RNA酶活性的控制
為了獲得高質量的真核細胞mRNA, 必須使用RNA酶的抑制劑或采用下述的破碎細胞和滅活RNA酶同步進行的方法,最大限度地降低細胞破碎過程中所釋放的RNA酶的活性。同時,避免偶然引入實驗室內其他潛在的痕量RNA酶也很重要。下面列舉避免RNA酶法染問題的一些注意事項。大多數有經驗的研究者并不拘泥于這些注意事項,只是在遇到問題時可能采用其中的一種或幾種方法加以解決。 實驗程序RNA酶的抑制劑破碎細胞和滅活RNA酶同步進行的方法(一)實驗程序 如不謹慎操作,外源性RNA酶可以通過下述途徑污染RNA制品:(1)玻璃制品、塑料制品和電泳槽 滅菌的一次性使用的塑料制品基本上無RNA酶,可以不經預處理直接用于制備和貯存RNA。實驗室用的普通玻璃器皿和塑料制品經常有RNA酶法染,使用前必須于180 ℃干烤8小時或更長時間(玻璃器皿)或用氯仿沖洗(塑料制品)。另一種方法是用0.1 %焦碳酸二乙酯(DEPC)的水溶液浸泡用于制備RNA的燒......閱讀全文
RNA酶活性的控制
為了獲得高質量的真核細胞mRNA, 必須使用RNA酶的抑制劑或采用下述的破碎細胞和滅活RNA酶同步進行的方法,最大限度地降低細胞破碎過程中所釋放的RNA酶的活性。同時,避免偶然引入實驗室內其他潛在的痕量RNA酶也很重要。下面列舉避免RNA酶法染問題的一些注意事項。大多數有經驗的研究者并不拘泥于這些注
RNA酶活性的控制
為了獲得高質量的真核細胞mRNA, 必須使用RNA酶的抑制劑或采用下述的破碎細胞和滅活RNA酶同步進行的方法,最大限度地降低細胞破碎過程中所釋放的RNA酶的活性。同時,避免偶然引入實驗室內其他潛在的痕量RNA酶也很重要。下面列舉避免RNA酶法染問題的一些注意事項。大多數有經驗的研究者并不拘泥于這些注
RNA的制備(mRNA的分離和RNA酶活性的控制)-3
A、細胞裂解a.單層細胞的裂解a)吸出培養液,以7ml用冰預冷的無鈣鎂離子磷酸緩沖鹽溶液PBS沖洗細胞培養皿內的單層細胞,重復1次,將平板置于冰上直至所有單層細胞沖洗完畢。也可將平板放在一塊鋁板上,再將鋁板置于冰盤上。b)直徑為90mm的培養皿需加0.5ml RNA提取緩沖液, 并使之遍布整個平板的
RNA的制備(mRNA的分離和RNA酶活性的控制)-2
(一)實驗程序如不謹慎操作,外源性RNA酶可以通過下述途徑污染RNA制品:(1)玻璃制品、塑料制品和電泳槽 滅菌的一次性使用的塑料制品基本上無RNA〈, /SPAN〉酶,可以不經預處理直接用于制備和貯存RNA。實驗室用的普通玻璃器皿和塑料制品經常有RNA酶法染,使用前必須于180℃干烤8小時或更
非編碼RNA Nfi調控水稻固氮酶活性
近日,生物所微生物功能基因組創新團隊林敏課題組在水稻根際聯合固氮施氏假單胞菌中發現新型非編碼RNA參與協同調控固氮酶活性,為進一步揭示生物固氮網絡調控機制奠定了重要理論基礎。該成果發表在最新一期的經典微生物學雜志《應用環境微生物學(Applied and Environmental Micro
酶活性單位
1.酶活性單位 20世紀50年代以前通常用慣用單位,即用先報道某種酶測定方法的臨床酶學家的姓氏來命名其單位。例如,測定AMY的Somogyi單位,轉氨酶的賴氏單位(Reitman-Frankel)等。不僅酶不同,單位不同,即使是同一種酶也因方法不同而可有數種活性單位,參考值差別也很大,給臨床
酶活性定義
酶活性指的是有機體的生命活動表現了它內部化學反應歷程的有序性,這種有序性是受多方面因素調節的,一旦破壞了這種有序性,就會導致代謝紊亂,產生疾病,甚至死亡。酶活力受到調節和控制是區別于一般催化劑的重要特征。
酶的活性濃度單位
酶活性濃度以每單位體積所含的酶活性單位數表示。近些年來,我國及世界各國的臨床實驗室幾乎都習慣用U/L來表示體液中酶活性濃度。考慮到各級醫護人員都對katal不太熟悉,如使用katal/L報告酶活性濃度結果時,最好同時注明相應的U/L.在對酶活性濃度單位計算時,可根據所測定的酶所用方法的不同,利用標準
酶的活性濃度單位
酶活性濃度以每單位體積所含的酶活性單位數表示。近些年來,我國及世界各國的臨床實驗室幾乎都習慣用U/L來表示體液中酶活性濃度。考慮到各級醫護人員都對katal不太熟悉,如使用katal/L報告酶活性濃度結果時,最好同時注明相應的U/L.在對酶活性濃度單位計算時,可根據所測定的酶所用方法的不同,利用標準
酶活性測定的方式
酶促反應速度的測定可采用兩種方式: 一、測定完成一定量反應所需的時間; 二、測定單位時間內的酶促反應量。前者稱為終點法,后者稱為動力學法。 終點法 該方式是在特定條件下,將樣品中要檢知的酶作用一定量的底物,然后根據反應進行到某一程度(即達到某一指標)所需要的時間長短來估計酶的活力。 其