酵母染色體沉淀分析方法
ABSTRACTThis protocol describes a method for the detection of proteins bound to specific regions of chromatin in yeast. There are many variations of this assay. MATERIALS Reagents Antibody of choice (see Step 21) DOC buffer Tris-Cl (10 mM, pH 8.0)LiCl (0.25 M)NP-40 (0.5%)Deoxycholate (DOC) (0.5%)EDTA (1 mM)Dry ice Ethanol (100% [ice cold], 70%) Glycine (2.5 M)Bring to pH 8.0 w......閱讀全文
酵母染色體沉淀分析方法
ABSTRACT This protocol describes a method for the detection of proteins bound to specific regions of chromatin in yeast. There are many variati
酵母人工染色體的標記方法
YAC 載體的選擇標記主要采用營養缺陷型基因，如色氨酸、亮氨酸和組氨酸合成缺陷型基因 trp 1、 leu 2和 his 3、尿嘧啶合成缺陷型基因 ura3 等，以及赭石突變抑制基因 sup4 。與 YAC 載體配套工作的宿主酵母菌（如AB1380）的胸腺嘧啶合成基因帶有一個赭石突變ade 2-1。
酵母人工染色體
·?????????Easy YAC Preparation Method?(Andrew Davies,Shaw lab)·?????????Screening YAC libraries?(Donis Keller Lab)This is a method for screening YAC l
Nature：構造酵母染色體
合成生物學的目標之一就是構建那些復雜的人工合成有機體。目前，在酵母細胞中已經取得了階段性的進展——采用分段式方法，研究者已經可以將整個酵母染色體轉化成為合成序列了。 生物細胞其實很像是一臺計算機——基因組可以比作軟件，它負責對細胞的構成進行編碼，細胞器則猶如計算機的硬件，負責讀取并運行軟件的
沉淀分離方法分析過程
沉淀分離方法是指利用沉淀反應實現組分分離的化學方法。在分析化學中常通過沉淀反應將欲測組分分離出來；或者把共存組分沉淀下來，以清除它們對欲測組分的干擾。根據沉淀劑的性質和沉淀的過程又分為：①無機沉淀劑分離法，例如用SO42-為沉淀劑分離Ba2+離子，用S2-為沉淀劑分離Zn2+離子。②有機沉淀劑分離法
酵母人工染色體的應用
直到 20 世紀 80 年代中期，尚無技術可用于基因組 DNA 黏性大片段的分離、擴增和分析。在此之前，如果要對某一 DNA 片段進行詳細的物理和功能研究，該 DNA 的長度應能夠裝入 λ 噬菌體顆粒或黏粒載體。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理直到 20 世紀 80 年代
酵母人工染色體的應用
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 直到 20 世紀 80 年代中期，尚無技術可用于基因組 DNA 黏性大片段的分離、擴增和分析。在此之前，如果要對某一 DNA 片段進行詳細的物理和功能研究，該 DNA 的長度應能夠裝入 λ 噬菌體顆粒或黏粒載體。
酵母人工染色體的應用
實驗方法原理 直到 20 世紀 80 年代中期，尚無技術可用于基因組 DNA 黏性大片段的分離、擴增和分析。在此之前，如果要對某一 DNA 片段進行詳細的物理和功能研究，該 DNA 的長度應能夠裝入 λ 噬菌體顆粒或黏粒載體。實驗材料 釀酒酵母試劑、試劑盒 甘油儀器、耗材 脈沖場凝膠電泳儀選擇性培養
酵母人工染色體的簡介
酵母人工染色體（Yeast artificial chromosomes,簡稱YAC）,是一種能夠克隆長達400Kb的DNA片段的載體,含有酵母細胞中必需的端粒、著絲點和復制起始序列,是細胞內具有遺傳性質的物體,易被堿性染料染成深色,所以叫染色體（染色質）。其本質是脫氧核苷酸,是細胞核內由核蛋白
酵母人工染色體的工作原理
YAC 載體主要是用來構建大片段 DNA 文庫，特別用來構建高等真核生物的基因組文庫，并不用作常規的基因克隆。圖3-26是 pYAC4 的遺傳結構圖，當用BamHⅠ切割成線狀后，就形成了一個微型酵母染色體，包含染色體復制的必要順式元件，如自主復制序列、著絲粒和位于兩端的端粒。這些元件在酵母菌中可以驅