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與rRNA 和tRNA 不同的是，哺乳動物細胞的絕大部分mRNA 在其3'端均有一poly(A)尾，因此可以用oligo(dT)－纖維素親和層析法從大量的細胞RNA 中分離mRNA dmonds等，1971;At Leder，1972）。在構建cDNA文庫時， 必須經上述純化步驟制備mRNA 模板。進行Northern雜交或Sl 核酸酶作用圖分析時，與總RNA 相比，采用poly(A)+ RNA 能獲得更為滿意的結果。 可以按照Gilham(1964)所述方法制備Oligo(dT)－纖維素，也可以買現成的產品。1）用0.1mol/L NaOH懸浮0.5-1.0g 0ligo(dT)－纖維素。2）將懸浮液裝入滅菌的一次性層析柱或裝入填有經用DEPC處理并經高壓滅菌的玻璃棉的巴期德吸管中，柱床體積為0.5-1.0ml，用3倍柱床體積滅菌水沖洗柱床。柱床體積為1m的oligo(dT)－纖維素最大量為10mg總RNA ，如果總R......閱讀全文
Western免疫印跡（Western Blot）是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳，被
Western免疫印跡（Western Blot）是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。 本文主要通過以下幾個方面來詳細地介紹一下Western Blot技術: 一、原理 二、分類