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    冷凍細胞活化

    實驗概要1. 冷凍細胞之活化原則為快速解凍,以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害,導致細胞之死亡。 2. 細胞活化后,約需數日,或繼代一至二代,其細胞生長或特性表現才會恢復正常(例如產生單株抗體或是其它蛋白質)。實驗材料材料: 37 ℃ 恒溫水槽 新鮮培養基 無菌吸管/ 離心管/ 培養瓶 液氮或干冰容器 實驗步驟1 操作人員應戴防護面罩及手套,防止冷凍管可能爆裂之傷害。 2 自液氮或干冰容器中取出冷凍管,檢查蓋子是否旋緊,由于熱脹冷縮過程,此時蓋子易松掉。 3 將新鮮培養基置于37 °C 水槽中回溫,回溫后噴以70 % 酒精并擦拭之,移入無菌操作臺內。......閱讀全文

    2017年3月24日Science期刊精華

      本周又有一期新的Science期刊(2017年3月24日)發布,它有哪些精彩研究呢?讓小編一一道來。  1.Science:三分之二的致癌突變歸因于隨機DNA復制錯誤  在一項新的研究中,來自美國約翰霍普金斯大學基梅爾癌癥中心的研究人員提供證據證實隨機的不可預測的DNA復制“錯誤”導致將近三分之

    Nature子刊:中國團隊首次揭示ATM激酶精細三維結構

      中國科學技術大學蔡剛課題組與南京農業大學王偉武課題組、中國科大劉海燕課題組合作,首次揭示了毛細血管擴張共濟失調癥突變蛋白——ATM激酶的精細三維結構,為理解ATM激酶活性嚴謹調控的分子機制以及研發新型腫瘤放療的增敏劑提供了重要線索,該研究成果發表于5月27日的《自然·通訊》上。論文第一作者為蔡剛

    中國科大等首次揭示ATM激酶精細三維結構

      中國科學技術大學蔡剛課題組與南京農業大學王偉武課題組、中國科大劉海燕課題組合作,首次揭示了毛細血管擴張共濟失調癥突變蛋白——ATM激酶的精細三維結構,為理解ATM激酶活性嚴謹調控的分子機制以及研發新型腫瘤放療的增敏劑提供了重要線索,該研究成果發表于5月27日的《自然·通訊》上。論文第一作者為蔡剛

    中科大、南京農大發表文章 首次揭示ATM激酶精細三維結構

      中國科學技術大學蔡剛課題組與南京農業大學王偉武課題組、中國科大劉海燕課題組合作,首次揭示了毛細血管擴張共濟失調癥突變蛋白——ATM激酶的精細三維結構,為理解ATM激酶活性嚴謹調控的分子機制以及研發新型腫瘤放療的增敏劑提供了重要線索,該研究成果發表于5月27日的《自然·通訊》上。論文第一作者為蔡剛

    冷凍干燥和液氮保藏菌種技術

    實驗概要掌握冷凍干燥和液氮保藏菌種的技術。實驗步驟建議用下列方法恢復培養冷凍干燥保藏的菌種:1. 安瓶管開封 (1). 用浸過70%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。 (2). 用火焰將安瓿管頂端加熱。 (3). 滴無菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開裂。 (4). 用挫刀或鑷子敲下已開裂的安瓿管的頂端。2. 菌

    2018前10月生物醫學風云榜 袁隆平 曹雪濤及施一公等上榜

      經過特殊的算法,我們得到了2018年前10個月中國生物醫學風云榜人物及最火爆的3個重大學術界事件,能夠上榜的風云人物/事件,都曾長時間占據過100多個公生物醫學公眾號的頭版頭條。  在此,我們精選了其中的3個事件及16位風云榜人物。我們對其進行了劃分,分別是:6星級的3個事件,分別位諾貝爾獎,國

    同種異體BK病毒特異性T細胞 性多灶性白質腦病臨床治療

      來自美國M.D. Anderson癌癥中心的科學家們闡述了利用T細胞療法治療進行性多灶性白質腦病(PML)的II期臨床實驗結果。  《新英格蘭醫學雜志》近日發表了一篇備受矚目的文章《Allogeneic BK Virus–Specific T Cells for Progressive Mult

    清華大學顏寧研究組在《自然》發文

      9月1日,清華大學醫學院顏寧教授研究組在《自然》(Nature)期刊發表題為《電壓門控鈣離子Cav1.1通道3.6埃分辨率結構》(Structure of the voltage-gated calcium channel Cav1.1 at 3.6 angstrom resolution)的研

    基因克隆:高效感受態細胞制作

    高效感受態細胞制作             實驗方法原理 主要原理是通過電擊法或CaCl2、RbCl(KCl)等化學試劑處

    基因克隆:高效感受態細胞制作

    DNA的克隆是指在體外將含有目的基因或其它有意義的DNA片段同能夠自我復制的載體DNA連接,然后將其轉入宿主細胞或受體生物進行表達或進一步研究的分子操作的過程,因此DNA克隆又稱分子克隆,基因操作或重組實驗方法原理主要原理是通過電擊法或CaCl2、RbCl(KCl)等化學試劑處理,使細胞膜的通透性發

    風濕性疾病的急危重癥,你了解多少?

      風濕病的急危重癥,是指緊急、瀕危的病癥,其來勢兇、變化快,早期判斷與快速處置直接影響到患者的生命安危的疾病,而不是通常人們認為的痛風發作、疼痛、系統性紅斑狼瘡發作等情況。本文概述了風濕病常見的急危重癥及其管理。圖片來源于網絡  災難性抗磷脂綜合征  災難性抗磷脂綜合征的特征是患者在短時間內(常為

    連發4篇頂刊——顏寧團隊系統介紹鈣離子通道蛋白調控機制

      作為從心肌的肌漿網(內質網)釋放Ca2 +的開關,2型ryanodine受體(RyR2)受到多種調節劑的復雜調節。RyR2介導的Ca2 +釋放失調與威脅生命的心律不齊有關。關鍵調節劑,例如Ca2 +,FKBP12.6,ATP和咖啡因對RyR2的調節機制仍不清楚。  2019年12月2日,顏寧團隊

    Nature綜述丨冷凍電鏡在藥物發現中的應用前景

      1前言  近日,歐美多國科學家在Nature Reviews Drug Discovery雜志發表了題為Cryo?EM in drug discovery: achievements, limitations and prospects的重要綜述,系統闡述了Cryo-EM(Cryo-electr

    阿爾茲海默癥研究進展一覽

      本期為大家帶來的是阿爾茲海默癥相關領域的研究進展,希望讀者朋友們能夠喜歡。  1. Nat Neurosci:新研究揭示大腦結構與阿爾茲海默癥以及自閉癥的關系  DOI: 10.1038/s41593-020-0602-1  近日,來自Wellcome Sanger研究所,Wellcome-MR

    大滿貫!2019年施一公團隊連續發表Cell,Nature,Science文章

      2015年,通過單粒子冷凍電子顯微鏡(cryo-EM)分析確定剪接體的第一個近原子分辨率結構,報道了來自S. pombe的ILS復合物。從那時起,已經闡明了13種冷凍-EM結構,大部分分辨率在3.3和5.8之間,已經闡明了來自釀酒酵母的組裝剪接體的七種不同狀態,人類剪接體的7種不同狀態的11種這

    微生物菌種冷凍干燥和液氮保藏菌種技術

    微生物菌種冷凍干燥和液氮保藏菌種技術-、安瓶管開封1.用浸過70%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。 2.用火焰將安瓿管頂端加熱。 3.滴無菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開裂。 4.用挫刀或鑷子敲下已開裂的安瓿管的頂端。二、菌株恢復培養 1.用無菌吸管,吸取0.3~0.5ml適宜的液體培養基,滴人安瓿管內,輕輕

    Science:徐華強等揭示甲狀旁腺激素受體-1結構及其動態性

      甲狀旁腺激素受體-1(PTH1R)是一種B級G蛋白偶聯受體,是鈣穩態的中心,是骨質疏松癥和甲狀旁腺功能減退癥的治療靶點。 然而,全長PTH1R與功能性肽激素相互作用并與下游G蛋白偶聯的結構基礎仍然未知,這是臨床相關PTH類似物的發展和理解GPCR信號傳導的基本機制的障礙。  2019年4月12日

    冷凍干燥和液氮保藏菌種技術

    建議用下列方法恢復培養冷凍干燥保藏的菌種。 -、安瓶管開封   1.用浸過70%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。   2.用火焰將安瓿管頂端加熱。   3.滴無菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開裂。   4.用挫刀或鑷子敲下已開裂的安瓿管的頂端。 二、菌株恢復培養   1.用無菌吸管,吸取0.3~0.5ml

    冷凍干燥和液氮保藏菌種技術

    建議用下列方法恢復培養冷凍干燥保藏的菌種。一、安瓶管開封 1.用浸過70%酒精的脫脂棉擦凈安瓿管。 2.用火焰將安瓿管頂端加熱。 3.滴無菌水至加熱的安瓿管頂端使玻璃開裂。 4.用挫刀或鑷子敲下已開裂的安瓿管的頂端。二、菌株恢復培養 1.用無菌吸管,吸取0.3~0.5ml適宜的液體培養基,滴人安瓿管

    Science雜志最受關注的文章(1月)

      美國的《Science》雜志由愛迪生投資創辦,是國際上著名的自然科學綜合類學術期刊,與英國的《Nature》雜志被譽為世界上兩大自然科學頂級雜志。Science雜志主要發表原始性科學成果、新聞和評論,許多世界上重要的科學報道都是首先出現在Science雜志上的,比如艾滋病與人類免疫缺陷病毒之間的

    Th1和Th2細胞因子多功能性的測定

                                              &

    Nature:二次懷孕的記憶

      Nature雜志在線版公布了一項最新研究成果,指出有可能研發出防止早產和其他妊娠并發癥的新型疫苗,如果能實現的話,這些疫苗將是首個靶向刺激抑制免疫應答調節性CD4 T細胞亞群的疫苗。   而目前的疫苗則主要針對的是刺激活化免疫應答的T細胞亞群。   這項研究由辛辛那提兒童醫院醫學中心的研

    RNA 萃取實驗前必讀 成功經驗法則大公開

    Lab 的經驗和客戶的難題以華聯基因體實驗室的長期以來承接客戶 RNA 檢體的經驗來說,我們經常遇到的問題:(1)RNA 的總量不夠;(2)RNA 有嚴重的鹽類污染;(3)RNA 有嚴重的有機溶劑污染;(4)DNA 污染;(5)樣品降解嚴重。前四項問題都還好解決,只需要再次萃取或進行純化即可解決,但

    血清使用常見問題

    血清使用常見問題1、血清保存的最好方法?建議血清最好保存在-15℃以下。若一次使用不完一瓶,建議無菌分裝于適當的滅菌容器內冷凍備用。2、如何解凍血清,才能保證其質量不會受損?我們建議將血清從冷凍箱取出后,置于2℃~8℃冰箱中解凍,然后在室溫下全融,解凍過程中必須規則地搖晃均勻。3、為什么血清在解凍后

    抗原呈遞細胞的選擇和制備

    實驗步驟基本方案 過 利 斯 特 氏 菌 刺 激 制 備 腹 腔 巨 噬 細 胞材 料單核細胞增多性利斯特氏菌無 菌 PBSH -2 相 合 小 鼠(見 表 A .2A .1),包括正常和提前 3 周注射了利斯特氏菌的小鼠V冰浴的 D M E M 培養基3 % (V A O 乙酸0.4% (m /V

    掌握了這些細節,師姐再也不用擔心我養不好細胞啦~

    很多小伙伴在養細胞的時候,總是會出現這樣或那樣的問題,很多時候,那是因為你沒有注意以下的細節問題,現在我們一起來看看:細胞培養前的準備在您帶上手套開始細胞培養之前, 先檢查一下移液管和瓶子的數量是否充足, 以免在開始實驗后再次出入操作臺,這樣可以降低細胞污染的風險。細胞培養基也應先預熱, 選擇只預熱

    酶聯免疫斑點(ELISPOT)測定法

    酶聯免疫斑點(ELISPOT)測定法是一種在單細胞懸液中檢測分泌某種特定蛋白質的細胞和定量分析產生該特定蛋白質的細胞頻率的有力工具。1983年,Crekinsky等運用ELISPOT技術成功檢出分泌特異性抗體的細胞頻率,經過不斷發展,目前該技術已廣泛用于檢測產生、分泌多種其他效應分子的細胞(如細胞因

    細胞培養攻略:細節決定成敗

      培養細胞就像養育BABY一樣,要精心照料,用心呵護。最好每天都去看看它們,滿足它們所需要的物質需求,防止出現培養箱缺水、二氧化碳不足、溫度不夠等各種小意外,還要注意很多小細節,以免開展重復的實驗導致不必要的人力物力浪費。  那培養細胞都要注意哪些小細節呢?就讓我們一起來看看吧!  1.細胞生長的

    冷腫瘤VS熱腫瘤:免疫治療也要“溫度”!

      越來越多的新藥物用于激活人體自身的免疫系統攻擊腫瘤,這已經成為癌癥治療的焦點。例如,不同形式的免疫療法-檢查點阻滯劑,癌癥疫苗和CAR-T細胞-已經在停止或縮小某些晚期癌癥患者方面取得了前所未有的成功,并延長了癌癥患者(如黑素瘤)的生命。  然而,目前免疫療法只能幫助少數患有特定癌癥類型的患者,

    克隆魚誕生50年 中國克隆技術陷入困境

      在不久前上映的美國大片《遺落戰境》中,由湯姆·克魯斯飾演的克隆人在發現自己的身份后,奮起反抗外星人,最終獲得勝利。   緊接著,電影《侏羅紀公園》再次講述了科學家利用DNA技術復活恐龍卻遭遇瘋狂獵殺的故事。   兩部大片不僅給觀眾帶來了強烈的視覺沖擊,也再度激起了人們對克隆技術的濃厚興趣。

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