PCR實用技巧
PCR實用技巧增加PCR的特異性: 1. primers design 這是最重要的一步。理想的,只同目的序列兩側的單一序列而非其它序列退火的primer要符合下面的 一些條件 a. 足夠長,18-24bp,以保證特異性.當然不是說越長越好,太長的primer同樣會降低特異性,并且降低產量 b. GC% 40%~60% c. 5'端和中間序列要多GC,以增加穩定性 d. 避免3'端GC rich, 最后3個BASE不要有GC,或者最后5個有3個不要是GC (有人說:3' 端最好是 GC/CG/CC/GG。)e. 避免3'端的互補, 否則容易造成DIMER f. 避免3'端的錯配g. 避免內部形成二級結構 h. 附加序列(RT site, Promoter sequence)加到5'端, 在算Tm值時不算......閱讀全文
PCR實用技巧
PCR實用技巧增加PCR的特異性:?1. primers design?這是最重要的一步。理想的,只同目的序列兩側的單一序列而非其它序列退火的primer要符合下面的 一些條件?a. 足夠長,18-24bp,以保證特異性.當然不是說越長越好,太長的primer同樣會降低特異性,并且降低產量?b. G
PCR實用技巧
增加PCR的特異性: 1. primers design 這是最重要的一步。理想的,只同目的序列兩側的單一序列而非其它序列退火的primer要符合下面的 一些條件 a. 足夠長,18-24bp,以保證特異性.當然不是說越長越好,太長的primer同樣會降低特異性,并且降低產量 b. GC% 40%~
pcr實用技巧
增加PCR的特異性:1. primers design這是最重要的一步。理想的,只同目的序列兩側的單一序列而非其他序列退火的引物要符合下面的 一些條件a. 足夠長,18-24bp,以保證特異性.當然不是說越長越好,太長的引物同樣會降低特異性,并且降低產量b. GC% 40%~~~~60% c. 5&
pcr實用技巧-2
1.簡介寡聚核苷酸引物的選擇,通常是整個擴增反應成功的關鍵。所選的引物序列將決定PCR產物的大小、位置、以及擴增區域的Tm值這個和擴增物產量有關的重要物理參數。好的引物設計可以避免背景和非特異產物的產生,甚至在RNA-PCR中也能識別cDNA或基因組模板。引物設計也極大的影響擴增產量:若使用設計粗糙
PCR技術服務-PCR的實用技巧
增加PCR的特異性:1. primers design這是zui重要的一步。理想的,只同目的序列兩側的單一序列而非其它序列退火的primer要符合下面的 一些條件1) 足夠長,18-24bp,以保證特異性.當然不是說越長越好,太長的primer同樣會降低特異性,并且降低產量2) GC% 40%~60
PCR 實用技巧:七大方法消除引物二聚體
相信很多人一聽到引物二聚體的時候都會很憤怒,因為幾乎我們每個人都受到過它的折磨。它作為 PCR 的副產物,甚至有時候是主要產物充斥著我們的整個 PCR 實驗過程。你在被它折磨的不行不行的時候,你有想過它為什么總是出現在你的實驗結果中嗎接下來就讓我帶大家走進它的世界,了解它,認識它,最后戰勝它。引物二
PCR 實用技巧:七大方法消除引物二聚體
相信很多人一聽到引物二聚體的時候都會很憤怒,因為幾乎我們每個人都受到過它的折磨。它作為 PCR 的副產物,甚至有時候是主要產物充斥著我們的整個 PCR 實驗過程。你在被它折磨的不行不行的時候,你有想過它為什么總是出現在你的實驗結果中嗎接下來就讓我帶大家走進它的世界,了解它,認識它,最后戰勝它。一、引
油煙檢測儀選購實用技巧
隨著科技的高速發展,伴隨著國家對餐飲油煙治理的重視,油煙檢測儀也應運而生。它可以24小時實時在線監測油煙排放濃度、顆粒物濃度、非甲烷總烴、油煙凈化設備和風機開關等數據,并將監測數據實時發送到監控中心服務器,可通過電腦、手機等客戶端進行訪問。 選購技巧: 1.首先基本的是要看這款檢測
正確使用比色杯的實用技巧
實驗室中比色皿是濁度測量中最重要的組成部分之一。它們用于將所有測量對象(不論是樣品還是標準品)引入濁度計的光路中。為了始終獲得精確的測量結果,處理比色杯有一些基本規則。 比色杯通常由特殊的光學玻璃制成,對測量影響很小。盡管如此,仍有一些重要因素需要考慮,以避免比色杯造成誤差。小心的比色皿處理
色譜柱填充實用技巧匯總
柱層析法是世界各國實驗室常用的純化技術。若操作得當,我們可以快速從混合物中得到我們需要的化合物。和化學實際操作的諸多事情相似的是,如果沒有幾年甚至十幾年的經驗積累,色譜柱的快速及有效安裝的確會成為一道坎兒。今天我們為大家總結的就是有關色譜柱填充這一環節應該注意的那些看似平常但也有很多講究的問題。?我