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    雙向電泳:清洗IEF管

    1.IEF之后,用去離子水充分地清洗管子。2.加熱500ml 0.6% Deconex溶液至60~80℃。3.將玻璃管子浸入Deconex溶液,70℃下放置3次10分鐘:每10分鐘之后,分別用鑷子移走玻璃管,倒出清洗液,加入新的清洗液,再于70℃下清洗10分鐘。4.用去離子水浸洗管子。5.加熱500ml 0.1mol/L鹽酸至95℃。6.將管子放到一個玻璃燒杯中,加0.1mol/L鹽酸,直到將燒杯加滿并覆蓋管子。將管子在鹽酸溶液中95℃放置30分鐘。7.用去離子水清洗管子,然后干燥。......閱讀全文

    蛋白質雙向電泳過程與體會

        雙向電泳IEF (sigma)IEF(not IPG)/SDS-PAGE最簡單的裝備推薦如下,適合于沒多少money做IPG又想做“熱”的所謂蛋白質組的.    IEF用Biorad的圓盤電泳槽(不行用國產的吧,不推薦),SDS-PAGE用六

    植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗

    試劑、試劑盒尿素裂解溶液                                       &nbs

    植物蛋白質組學中的雙向電泳技術實驗

    試劑、試劑盒尿素裂解溶液IPG 干膠條水化液IPG 膠條平衡液SDS 凝膠緩沖液電極緩沖液儲液丙烯酰胺 甲叉雙丙烯酰胺溶液過硫酸銨溶液瓊脂糖溶液儀器、耗材等電聚焦儀IPGphor多重垂直 SDS 電泳儀實驗步驟3.1 第一向:在 IPG 膠條中進行等電聚焦( IPG-IEF)采用 IPG ( IPG

    蛋白質技術——雙向電泳

    實驗概要蛋白質組研究的發展以雙向電泳技術作為核心.  雙向電泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并成功地分離約1000個E.coli蛋白,并表明蛋白質譜不是穩定的,而是隨環境而變化.  雙向電泳原理簡明,第一向進行等電聚焦,蛋白質沿pH梯度分離,至各自的等電點;隨后,再

    細胞和亞細胞提取物的制備實驗9

    實驗方法原理差異去垢劑分離法(differential detergent fractionation, DDF) 包括使用一系列含不同去垢劑的 PIPES 緩沖液對細胞進行連續抽提,首先是毛地黃皂苷,其次是 Triton, 最后是 Tween/脫氧膽酸鹽。這些步驟產生 4 種在生化和電泳上相異的組

    前剪接體和剪接體的分離及分析實驗

                實驗方法原理 剪接體是由 RNA 和蛋白質構成的核糖核蛋白體(RNP),它在前體 mRNA 的剪接過程中可去除前體 mRNA 的內含子。snRNP 是由 snRNA 及其結合蛋白組成

    前剪接體和剪接體的分離及分析實驗

    剪接體是由 RNA 和蛋白質構成的核糖核蛋白體(RNP),它在前體 mRNA 的剪接過程中可去除前體 mRNA 的內含子。snRNP 是由 snRNA 及其結合蛋白組成,在前體 mRNA 的剪接過程起著重要作用。本實驗來源「RNA 實驗指導手冊」主編:鄭曉飛。實驗方法原理剪接體是由 RNA 和蛋白質

    真核細胞結構組分的差異去垢劑分離實驗

    基本方案 附加方案:去垢劑提取物中RNA的分離 附加方案:用鎂沉淀微管蛋白和微管結合蛋白             實驗方法原理

    真核細胞結構組分的差異去垢劑分離實驗——基本方案

    實驗方法原理差異去垢劑分離法(differentialdetergentfract10nat10n,DDF)包括使用一系列含不同去垢劑的PIPES緩沖液對細胞進行連續抽提,首先是毛地黃皂苷,其次是Triton,最后是Tween/脫氧膽酸鹽。這些步驟產生4種在生化和電泳上相異的組分(見圖3.3和表3.

    實質等同性(蛋白質組學)實驗

    實驗材料:ESI-MS                                        

    實質等同性(蛋白質組學)實驗

    實驗材料ESI-MSMALDI - MS試劑、試劑盒提取緩沖液儀器、耗材SDS- 聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗步驟眾所周知,在實驗室內和實驗室間難以保證雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳的重復性。在我們實驗室,強制性地要求嚴格遵守標準操作程序(sop ) , 以確保不同的操作者可以獲得可重復的分離結果。小麥白面粉樣品

    實質等同性(蛋白質組學)實驗

    實驗材料ESI-MSMALDI - MS試劑、試劑盒提取緩沖液儀器、耗材SDS- 聚丙烯酰胺凝膠電泳實驗步驟眾所周知,在實驗室內和實驗室間難以保證雙向聚丙烯酰胺凝膠電泳的重復性。在我們實驗室,強制性地要求嚴格遵守標準操作程序(sop ) , 以確保不同的操作者可以獲得可重復的分離結果。小麥白面粉樣品

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