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    冷凍細胞活化

    實驗概要1. 冷凍細胞之活化原則為快速解凍,以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害,導致細胞之死亡。 2. 細胞活化后,約需數日,或繼代一至二代,其細胞生長或特性表現才會恢復正常(例如產生單株抗體或是其它蛋白質)。實驗材料材料: 37 ℃ 恒溫水槽 新鮮培養基 無菌吸管/ 離心管/ 培養瓶 液氮或干冰容器 實驗步驟1 操作人員應戴防護面罩及手套,防止冷凍管可能爆裂之傷害。 2 自液氮或干冰容器中取出冷凍管,檢查蓋子是否旋緊,由于熱脹冷縮過程,此時蓋子易松掉。 3 將新鮮培養基置于37 °C 水槽中回溫,回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內。......閱讀全文

    克隆魚誕生50年 中國克隆技術陷入困境

      在不久前上映的美國大片《遺落戰境》中,由湯姆·克魯斯飾演的克隆人在發現自己的身份后,奮起反抗外星人,最終獲得勝利。   緊接著,電影《侏羅紀公園》再次講述了科學家利用DNA技術復活恐龍卻遭遇瘋狂獵殺的故事。   兩部大片不僅給觀眾帶來了強烈的視覺沖擊,也再度激起了人們對克隆技術的濃厚興趣。

    端粒酶研究領域的重要成果!

      本文中,小編整理了多篇研究報告,共同聚焦科學家們在端粒酶研究領域取得的重要成果,分享給大家!圖片來源:Vimeo  【1】PNAS:促進癌癥的端粒酶也能保護健康細胞  doi:10.1073/pnas.1907199116  馬里蘭大學和美國國立衛生研究院的新研究揭示了端粒酶的新作用。端粒酶在正

    2019年度黑龍江省自然科學基金項目擬立項名單公示

    序號項目名稱聯合單位101首部噴射抑制渦激振動的機理與技術研究哈爾濱工程大學102融合信道狀態信息與慣性傳感器信息的高可用室內定位方法研究哈爾濱工程大學103面向真實應用環境的磁電異質結磁傳感器噪聲抑制機理研究哈爾濱工程大學104鉍烯的寬帶飽和吸收機制及其在中紅外超快光纖激光器中的應用研究哈爾濱工程

    RNAi 實驗介紹

    1. RNAi 介紹RNA 干擾(RNAi:RNA interference)是由諾貝爾生理學/醫學獎得主 Andrew Z. Fire 和 Craig C. Mello(1)在線蟲實驗中發現的,2001 年 Elbashir 等人發現哺乳類的 siRNA 可以進行 RNAi 誘導。這個方法與常規方

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    1. RNAi 介紹 RNA 干擾(RNAi:RNA interference)是由諾貝爾生理學/醫學獎得主 Andrew Z. Fire 和 Craig C. Mello(1)在線蟲實驗中發現的,2001 年 Elbashir 等人發現哺乳類的 siRNA 可以進行 RNAi 誘導

    陳雷團隊揭示鳥苷酸環化酶催化及活化的詳細分子機制

      可溶性鳥苷酸環化酶(sGC)是主要的一氧化氮(NO)傳感器。它在NO信號傳導中起重要作用,并且涉及許多基本的生理過程和疾病狀況。NO的結合導致sGC酶活性的顯著增強。然而,NO活化的機制仍未完全了解。  2019年9月12日,北京大學陳雷團隊在Nature 在線發表題為“Structural i

    近期科學家們在流感疫苗研究領域取得的重要成果

      【1】Nat Commun:廣譜性流感病毒抗體疫苗新進展  doi:10.1038/s41467-018-05482-0  根據最近來自賓夕法尼亞大學醫學院的研究者們做出的研究成果,一類廣譜的流感病毒疫苗有望保護人們免受世界上大多數流感病毒的感染。  這一疫苗前體的相關研究發表在最近一期的《Na

    最新!哈工大黃志偉教授團隊《自然》發文

      8月28日,哈爾濱工業大學生命學院黃志偉教授團隊在《自然》(Nature)上在線發表題為《人T細胞受體-共受體復合物組裝的結構基礎》(Structural basis of assembly of the human TCR-CD3 complex)的研究文章(Article)。該研究首次解析了

    冷凍電鏡橫空出世,2019年清華大學獨自發表16篇CNS

      冷凍電鏡,是用于掃描電鏡的超低溫冷凍制樣及傳輸技術(Cryo-SEM),可實現直接觀察液體、半液體及對電子束敏感的樣品,如生物、高分子材料等。冷凍電鏡興起于2013年,在2017年10月4日,瑞典皇家科學院宣布2017年度諾貝爾化學獎授予對冷凍電鏡技術發展做出原創性貢獻的3位科學家,他們分別是瑞

    酵母感受態細胞制備實驗——化學法

    酵母感受態細胞制備可應用于:(1)建立酵母轉化體系;(2)酵母表達系統構建;(3)酵母其他分子生物學研究。實驗方法原理感受態是受體最容易接受外源DNA片段并實現轉化的一種生理狀態,用對應化學物質處理細胞后,細胞逐漸形成感受態細胞并進行轉化。化學法簡單,快速,穩定,重復性好,廣泛用于外源基因的轉化。實

    核酸探針標記及原位雜交

    一、核酸探針標記核酸探針分子雜交是指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下(適宜的溫度及離子強度等)可按堿基互補原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。雜交的雙方是待測核酸及探針。核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據標記物不同,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針兩大類;根據是否

    酵母感受態細胞制備實驗

    化學法 試劑盒制備法             實驗方法原理 感受態是受體最容易接受外源DNA片段并實現轉化的一種

    核酸探針標記及原位雜交

    一、核酸探針標記 核酸探針分子雜交是指具有一定同源性的兩條核酸單鏈在一定條件下(適宜的溫度及離子強度等)可按堿基互補原則形成雙鏈,此雜交過程是高度特異的。雜交的雙方是待測核酸及探針。 核酸探針根據核酸的性質,可分為DNA和RNA探針;根據標記物不同,可分為放射性標記探針和非放射性標記探針兩大

    感受態制備:酵母感受態細胞制備實驗

    酵母感受態細胞制備可以:(1)用于建立酵母轉化體系;(2)用于酵母表達系統構建;(3)用于酵母其他分子生物學研究。實驗方法實驗材料釀酒酵母 試劑、試劑盒YPDA液體培養基 蒸餾水 甘油 二甲基亞砜 儀器、耗材培養皿 離心機 離心管 冰箱 實驗步驟一、試劑與耗材 1.  試劑 細菌

    CDNA文庫篩選

    CDNA文庫篩選(一)λgt11 cDNA文庫鋪平板宿主細菌制備1.用一個E.coli宿主菌株單菌落分別接種2×5ml LB培養基(Y1088用于噬菌斑雜交,Y1090用于免疫篩選),于37℃振蕩培養過夜。2.將過夜培養物以3000×g離心5min。3.分別用2ml λ-dil(10 mm

    牛活化素(ACV)ELISA試劑盒安全性及使用說明

    牛活化素(ACV)ELISA試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將待測物質和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產

    頻繁登上CNS的熱點“炎癥小體”究竟是什么?

      首先需要說一下“炎癥小體”是個什么?炎癥小體的代表是NLRP3炎癥小體,由細胞內的NOD樣受體、ASC和蛋白剪切酶caspase-1組成的多聚蛋白復合物。當受到外界刺激時,NOD樣受體感知外界信號,誘導炎癥小體復合體組裝活化,激活caspase-1。caspase-1可以剪切炎性細胞因子IL-1

    粗糙鏈孢霉的分離和交換

    【實驗目的】1.用粗糙鏈孢霉的賴氨酸缺陷型和野生型進行雜交,并觀察雜交所得后代的子囊孢子的分離和交換現象。2.掌握順序排列四分體的遺傳學分析方法,進行有關基因與著絲粒距離的計算和作圖,加深理解基因分離和連鎖交換規律。 【實驗原理】粗糙鏈孢霉(Neurospora crassa,2n=14),又稱紅色

    研究發現胰高血糖素受體結構揭示G蛋白選擇調控機制

      近日,中國科學院上海藥物研究所吳蓓麗研究組、趙強研究組與中國科學院生物物理研究所孫飛研究組和澳大利亞莫納什大學Denise Wootten研究組合作,在G蛋白偶聯受體(G protein-coupled receptor,GPCR)結構與功能研究領域取得又一突破性進展:解析了人源胰高血糖素受體(

    研究揭示G蛋白選擇調控機制

      中國科學院上海藥物研究所吳蓓麗、趙強研究團隊與中國科學院生物物理研究所孫飛、澳大利亞莫納什大學Denise Wootten研究團隊合作,在G蛋白偶聯受體(GPCR)結構與功能研究領域取得突破性進展:解析了人源胰高血糖素受體(GCGR)分別與激活型G蛋白(Gs)和抑制型G蛋白(Gi)結合的復合物三

    復旦管坤良、袁海心亮點推薦文章:聚焦mTORC1

      1月22日,任職于復旦大學及加州大學圣地亞哥分校的管坤良(Kun-Liang Guan),與復旦大學生物醫學研究院的青年研究員袁海心(Hai-Xin Yuan)博士,在《Cell Research》雜志上發表了一篇題為“Structural insights of mTOR complex 1”

    清華顏寧教授Nature發文,解構鈣通道的不懈追求

      電壓門控鈣離子通道(Cav)在神經傳導和肌肉收縮等關鍵生命過程中發揮著核心角色,其異常可導致神經、心血管、肌肉等多種系統的疾病,因此也成了一類重要的藥物靶點。要想充分利用Cav進行藥物開發,我們顯然需要對其結構及功能特征進行全面了解。然而,由于技術手段等限制,在Cav的結構和功能領域仍有很多不解

    2015年度“中國高校十大科技進展”項目評選揭曉

      2015年12月15日,由教育部科學技術委員會組織評選的2015年度“中國高等學校十大科技進展”經過形式審查、學部初評、項目終審評選專項工作和項目公示等流程后在京揭曉。  “中國高等學校十大科技進展”的評選自1998年開展以來,至今已18屆,這項評選活動對提升高等學校科技的整體水平、增強高校的科

    Nature北大通過冷凍電鏡解析 人源26S蛋白酶體全酶結構

      北京大學物理學院/定量生物學中心/生命聯合中心歐陽頎院士課題組、毛有東課題組與其合作者利用冷凍電子顯微鏡技術解析了人源蛋白酶體26S全酶的三個亞穩簡并態高分辨結構,在同一樣品中得到了蛋白酶體核心顆粒(Core Particle,簡稱CP)底物轉運通道的關閉和開放兩種狀態的近原子分辨的三維動態結構

    量子產率超過90%熒光標記的最強熒光——藻膽蛋白

    藻膽蛋白是源自微藻和藍細菌的光合作用光捕獲蛋白家族。這些蛋白質具有共價連接的線性四吡咯基團,稱為藻膽素,其在捕獲光能中起關鍵作用。在微藻和藍細菌中,由這些藻膽素吸收的能量通過熒光共振能量轉移(FRET)有效地轉移到葉綠素色素用于光合作用反應。與化學合成熒光染料相比,藻膽蛋白由于其相對高的熒光量子產率

    水環境污染生物監測——生物測試法(二)

    2、發光細菌法(1)方法原理發光細菌是一類非致病的革蘭氏陰性微生物,它們在適當的條件下能發射出肉眼可見的藍綠色光(450~490nm)。當樣品毒性組分與發光細菌接觸時,可影響或干擾細菌的新陳代謝,使細菌的發光強度下降或不發光。在一定毒物濃度范圍內,有毒物質濃度與發光強度成負相關線性關系,因而可使用生

    2019全國電子顯微學年會分論壇:低溫帶來不一樣的視角

      分析測試百科網訊 2019年10月18日,2019年全國電子顯微學學術年會第三天,低溫電子顯微學表征分論壇迎來學術交流的頂峰。來自清華大學、中國科學院生物化學與細胞生物學研究所、北京大學、北京生命科學研究所、中國科技大學、浙江大學、西湖大學等多名國內知名學者為聽眾帶來一場低溫電子顯微學領域的學術

    人源甲狀旁腺激素受體結構與功能研究取得重要進展

      國際學術期刊《科學》(Science)于4月12日以長文(Research Article;DOI: 10.1126/science.aav7942)形式發表了中國科學院上海藥物研究所徐華強團隊和王明偉團隊、浙江大學基礎醫學院張巖團隊以及美國匹茲堡大學醫學院Jean-Pierre Vilarda

    GPCR-G蛋白復合物形成過程的結構見解

    G蛋白偶聯受體(GPCR)構成最大的細胞表面受體家族,其感知細胞外信號并激活細胞內途徑。激動劑結合的GPCR與鳥苷二磷酸(GDP)結合的Gαβγ異源三聚體相互作用,導致GDP釋放和鳥苷三磷酸(GTP)結合,然后異源三聚體的功能性解離和下游途徑的激活。GPCR通常優先激活調節不同細胞信號傳導途徑的三種

    凍融對發酵用大腸桿菌甘油保存的影響分析

    摘要:目的:探討凍融對發酵用大腸桿菌甘油保存的影響.方法:將大腸桿菌用10%的甘油溶液制成菌懸液,分成3組,測定各組菌種的活菌數,同時置-20℃冷凍處理.3組分別被凍融處理1、2、3次.測定凍融處理后、凍存1年及2年各組的活菌數.結果:隨著凍融次數的增加,凍融處理后,凍存1年及2年的活菌數均明顯降低

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