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（四）染色原理及步驟 1．基本原理 酶標抗體與熒光色素標記抗體的染色相同，亦分直接法和間接法。直接法是將酶直接標記在每一抗體上，間接法是將酶標記在第二抗體上，檢測組織細胞內的特定抗原物質。間接法所用的第一抗體是對組織細胞內某種抗原的特異性抗體（80%～90%的抗血清系由家兔制得，而絕大數單克隆抗體系由小鼠制備）；第二抗體則為第一抗體（家兔/小鼠的IgG）的抗體。所以，只要不同的第一抗體均來自同一種屬，同一標記的第二抗體就能用來顯示其不同特異性抗原的存在，這樣可避免了直接法中標記每一種第一抗體的麻煩，并且提高了方法的敏感度。目前的ICC染色中，以間接法為常用，在此著重介紹間接法的染色程序。 2．染色程序 （1）切片準備：見第一章 。 ①石蠟切片經二甲苯或Hemo-De脫蠟，下行酒精至水。②固定/無固定新鮮組織冰凍切片，室溫干燥2h以上。 （2）未固定的新鮮組織切片，丙酮固定20～30min(fretrieval )，......閱讀全文
取 材 取材是制作切片程序中的首要步驟，取材不當，將直接影響病理診斷和科研工作的效果。組織標本的選用非常重要，不能隨意的切取組織來制作組織切片，否則病理檢驗的結果是不會令人滿意的。一、取材工具：取材刀具必須鋒利。切取標本不應該擠壓和揉擦，不應使用有鉤鑷子或血管鉗等手術
實驗概要本文介紹了免疫組織化學實驗操作流程，主要有：脫蠟和水化，抗原修復及免疫組織化學染色等步驟。實驗原理免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位
雙重或多重標記是利用免疫學和細胞化學原理，在同一張切片上同時采用或先后采用不同顏色的熒光色素或酶促產物，或采用不同直徑大小顆粒膠體金來原位標記兩種或兩種以上抗原-抗體復合物，達到在同一細胞或亞細胞水平顯示不同抗原成分（定性、定位、定撤），分析不同抗原成分相互間功能的增消關系，操作遵循的原則與要求同單