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    MTT實驗心得

    MTT實驗是檢測細胞活力的實驗方法,由于細胞活力與細胞數呈正相關,因此也常常用來檢測細胞的增殖情況。MTT的原理:活細胞有琥珀酸脫氫酶,將MTT還原成棕褐色沉淀。由于一般介紹園子里已經很多,筆者將自己的心得按照實驗流程與大家交流交流。1、培養好細胞點板。養細胞沒啥好說的,如果不知道細胞如何養,那就看看相關的文獻方法。如果知道了細胞的名字,就可以上www.atcc.org檢索細胞的培養信息,這個網站上的培養方法是標準培養方法。當然可以根據自己實驗要求進行修改。由于細胞計數很繁瑣,點板時的細胞濃度是最難掌握的,這一點筆者的心得如下:自己先將細胞養一段時間,大概了解細胞的增殖情況,在MTT檢測時實際上要求細胞大概能長滿96-孔板的80-90%,如果打算養48小時就檢測,根據細胞的生長情況反推點板時的細胞濃度狀況。這時可以將細胞不進行計數,將消化好的細胞混勻后(可能是10 ml)直接在一個廢棄(最好進行過無菌處理)的96孔板中依次加入1......閱讀全文

    MTT實驗心得

    MTT實驗是檢測細胞活力的實驗方法,由于細胞活力與細胞數呈正相關,因此也常常用來檢測細胞的增殖情況。MTT的原理:活細胞有琥珀酸脫氫酶,將MTT還原成棕褐色沉淀。由于一般介紹園子里已經很多,筆者將自己的心得按照實驗流程與大家交流交流。1、培養好細胞點板。養細胞沒啥好說的,如果不知道細胞如何養,那就看

    MTT實驗兩年心得

    MTT實驗是檢測細胞活力的實驗方法,由于細胞活力與細胞數呈正相關,因此也常常用來檢測細胞的增殖情況。MTT的原理:活細胞有琥珀酸脫氫酶,將MTT還原成棕褐色沉淀。由于一般介紹園子里已經很多,筆者將自己的心得按照實驗流程與大家交流交流。1、培養好細胞點板。養細胞沒啥好說的,如果不知道細胞如何養,那就看

    細胞增殖檢測:MTT法心得

    MTT實驗是檢測細胞活力的實驗方法,由于細胞活力與細胞數呈正相關,因此也常常用來檢測細胞的增殖情況。一、MTT的原理活細胞有琥珀酸脫氫酶,將MTT還原成棕褐色沉淀。由于一般介紹園子里已經很多,筆者將自己的心得按照實驗流程與大家交流交流。二、MTT法檢測細胞增殖實驗的注意事項1、培養好細胞點板養細胞沒

    MTT分析實驗

    實驗概要本實驗介紹了一種檢測細胞存活和生長的方法- MTT分析實驗。實驗原理MTT是一種粉末狀化學試劑,全稱為3-(4,5)-dimethylthiahiazo ?(-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide,漢語化學名為 ?3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二

    四唑鹽(MTT)比色實驗——MTT法

    實驗方法原理活細胞的線粒體中的琥珀脫氫酶能使外源性的MTT還原為難溶性的藍紫色結晶物并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜能溶解細胞中的紫色結晶物,用酶聯免疫檢測儀在490? nm 波長處測定其光吸收值,可間接反映細胞數量。在一定細胞數范圍內,MTT結晶物形成的量與細胞數成正比。?實驗材料細胞

    3’RACE 實驗心得

    引子:從06年12月份開始,斷斷續續做了一個多月的3’RACE,有了一些心得和體會。期間看了很多前輩們分享的經驗,受益匪淺。在這里,我就自己的經歷略作總結,希望能給像我一樣的新人們有點啟示,少走些彎路,不當之處歡迎指正。一、試劑盒的選擇:3’RACE從原理上就能明白,它比5’RACE 要容易得多,所

    MTT法實驗原理

    原理:活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶于水的藍紫色產物甲臜,并沉淀在細胞中,而死細胞沒有這種功能。DMSO能溶解沉積在細胞中藍紫色結晶物,溶液顏色深淺與所含的formazan量成正比。再用酶標儀測定OD值。

    MTT法實驗步驟

    貼壁細胞1、收集對數期細胞,調整細胞懸液濃度,每孔加入100ul,鋪板使待測細胞調密度至1000-10000孔,(邊緣孔用無菌PBS填充)。2.、5%CO2,37℃孵育,至細胞單層鋪滿孔底(96孔平底板),加入濃度梯度的藥物,原則上,細胞貼壁后即可加藥,或兩小時,或半天時間,但我們常在前一天下午鋪板

    MTT法實驗原理

    原理:活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶于水的藍紫色產物甲臜,并沉淀在細胞中,而死細胞沒有這種功能。DMSO能溶解沉積在細胞中藍紫色結晶物,溶液顏色深淺與所含的formazan量成正比。再用酶標儀測定OD值。

    關于MTT實驗總結

    MTT分析法以活細胞代謝物還原劑3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di- phenytetrazoliumromide, MTT噻唑藍為基礎。MTT為黃色化合物,是一種接受氫離子的染料,可作用于活細胞線粒體中的呼吸鏈,在琥珀酸脫氫酶和細胞色素C的作用下tet

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