烯酰胺和雙丙烯酰胺在貯存過程中緩慢轉變為丙烯酸和雙丙烯酸，這一脫氨基反應是光催
蛋白質凝膠電泳凝膠的制備
蛋白質凝膠電泳通常用于（1）分析分子生物學、遺傳學和生物化學（2）制備技術（3)采用某些方法（如質譜(MS)、聚合酶鏈式反應(PCR)、克隆技術、DNA測序或者免疫印跡）檢測之前部分提純分子。實驗方法原理將蛋白質樣品同離子型去垢劑十二烷基硫酸鈉（SDS)以及硫基乙醇一起加熱，使蛋白質變性，多肽鏈內部
關于凝膠色譜法凝膠種類的介紹
1、凝膠色譜法—聚丙烯酰胺凝膠 是一種人工合成凝膠，是以丙烯酰胺為單位， 由甲叉雙丙烯酰胺交聯成的，經干燥粉碎或加工成形制成粒狀，控制交聯劑的用量可制成各種型號的凝膠。交聯劑越多，孔隙越小。聚丙烯酰胺凝膠的商品為生物膠－P （Bio-Gel P），由日本tosoh的TSKGEL的pw系列，適合
油田堵水復合鋁凝膠凝膠強度評價
我國油田普遍采用注水開發方式。由于地層的非均質性和油藏地層的復雜性，注入水會沿高申通孔道突入油井，導致油井大量出水，特別是在開發中后期，含水上升速度會加快。為提高水驅采收率，降低流體的含水量，必須對高滲透層進行封堵。目前通常采用化學試劑對水層進行封堵。按照堵劑的存在形態可分為凍膠型、分散體型、凝膠型
蛋白質凝膠電泳凝膠的制備
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 將蛋白質樣品同離子型去垢劑十二烷基硫酸鈉（SDS)以及硫基乙醇一起加熱，使蛋白質變性，多肽鏈內部的和肽鏈之間的二硫鍵被還原，肽鏈被打開。打開的肽鏈考疏水作用與SDS結合而帶負電荷，電泳時在電場作用下，肽鏈在凝膠中向正極遷移。不同
凝膠色譜法的凝膠種類及性質
⑴Sephadex G交聯葡聚糖的商品名為Sephadex，不同規格型號的葡聚糖用英文字母G表示，G后面的阿拉伯數為凝膠得水值的10倍。例如，G-25為每克凝膠膨脹時吸水2.5克，同樣G-200克每克干膠吸水20克。交聯葡聚糖凝膠的種類有G-10，G-15，G-25，G-50，G-75，G-100，
凝膠過濾色譜－與凝膠滲透色譜的區別
凝膠過濾色譜 與凝膠滲透色譜的區別是凝膠色譜以水為流動相的稱作凝膠過濾色譜，以有機溶劑為流動相的，稱作凝膠滲透色譜。
凝膠過濾色譜與凝膠滲透色譜的區別
凝膠色譜以水為流動相的稱作凝膠過濾色譜，以有機溶劑為流動相的，稱作凝膠滲透色譜。
凝膠滲透色譜
凝膠滲透色譜凝膠滲透色譜法主要用于有機溶劑中可溶的高聚物 (聚苯乙烯、聚氯已烯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等) 相對分子質量分布分析及分離，常用的凝膠為交聯聚苯乙烯凝膠，洗脫溶劑為四氫呋喃等有機溶劑。凝膠色譜不但可以用于分離測定高聚物的相對分子質量和相對分子質量分布，同時根據所用凝膠填料不同，可分離油
凝膠的選擇
凝膠的選擇根據所需凝膠體積，估計所需干膠的量。 一般葡聚糖凝膠吸水后的凝膠體積約為其吸水量的2倍，例如Sephadex G-20的吸水量為20，1 克Sephadex G─200吸水后形成的凝膠體積約40ml。凝膠的粒度也可影響層析分離效果。粒度細胞分離效果好，但阻力大，流速慢。一般實驗室分離蛋白質
凝膠的制備
凝膠的制備商品凝膠是干燥的顆粒使用前需直接在欲使用的洗脫液中膨脹。為了加速膨脹，可用加熱法，即在沸水浴中將濕凝膠逐漸升溫至近沸，這樣可大大中速膨脹，通常在1-2小時內即可完成。特別是在使用軟膠時， 自然膨脹需24小時至數天，而用加熱法在幾小時內就可完成。這種方法不但節約時間，而且還可消毒，除去凝膠中
凝膠成像定義
圖像分析程序，適用于ID膠、斑點/狹縫印跡、平板、菌落、放射自顯影、多排膠、蛋白膠、GFP、PCR、考馬斯亮藍及銀染的膠及ZYMA膠；可進行凝膠圖像分析、克隆計數分析、手動條帶定量和斑點分析。
凝膠成像種類
1）UV凝膠成像分析系統：可以對蛋白電泳凝膠，DNA凝膠樣品進行圖象采集并進行定性和定量分析，樣品包括：EB、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸監測；以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各種染
凝膠成像品牌
凝膠成像儀屬于高科技產品，是需要軟、硬件緊密一致配合的高端分子生物分析儀器。主要用于科研、醫療、教學等項目，目前國內進口品牌和國產品牌的市場占有率差不多。目前凝膠成像廠家很多，市場上常見的凝膠成像如：進口品牌進口品牌美國的市場上見的是相對比較多的有：UVP、伯樂、alpha、SIM、KODAK、GE
凝膠色譜現狀
由于歷史原因，凝膠色譜的理論發展、實驗技術和應用開發主要在生物化學和高分子化學領域內，對這項技術，不同工作者采用了不同的命名，從而造成了文獻中命名方面的混亂。文獻中用過的名稱有：凝膠過濾( Gel Filtration)、分子篩過濾(Molecular Sieve Filtration)、分子篩色譜
凝膠純化實驗
試劑、試劑盒 蒸餾水乙醇甲酰胺膠的緩沖液亞甲基藍十二烷基硫酸鈉儲存液TAE 緩沖液Tris 乙酸鹽乙酸納EDTA藍色葡聚糖TEN 緩沖液40mer聚丙烯酰胺膠儀器、耗材 解剖刀UV 燈過濾 UV 的安全破璃實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑蒸餾水乙醇，95%甲酰胺 (使用安珀萊特單床離子交換
凝膠純化實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 蒸餾水 乙醇 甲酰胺 膠的緩沖液 亞甲基藍 十二烷基硫酸鈉儲存液 TAE 緩沖液 Tris
如何選擇凝膠
生物分子下游純化的對象一般包括蛋白、酶、重組蛋白、單抗、抗體及抗原、肽類、病毒、核酸等。純化前首先需要測定生物分子的各物理和化學特性，然后通過實驗選擇出最有效的純化流程。?? ?? ?1.測定------分子量、PI? ?? ???當目標蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚時，可用PAGE電泳方法
凝膠電泳
以淀粉膠、瓊脂或瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等作為支持介質的區帶電泳法稱為凝膠電泳。其中聚丙烯酰胺凝膠電泳（polyacrylamide gel electrophoresis，PAGE）普遍用于分離蛋白質及較小分子的核酸。瓊脂糖凝膠孔徑較大，對一般蛋白質不起分子篩作用，但適用于分離同工酶及其亞型，大