細胞生物基本方法：神經組織細胞培養
神經組織細胞培養1．獲取腦組織后，先仔細剝除腦膜和血管等纖維成分，置入Hanks液中漂洗1～2次后，置于30～50倍的Hanks液中，腦組織比較柔軟，反復吹打即可制成細胞懸液。2．為排除脂肪成分和其它碎塊，把懸液注入離心管中，在室溫直立5～10分鐘后，細胞或細胞團塊自然下沉，脂肪等雜物易漂浮于懸液表層，吸除上清，如此反復二三次可獲得較多的細胞成分。3．向末次沉淀物中加入適量營養液，通過紗網或紗布濾過，計數細胞并調整好細胞密度，接種入培養瓶或皿中，置5％CO2溫箱中培養。4．細胞生長匯合后，可用0.25％胰蛋白酶消化法做傳代處理，加消化液的量以能覆蓋細胞層即可，待細胞開始從瓶壁脫離（平均5～10分鐘），加入含有血清培養液，吹打制成細胞懸液。......閱讀全文
細胞培養基本知識
一.細胞培育的基本概念體外培育（in vitro culture）包含一切構造層次的培育，即：安排培育（tissue culture）、細胞培育（cell culture）和器官培育（organ culture）。細胞培育(Cell culture)指從生物機體取出有些安排渙散成單個細胞或直接從機體
單細胞培養的基本介紹
單細胞培養(single cell culture)是指從植物器官、愈傷組織或懸浮培養物中游離出單個細胞，在無菌條件下，進行體外生長、發育的技術。人們分離和培養植物單細胞的設想和實踐都比較早，但成功地進行單細胞培養是隨著更有效的培養基的發展以及從愈傷組織懸浮培養物分離單細胞的專門技術的建立才實現
初代細胞培養實驗——組織塊培養法
實驗材料組織試劑、試劑盒Hanks培養液胰蛋白酶NaHCO3儀器、耗材吸管培養瓶燒杯眼科剪眼科鑷實驗步驟1. ?剪切把組織小塊（1cm3）置入小燒杯或青霉素小瓶中，用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污，吸凈Hanks液，用眼科剪反復剪切成1mm3塊為止；2. ?擺布用彎頭吸管吸取若干小塊，置入培養
組織源性正常小鼠原代真皮纖維原細胞培養實驗方法
一、實驗試劑1、培養基： Primary Cell Medium + 10% FBS + 1% P/S + Primary Cell Supplement2、凍存液： Primary Cell Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗滌液： 1 × PBS （pH 7.4 ）+
組織源性正常大鼠原代心肌細胞培養實驗方法
一、實驗試劑1、培養基： PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、凍存液： PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗滌液： 1×PBS（pH 7.4）+ 1% P/S4、染色液： 0.4
大鼠大腦皮層神經元細胞培養
實驗方法原理 SD胎鼠腦皮層神經元體外培養7 d ，微量移液器塑料滴頭于培養孔內機械性劃割培養之神經元，依劃割程度不同分為輕、中、重3組，對照組除不進行機械性劃割，其余處理同損傷組，傷后不同時間點（10，30 min ， 1，3，6，12，24 h）檢測細胞存活率及培養液上清乳酸脫氫酶(
大鼠視神經少突膠質細胞培養實驗
牛血清培養法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用視神經，DMEM/F12條件培養基培養，觀察細胞形態及生長，并進行免疫組織化學鑒定。
大鼠視神經少突膠質細胞培養實驗
牛血清培養法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 采用視神經，DMEM/F12條件培養基培養，觀察細胞形態及生長，并進行免疫組織化學鑒定。
細胞生物基本方法：微生物污染的排除
微生物污染的排除細胞受各種霉菌、細菌和支原體污染后，一般都較難排除或殺滅，其中以支原體更難排除，因此從預防著眼為上。?1）??抗生素除菌法：用BM－1（截耳素衍生物）和BM－2（四環素衍生物）抑制支原體1．抗生素制備：均可用PBS配成250×濃縮液－20℃備用，使用濃度參考《組織培養和分子細胞學技術
細胞培養概念和方法
細胞培養（英語：cell culture）是一種現代生物學技術，是將真核生物或原核生物細胞培養在受控制的狀態下，使其生長。這項技術的發展與方法，與組織培養或器官培養關系密切。細胞培養的例行步驟包括解凍細胞、換盤、分盤、換細胞培養液、結凍細胞等步驟。細胞培養分為兩大類：貼壁培養（adherent cu
動物細胞培養方法
體外培養的動物細胞可分為原代細胞與傳代細胞。原代細胞是指從機體取出后立即培養的細胞，進行傳代培養后的細胞即稱為傳代細胞。?任何動物細胞的培養均需從原代細胞培養開始。動物很多組織的細胞，如幼年動物的腎、肺、卵巢、精巢、肌肉及腫瘤等組織的細胞較易培養，而神經細胞等則較難培養。原代細胞培養步驟如下：首先取
微生物細胞培養的簡介
微生物多為單細胞生物，野生生存條件比較簡單。所以微生物人工培養的條件比動植物細胞簡單得多。其中厭氧微生物培養比好氧微生物復雜，因為嚴格厭氧需要維持二氧化碳等非氧的惰性氣體濃度，而好氧微生物則只需要通過不斷攪拌提供無菌氧氣。微生物對培養條件要求不如動植物細胞那樣苛刻，玉米漿、蛋白胨、麥芽汁、酵母膏
微生物細胞培養的要求
微生物細胞培養微生物多為單細胞生物，野生生存條件比較簡單。所以微生物人工培養的條件比動植物細胞簡單得多。其中厭氧微生物培養比好氧微生物復雜，因為嚴格厭氧需要維持二氧化碳等非氧的惰性氣體濃度，而好氧微生物則只需要通過不斷攪拌提供無菌氧氣。微生物對培養條件要求不如動植物細胞那樣苛刻，玉米漿、蛋白胨、麥芽
細胞培養細胞凍存的基本概念
細胞凍存是將細胞放在低溫環境，減少細胞代謝，以便長期儲存的一種技術。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一，起到了細胞保種的作用
細胞培養基本條件
細胞培養是指從體內組織取出細胞在體外模擬體內環境下，使其生長繁殖，并維持其結構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物可以是單個細胞，也可以是細胞群。?1、合適的細胞培養基?合適的細胞培養基是體外細胞生長增殖的zui重要的條件之一，培養基不僅提供細胞營養和促使細胞生長增殖的基礎物質，而且還提供培養細胞
細胞培養的基本設備和器材
一、基本設備? ? ? ?1、CO2培養箱或/和普通隔水式培養箱 2、超凈工作臺 3、無菌室 4、普通普微鏡 5、電子顯微鏡 6、普通冰箱 7、低溫冰箱 8、液氮罐 9、三重石英全玻璃蒸餾水器 10、水浴鍋 11、高壓滅菌器 12、水平式常速離心機 13、真空泵（負壓過濾）
細胞培養基的基本介紹
動物細胞培養必需的溶液平衡鹽水(BSS):Hanks 液和Earle液是常用的BSS基礎溶液。PH調整液:3.7%、5.6%、7.4%的NaHCO3溶液、HEPES溶液(二羥乙基哌嗪乙烷磺酸)細胞消化液:胰蛋白酶溶液、EDTA溶液、膠原酶溶液。抗生素溶液:1)青、鏈霉素,每毫升培養液含100U青霉素
細胞培養的基本內容介紹
細胞培養（cell culture）是指在體外模擬體內環境（無菌、適宜溫度、酸堿度和一定營養條件等），使之生存、生長、繁殖并維持主要結構和功能的一種方法。細胞培養也叫細胞克隆技術，在生物學中的正規名詞為細胞培養技術。不論對于整個生物工程技術，還是其中之一的生物克隆技術來說，細胞培養都是一個必不可
細胞培養基本技術概述（一）
無菌操作基本技術 ?1. 實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminar flow) 以紫外燈照射30-60 分鐘滅菌，以70 %ethanol 擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風扇運轉10 分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養基相同亦不共享培養基，以避免失誤混淆或
細胞培養基本技術概述（三）
血清 ?1. 血清必須貯存于–20 ～ -70 oC，若存放于4 oC，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將40～45 ml 分裝于無菌50 ml 離心管中，由于血清結凍時體積會增加約10 %，必須預留此膨脹體積之空間，否則易發生污染或容器凍裂之情形。 ?2. 一般廠商提供之血清為無菌，不需再
細胞培養基本技術概述（四）
細胞傳代培養 ?1. 細胞生長至高密度時，即須分殖至新的培養瓶中，一般稀釋比例為1:3 至1:6，依細胞種類而異。 ?2. 材料： ?2.1. 無菌磷酸生理緩沖液(Dulbecco’s phosphate-buffered saline, Ca++/Mg++ free, D-PBS,GibcoBRL
細胞培養基本技術概述（五）
實驗用品 1. 種類︰ 1.1. 細胞培養實驗用品均為無菌，除了玻璃容器與pasteur pipet 外，其它均為塑料無菌 制品。 1.2. TC 級培養盤表面均有coating 高分子物質以讓細胞吸附，培養容器種類有Tflask, plates, dishes, roller bottle 等，依
細胞培養基本技術概述（六）
抗生素 1. 細胞庫之細胞培養基不加抗生素 1.1. 培養自ATCC 引進之細胞株，培養基中不加抗生素。 1.2. 培養自其它實驗室引進之細胞株，制作token freeze 前培養基須添加抗生素，待token freeze 通過污染測試后，大量培養時則不加抗生素。 2. 寄送活細胞時，須將培養液充
細胞培養基本技術概述（七）
冷凍細胞活化 1. 冷凍細胞之活化原則為快速解凍，以避免冰晶重新結晶而對細胞造成傷害，導致細胞之死亡。 2. 細胞活化后，約需數日，或繼代一至二代，其細胞生長或特性表現才會恢復正常(例如產生單株抗體或是其它蛋白質)。 3. 材料 3.1 37 oC 恒溫水槽 3.2 新鮮培養基 3.3 無菌吸管/
實驗技術：細胞培養基本技術
細胞培養 一、操作規程： 1.實驗前,無菌室及無菌操作臺用紫外燈照射30-60分鐘滅菌,用70％酒精擦拭無菌操作臺面,并開啟無菌操作臺風機運轉10分鐘后,才可開始實驗操作.每次操作只處理一株細胞,以免造成細胞交叉污染.實驗結束后,將實驗物品帶出工作臺。如需要繼續進行下一個實驗,則用
細胞培養基本條件
1、合適的細胞培養基合適的細胞培養基是體外細胞生長增殖的最重要的條件之一，培養基不僅提供細胞營養和促使細胞生長增殖的基礎物質,而且還提供培養細胞生長和繁殖的生存環境。2、無菌無毒細胞培養環境無菌無毒的操作環境和培養環境是保證細胞在體外培養成功的首要條件。在體外培養的細胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御
動物細胞培養的基本過程
一、準備工作準備工作對開展細胞培養異常重要，工作量也較大，應給予足夠的重視，準備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒，培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌，無菌室或超凈臺的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試。二、取材在無菌環境下從機體取出某種組織
細胞培養的基本設備和器材
一、基本設備1、CO2培養箱或/和普通隔水式培養箱2、超凈工作臺3、無菌室4、普通普微鏡5、電子顯微鏡6、普通冰箱7、低溫冰箱8、液氮罐9、三重石英全玻璃蒸餾水器10、水浴鍋11、高壓滅菌器12、水平式常速離心機13、真空泵（負壓過濾）14、N2瓶（正壓過濾）15、血球計數板、計算器16、定時器17
動物細胞培養的基本過程
取動物胚胎或幼齡動物器官、組織。將材料剪碎，并用胰蛋白酶（或用膠原蛋白酶）處理（消化），形成分散的單個細胞，將處理后的細胞移入培養基中配成一定濃度的細胞懸浮液。懸液中分散的細胞很快就貼附在瓶壁上，當貼壁細胞分裂生長到互相接觸時，細胞就會停止分裂增殖，出現接觸抑制。此時需要將出現接觸抑制的細胞重新使用
細胞培養的幾個基本概念
細胞培養品 名:細胞培養拼音:xibaopeiyang英文名稱：culture of cells說明:包括微生物細胞、植物細胞和動物細胞培養。將動植物組織或細胞從機體取出，分散成單個細胞或直接以單細胞生物，使其在含有必要生長條件的培養基或培養瓶中繼續生長與增殖。細胞培養是細胞生物學研究方面十分重要的