包涵體的純化
關于包涵體的純化是一個令人頭疼的問題,包涵體的復性已經成為生物制藥的瓶頸,關于包涵體的處理一般包括這么幾步:菌體的破碎、包涵體的洗滌、溶解、復性以及純化,內容比較龐雜 一、菌體的裂解 1、怎樣裂解細菌? 細胞的破碎方法 1.高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調速器先撥至最慢處,開動開關后,逐步加速至所需速度。此法適用于動物內臟組織、植物肉質種子等。 2.玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動,即可將細胞研碎,此法細胞破碎程度比高速組織搗碎機為高,適用于量少和動物臟器組織。 3.超聲波處理法:用一定功率的超聲波處理細胞懸液,使細胞急劇震蕩破裂,此法多適用于微生物材料,用大腸桿菌制備各種酶,常選用50-100毫克菌體/毫升濃度,在1KG至10KG頻率下處理10-15分鐘,此法的缺點是在處理過程會產生大量的熱,......閱讀全文
紅細胞包涵體試驗
(1)原理:將煌焦油藍液與新鮮血液一起孵育,不穩定血紅蛋白易變性沉淀形成包涵體。 結果:陰性。 (2)臨床意義:不穩定血紅蛋白病、HbH病呈陽性。
包涵體疣病例分析
1 病歷資料患者男,65 歲。因右手掌結節伴疼痛 10 d,于 2011 年 3 月 18 日就診于我科門診。患者于 10 d 前無意中 發現右手掌有一紅色丘疹,伴輕度疼痛,未予診治。丘 疹逐漸增大。發病前局部無明確的外傷史。家族中無類 似疾病患者。 體格檢查:各系統檢查無異常,全身淺表
概述包涵體肌炎與遺傳性包涵體肌病的發病機制
Oidfors對s-IBM線粒體DNA(mtDNA)的分析研究中發現,約有47%的s-IBM有多發性mtDNA缺失。mtDNA的這種改變不能用年齡或繼發于炎癥等因素來解釋。DiMauro認為s-IBM出現多發性mtDNA缺失可能由核DNA與mtDNA間的聯系中斷所致,并認為線粒體的這一改變在肌肉
簡述包涵體病的治療方法
包涵體病在疑似或確定為IBD感染的病例應以支持治療,包括給予脫水的病蛇輸液,營養補充以及使用抗生素治療二次性細菌感染,但無法改變疾病的進程,因此在確診的病例通常建議安樂死來防止感染的散布。 雖然單一個體可以給予支持治療,但在群體方面重點應防止此疾病在蚺蛇族群的爆發。
包涵體肝炎的基本癥狀介紹
包涵體肝炎是由I 群禽腺病毒引起的雛雞的一種急性傳染性疾病。其特征為肝炎、肝細胞內形成核內包涵體、貧血和肌肉出血。已知有12 種血清型的禽腺病毒與本病有關。 健康雞群突然發病,并在感染3~5天后出現死亡高峰,然后很快停止,也有的持續2~3周。發病率低,病雞呈蜷曲姿勢,羽毛粗亂,表現貧血、黃疸,
包涵體肝炎的病理變化
主要變化為貧血、黃疸,肝臟腫大、蒼白、質脆,表面有不同程度的出血斑或出血點,有的可見到大小不等的壞死灶,肝褪色呈淡褐色至黃色。病程長的病雞肝萎縮。病理學檢查在肝細胞中可見核內包涵體。 腎腫大、蒼白,被膜散在點狀出血,腎小管內有尿酸鹽沉積。有的病例尚可見脾臟和法氏囊萎縮,骨髓病變,長骨骨髓呈桃紅
關于包涵體肝炎的防治介紹
(一)治療 肝舒飲水,連用三至四天,效果很理想。發病時,飼料戶加倍添加多維素、維生素K3 ,添加抗生素,可以控制并發癥和繼發感染,改善雞的營養狀況,增強抵抗力,同時降低舍溫。 (二)預防 做好傳染性法氏囊病和傳染性貧血的免疫接種工作,確保雛雞有足夠的傳染性法氏囊病母源抗體,可免受傳染性法氏囊病
包涵體染色的方法有哪些
包涵體染色的方法有哪些?原理是什么包涵體染色的方法有哪些?原理是什么包涵體染色的方法有哪些?原理是什么蛋白包涵體-溶解原理及方法2009年03月15日;維持包涵體內蛋白質結構的作用力是分子內的作用力,;1.遵循標準;包涵體蛋白質的溶解同樣是一個工藝的關鍵的步驟;(1)快速溶解的動力學;;(2)與蛋白
包涵體復性的方法有哪些?
原核表達中因為各種內在和外在因素,外源蛋白表達過程中多數會形成不可溶形式的包涵體。由于包涵體產量高、穩定性好、容易純化等,包涵體蛋白已成為規模化制備蛋白產品的重要途徑。包涵體雖然有如此好的優點,但卻沒有生物活性,為了達到這一重要目標,各種復性機理及策略被研發出來,但是往往沒有一種通用的策略,而是需要
包涵體復性的方法有哪些?
原核表達中因為各種內在和外在因素,外源蛋白表達過程中多數會形成不可溶形式的包涵體。由于包涵體產量高、穩定性好、容易純化等,包涵體蛋白已成為規模化制備蛋白產品的重要途徑。包涵體雖然有如此好的優點,但卻沒有生物活性,為了達到這一重要目標,各種復性機理及策略被研發出來,但是往往沒有一種通用的策略,而是
用藥治療包涵體肌炎與遺傳性包涵體肌病的簡介
對類固醇激素治療無效是s-IBM區別于多發性肌炎皮肌炎(PM-DM)的重要臨床特征。盡管類固醇治療能減少s-IBM患者肌肉內炎細胞的浸潤,降低血清CK水平,但鑲邊空泡纖維和嗜剛果紅物質均增加,臨床肌無力加重或僅有輕微改善。這進一步表明s-IBM炎癥浸潤可能只是繼發性。 靜脈注射免疫球蛋白(
關于包涵體肌炎與遺傳性包涵體肌病的預防保健介紹
1、飲食保健 根據不同的癥狀有不同情況的飲食要求,具體詢問醫生,針對具體的病癥制定不同的飲食標準。 2、預防護理 尚無有效的預防方法,對癥處理,加強臨床醫療護理,是改善患者生存質量的重要內容。 3、疾病診斷 s-IBM主要應與慢性多發性肌炎、肌萎縮側索硬化(ALS)、進行性脊髓性肌萎縮
關于包涵體肌炎與遺傳性包涵體肌病的病理病因分析
s-IBM確切的發病機制至今未明。Chou曾懷疑包涵體為一黏病毒產物,且后來發現該包涵體能與麻疹病毒抗體結合,但有關s-IBM與病毒感染間的關系至今未得到肯定。 Arahata采用免疫電鏡方法對s-IBM的免疫機制進行研究,結果發現s-IBM中單核細胞對非壞死纖維的侵入以及肌內膜的單核細胞浸潤
關于包涵體肌炎與遺傳性包涵體肌病的檢查方法介紹
實驗室檢查: 血清肌酶檢查s-IBM的血清CK水平可正常或輕度增加,一般不超過正常值的10~12倍。 其他輔助檢查: 肌電圖檢查s-IBM的EMG特點與PM-DM相似,表現為異常自發性活動增多,短時程運動單位電位和多相波增多。所不同的是s-IBM長時程和短時程運動單位可在同一塊肌肉同時出現
關于包涵體的溶解的相關介紹
維持包涵體內蛋白質結構的作用力是分子內的作用力,這種作用力也維持天然蛋白質的穩定性的結構。先前有報道這種作用力是共價鍵結合的,但是,趨向于一致,就是維持包涵體內部的蛋白質的緊密的結構的是非共價鍵的作用力。二硫鍵,無論是正確的還是錯誤的二硫鍵,在維持內部蛋白質的緊密的結構中都沒有發揮直接的作用。最
關于包涵體的其他條件形成介紹
包涵體其它的發酵條件同樣影響蛋白質包涵體的形成,發酵液中加入蔗糖可以大大降低內酰胺酶包涵體的形成。蔗糖的作用可能是穩定天然蛋白質的結構或者防止蛋白質折疊中間體的聚集。在體外的內酰胺酶折疊復性的過程中,同樣發現復性緩沖液中加入蔗糖可以提高蛋白質的復性率。其它促重組蛋白質可溶性表達的生長添加劑還有乙
關于包涵體病的基本癥狀介紹
包涵體病(IBD)會出現變化或漸進性的癥狀,因此很難與其他疾病區別。大部分的病例也很難知道是何時接觸到病原。 急性期的臨床癥狀包括輕微的神經癥狀(例如:頭部震顫、凝視呆然和肌肉無力癱瘓等)或活動力降低。 疾病感染的后期,通常會有二次性的細菌感染,因而造成呼吸道方面的疾病、口炎及皮膚炎,此外I
關于包涵體病的活體診斷介紹
1、包涵體病— 詳細的記錄必須包含蛇類的來源及可能暴露于其他蚺科蛇類的接觸史。任何新進的蛇類,包括蚺科及非蚺科的蛇類,必須于病歷資料中注明,若有檢疫過程的資料也需記錄。 2、包涵體病—?臨床狀出現的時間及過程和蛇類的種別都必須記錄。 3、包涵體病—?完整的理學檢查,包括神經學檢查。 4、包
巨細胞包涵體病的介紹
巨細胞包涵體病,又稱巨細胞病毒感染,是由人巨細胞病毒感染所導致的一種先天性或后天性全身感染性疾病。由于在被感染的很多器官組織內可以發現細胞核內和胞漿內的人巨細胞病毒包涵體而被稱為巨細胞包涵體病。巨細胞病毒感染在人群中的感染率隨年齡增加而呈上升趨勢,60%~90%的成人曾經感染。社會經濟地位較低的
巨細胞包涵體病的臨床
先天性感染的嬰兒可僅表現為巨細胞病毒尿,除此之外無異常。嚴重時CMV感染可引起流產,滯產或出生后死于出血,貧血或廣泛的肝臟或中樞神經系統損傷。 后天獲得性感染,無論是出生后或是一生中任何時候獲得的CMV感染,常常是無癥狀的。巨細胞病毒單核細胞增多癥或巨細胞病毒性肝炎可為一種急性發熱性疾病。
巨細胞包涵體病的診斷
確診CID包括臨床表現及實驗室確診的證據,僅有實驗室檢測證據無臨床表現稱為CMV感染.不能診斷為CID。以下情況提示有CID的可能性:新生兒有黃疸、肝脾腫大、皮膚粘膜有出血點、周圍血異常淋巴細胞增多,但血清嗜異性凝集反應陰性。
巨細胞包涵體病的治療
至今尚無CMV感染的特異治療藥物,故對癥治療及良好的護理工作十分重要。可試用以下藥物治療。 1、干擾素(interferon)100萬u/d,肌注,每日一次,10日一療程,部分病兒可間隔7~10日內進行1~2療程治療,有助于黃疸消退,肝臟脾臟縮小及肝功能恢復。 2、三氮唑核苷(virazol
關于包涵體肌炎的基本介紹
包涵體肌炎(inclusion body myositis,IBM)是指以光鏡下觀察到肌膜下或肌纖維中央內出現鑲邊空泡,電鏡下觀察到肌質或肌核內出現管絲狀包涵體的炎性肌病,病程緩慢進展,受累肌肉具有特定部位,可能與免疫介導有關,也可能為一種肌肉變性病。IBM是50歲以上人群中最常見的炎癥性肌病,
關于包涵體肌炎的檢查介紹
1.實驗室檢查 血清CK可以正常或升高數倍,但不超過正常值上限的12倍;紅細胞沉降率正常。血清免疫球蛋白和自身免疫指標多無異常。 2.肌電圖 提示肌源性及神經源性損害。 3.肌肉活檢 顯示肌纖維大小不一,萎縮肌纖維呈小圓形和小角形,可見肌纖維壞變,尤其是可見較多的肌纖維出現鑲邊空泡,且
診斷包涵體肌炎的相關介紹
1.50歲以上起病者,慢性病程,四肢近端、遠端均無力,并有功能障礙和肌肉萎縮,特別是股四頭肌的無力萎縮; 2.實驗室檢查顯示血清CK水平中度升高,肌電圖檢查提示肌源性及神經源性損害; 3.肌肉活檢,顯示肌纖維大小不一,萎縮肌纖維呈小圓形和小角形,可見肌纖維壞變,尤其是可見較多的肌纖維出現鑲邊
尿素在包涵體復性中的作用
①包涵體就是蛋白的變性聚集后的產物,6M鹽酸胍及8M尿素是作為溶解包涵體的溶劑。②復性的過程是逐步去除鹽酸胍或者尿素,從而使得蛋白天然構象逐步形成。所以一般如果起始使用的是6M鹽酸胍進行包涵體溶解,這個過程中逐步降低的是鹽酸胍的濃度。
關于包涵體肌炎與遺傳性包涵體肌病的并發癥和預后介紹
1、并發癥 無特殊記錄,四肢肌無力長期臥床及吞咽困難,可導致褥瘡及肺部感染。 2、預后 SIM預后不佳,Lotz對28例患者平均隨訪72個月,結果表明s-IBM呈緩慢進行性發展,有6例患者起病15年后生活已不能自理,1例10年后臥床不起,12年后死于呼吸、心力衰竭。
關于包涵體病的基本內容介紹
包涵體病(Inclusion body disease 簡稱 IBD)是醫學術語,由包涵體皰疹病毒引起的一種傳染性疾病,這種病毒會在呼吸道與消化道上皮細胞中產生包涵體,同時引發二次細菌感染,主要癥狀為視網膜組織、腦組織、脊髓組織、末端神經組織以及器官組織出現異常變化。尚無有效治療方法。 包涵體
關于包涵體的外界形成因素介紹
包涵體在一些外界壓力下也可以形成,如溫度,是影響包涵體形成與否的主要因素。有些蛋白質在高溫的情況下容易形成包涵體,這是由于這些蛋白質在高溫下容易變性而形成聚集體。所以有人認為,當蛋白質具有高的融化溫度、高的天然構象穩定性的情況下,包涵體就不容易形成。但是,對一些體內包涵體形成的研究發現,包涵體的
關于包涵體的基本分離信息介紹
一旦一個穩定的、重復的發酵過程建立起來,則要考慮提取包涵體的步驟了。包涵體處在細胞質內或者細胞的外周質,必須破壞細胞膜才能把包涵體釋放出來。 溶液中的包涵體也要同破碎液中溶解的成分和不溶的其它成分如細胞碎片、細胞膜以及核糖體等成分分離開來。提取的第一步是冷卻發酵液,利用離心或者錯流過濾的方法收