WIKI資訊
畢赤酵母高效轉化實驗方案1.收集菌體取1mlGS115過夜培養物(OD約6-10) 分裝到1.5ml EP管中，4℃、10000g 離心1min，棄上清，沉淀用無菌水(4℃)洗滌，同樣條件下離心，棄上清。2.菌體處理加入1ml處理液，室溫下放置20min。處理液：10mM LiAc10mM DTT0.6M sorbitol10mM TrisHCl(pH7.5)3.離心，棄上清，加入1ml 1M sorbitol ，離心，棄上清，4.用1M sorbitol洗滌二次，到最終體積約為80μl.（菌體太多可適當棄去部分）5.加入10μl.經過BglⅡ酶切處理的工程質粒，混勻后轉入 電擊杯中，冰浴5min.6.電轉. 1.5kv，25μF，200Ω條件下進行電轉。7.電擊后立刻加入1mL 1M sorbitol，吸出后于30℃培養2h。8.取一定量涂平板(YPDS + Zeocin，涂布的量分別為100、200微升，剩余的經離心處理后全......閱讀全文
實驗步驟 一、引言 選 擇 合 適 醜 組 蛋 白 表 達 方 法 對 于 能 否 及 時 獲 取 所 需 數 量 和 質 量 的 重z組蛋白非常關鍵。選 擇 了 錯 誤 的表達宿主可 能 導 致 蛋 白 質錯 誤 折 疊 或
重組蛋白是研究生物學過程的重要工具。需要使用表達系統來對其進行制備。合適表達系統的選擇取決于重組蛋白的特性、重組蛋白的預期應用以及該系統能否生產足夠量的蛋白質。作者： 伯吉斯等,主譯：陳薇，本實驗來自「蛋白質純化指南」實驗步驟一、引言選 擇 合 適 醜 組 蛋 白 表 達 方 法 對 于 能 否 及