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    植物組織RNA提取的難點及對策

    植物組織RNA提取的難點及對策 從植物組織中提取RNA是進行植物分子生物學方面研究的必要前提。要進行Northern雜交分析,純化mRNA以用于體外翻譯或建立cDNA文庫,RT-PCR及差示分析等分子生物學研究,都需要高質量的RNA。因此,從植物組織中提取純度高、完整性好的RNA是順利進行上述研究的關鍵所在。 從文獻報道上看,有許多植物就是由于未能有效地分離純化其組織中的RNA, 而阻礙了其分子生物學方面研究的進展。一般認為在這些植物組織中,或富含酚類化合物,或富含多糖,或含有某些尚無法確定的次級代謝產物,或RNase的活性較高。在完整的細胞內這些物質在空間上與核酸是分離的,但當組織被研磨,細胞破碎后,這些物質就會與RNA相互作用。酚類化合物被氧化后會與RNA不可逆地結合,導致RNA活性喪失及在用苯酚、氯仿抽提時RNA的丟失[1],或形成不溶性復合物[2];而多糖會形成難溶的膠狀物,與RNA共沉淀下來[3];萜類化合物和RN......閱讀全文

    植物組織RNA提取的要點與技巧

    從植物組織中提取RNA 是進行植物分子生物學方面研究的必要前提。要進行Northern雜交分析,純化mRNA 以用于體外翻譯或建立cDNA文庫,RT-PCR及差示分析等分子生物學研究,都需要高質量的RNA 。因此,從植物組織中提取純度高、完整性好的RNA 是順利進行上述研究的關鍵所在。從文獻報道上看

    RACE-PCR克隆基因的幾點建議

    摘 要:  RACE是一種快速克隆cDNA末端的方法,目前, 該方法被廣泛應用于未知堿基序列基因的克隆,尤其是SMART RACE技術更為人們所青睞。本文總結了我們實驗室用SMART RACE技術克隆基因的一些心得體會,希望對用RACE方法克隆基因的同行有些幫助。關鍵詞: RACE; RN

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