支原體的計數
支原體的計數不像一般的細菌采用一般的比濁法，因為支原體在液體培養基中的生長是澄清透明的，所以一般的比濁法無法用于支原體的計數！要采用CCU（即顏色改變單位法）！其原理在于通過支原體在液體培養基中的代謝活力為指標，來檢測支原體的相對濃度！具體做法：取12只無菌小試管，每管中加入1。8毫升的支原體液體培養基，然后在第一管中加入0。2毫升的代測支原體菌液，充分混勻后，從第一管中吸取0。2毫升混合物加入第二管，然后一次類推，一直到最后一管，然后置于37度溫箱中培養，以顏色出現變化的最后一管為代測支原體的CCU，比如到第六管出現顏色改變，則代測支原體的CCU為：10的六次方CCU/ml！......閱讀全文
支原體培養
支原體常用培養基為PPLO,很多公司都有出售.但血清（常用馬血清或豬血清）和抗生素(醋酸跎)你要自己加.你可以查查.還有改良的Frey's培養基，常用的微生物實驗技術書上都可以查到的。可以自己配制的。在液體培養基中通常要加入酚紅做指示劑的，當培養基由紅色變為黃色時，即可判定支原體的生長程度。
PCR－測定支原體
實驗材料Taq DNA多聚酶引物陽性對照DNA脫氧核苷三磷酸混合物三磷酸瓊脂糖1.3%TAE膠試劑、試劑盒磷酸緩沖鹽溶液液Tris醋酸EDTA6×加樣緩沖液引物儲備液儀器、耗材DNA抽提和純化系統基質的DNA抽提試劑盒熱循環儀實驗步驟一、DNA 標本的收集和制備1. 需要檢測支原體污染的細胞系，在收
熒光檢測支原體
實驗方法原理在無抗生素情況下，至少將細胞培養一周，將培養上清轉移至處于對數生長早期的指示細胞中，孵育 3~5d ，將細胞固定和染色，尋找細胞核之外的熒光。實驗材料來自于7天單層培養的無抗生素的細胞培養上清液或經離心后的上清液指示細胞試劑、試劑盒Hoechst 33258 染料BSS-PRD-PBSA
PCR－測定支原體
實驗材料 Taq DNA多聚酶引物陽性對照DNA脫氧核苷三磷酸混合物三磷酸瓊脂糖1.3%TAE膠試劑、試劑盒 磷酸緩沖鹽溶液液Tris醋酸EDTA6×加樣緩沖液引物儲備液儀器、耗材 DNA抽提和純化系統基質的DNA抽提試劑盒熱循環儀實驗步驟 一、DNA 標本的收集和制備1. 需要檢測支原體污染的細胞
支原體的檢測
實驗材料 細胞儀器、耗材 培養瓶載物片蓋片顯微鏡實驗步驟 1. ?標本制備用尖鑷子從培養瓶中直接取出預先置入的支持物（長形蓋片；24 小時前置入），令細胞面向上，置放在載物片上，再覆以24 mmX 36 mm的較大蓋片；如不用支持物培養法，也可取少許培養液滴在載物片上，再覆以蓋片法觀察亦可。2. ?
熒光檢測支原體
實驗方法原理在無抗生素情況下，至少將細胞培養一周，將培養上清轉移至處于對數生長早期的指示細胞中，孵育 3~5d ，將細胞固定和染色，尋找細胞核之外的熒光。實驗材料來自于7天單層培養的無抗生素的細胞培養上清液或經離心后的上清液 ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ?
支原體培養實驗
實驗材料?肺炎支原體試劑、試劑盒?糖酵解培養基基礎培養基牛血清酵母浸液酚紅醋酸鉈 青霉素儀器、耗材?培養皿燒杯玻璃棒天平移液管離心機棉花拭子實驗步驟 一、標本采集?支原體常侵及人和動物的粘膜表面，一般可用棉花拭子涂抹取樣后放入2~3 ml支原體液體培養基的小管中，或取其分泌液，若標本是組織塊，可在滅
支原體鑒別技術
支原體是一群目前所知能獨立生活的最小原核細胞型微生物。無細胞壁，具高度多形性，最小個體直徑200nm左右，可以通過濾菌器。在無生命的人工培養液中能生長繁殖，但營養要求高于一般細菌，在固體培養液中形成直徑為10—15u的小菌落，分中央與邊緣兩部分，中央部分長入培養液內，表面呈球形，在低倍鏡下觀察呈“荷
支原體CCU測定
丁香園網友“園中木”要做支原體CCU，而不知道這個初始菌液的濃度如何選，因缺少標準的0.5麥氏濃度，所以比較困惑，看了相關文獻有說將其定量到10的6次方左右，但又是如何定量的呢？網友“ljksbs”問答：這個我以前做過，只能用倍比稀釋法:取12只無菌試管，每管預先加入1.8ml支原體選擇性液體培養基
支原體標本采集
?? 1．標本采集? ? 男性：用無菌棉拭子插入尿道約2cm處旋轉，靜止數秒鐘后取材。? ? 女性：支原體標本抹去宮頸口粘液，用無菌拭子插入宮頸管l－2cm旋轉取材。? ? 尚可用前列腺液、精液、尿液離心沉淀物作標本。? ? 2．接種?? ? 將標本洗入Uu或Mh液體培養基，或用濾菌器過濾接種。?
支原體的計數
支原體的計數不像一般的細菌采用一般的比濁法，因為支原體在液體培養基中的生長是澄清透明的，所以一般的比濁法無法用于支原體的計數！要采用CCU（即顏色改變單位法）！其原理在于通過支原體在液體培養基中的代謝活力為指標，來檢測支原體的相對濃度！具體做法：取12只無菌小試管，每管中加入1。8毫升的支原體液體培
支原體培養實驗——支原體固體培養基接種法
支原體（mycoplasma）：又稱霉形體，為目前發現的最小的最簡單的原核生物。支原體細胞中唯一可見的細胞器是核糖體（支原體是原核細胞，原核細胞的細胞器只有核糖體）。實驗材料肺炎支原體試劑、試劑盒糖酵解培養基基礎培養基牛血清酵母浸液酚紅醋酸鉈青霉素儀器、耗材培養皿燒杯玻璃棒天平移液管離心機棉花拭子實
支原體培養實驗——支原體半固體培養基接種法
實驗方法原理一、標本采集?支原體常侵及人和動物的粘膜表面，一般可用棉花拭子涂抹取樣后放入2~3 ml支原體液體培養基的小管中，或取其分泌液，若標本是組織塊，可在滅菌乳缽或玻璃勻漿后接種，取樣后應盡快接種培養。?二、分離培養?混種法：在制備半固體培養基時，培養基加熱溶化，溫度降至50℃時，添加動物血清
支原體肺炎臨床路徑
?? 一、支原體肺炎臨床路徑標準住院流程??? （一）適用對象。??? 第一診斷為支原體肺炎（ICD-10：J15.7）??? （二）診斷依據。??? 根據《臨床診療指南－小兒內科分冊》（中華醫學會編著，人民衛生出版社），《諸福棠實用兒科學（第七版）》（人民衛生出版社）??? 1.多發年齡為5-18
什么是支原體培養
就是做支原體病毒的培養，看對哪些藥物過敏，一般情況下，做支原體檢查的時候，都需要做這項的檢查，萬一是陽性，就需要進行培養，看你身上帶的病毒對哪種藥反應較大，就用哪種藥來進行治療。
支原體污染及檢測
（1）支原體污染在細胞培養中最常見、不易被查覺，但支原體污染可顯著影響細胞功能干擾實驗結果。支原體是介于細菌和病毒之間的目前所知能獨立生活的最小微生物，它無細胞壁，形態呈高度多形性，最小直徑0.2um，可通過濾器。?目前通過對國內100余株/系細胞的檢測，形勢不容樂觀。污染率達30%?~?60%?。
什么是支原體感染？
支原體是已知的可以自由生活的最小生物,也是最小的原核細胞。它是一種比病毒大、比細菌小的原核微生物,它們的突出特點是沒有細胞壁。因而細胞柔軟,形態多變,具有高度多形性。在電鏡下觀察支原體細胞,可見具有細胞膜,細胞內有核糖體、RNA和環狀DNA。支原體廣泛存在于土壤、污水、昆蟲、脊椎動物及人體內,是動植
PCR法檢測支原體
PCR法是20世紀80年代中期建立起來的一種體外DNA擴增技術，其基本原理是酶促DNA合成反應，即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下，經DNA聚合酶的作用，使DNA 鏈擴增延伸。該方法具有靈敏度高、特異性強、快速的特點，但其對實驗環境的要求嚴格，實驗成本較高，有時還有假陽性的現象出現。1、儀器設
支原體抗體的作用
支原體抗體在一般情況下是潛伏于人體的免疫系統中，它的存在時間一般是幾個月到幾年不等，有的甚至是十年至幾十年。當我們的身體再次受到支原體的侵害時，支原體抗體就會出現來消滅支原體，以此來保護我們的身體不受到侵害。但是支原體抗體不是萬能的，如果支原體侵害超過了支原體抗體的治療范圍，人們就會再次發生支原
培養法檢測支原體
培養法最為可靠且成本低廉，但培養周期較長。常用于細胞以及I臨床治療細胞的支原體檢查。1、所需儀器設備及培養基（1）儀器設備：培養箱，顯微鏡。（2）培養基①支原體肉湯培養基。②精氨酸肉湯培養基。③支原體瓊脂培養基。2、檢查方法（1）樣品的貯存：樣品如在24h以內進行支原體檢測，則可貯存在2—8℃；如果
支原體的檢測實驗
相差顯微鏡檢測法 低漲處理地衣紅染色觀察法 熒光染色法 電鏡檢測法 培養檢測法 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
支原體培養的問與答
一、簡介：支原體的大小為 0.1～0.3μm，可通過濾菌器，常給細胞培養工作帶來污染的麻煩。菌落小（直徑 0.1~1.0 mm），在固體培養基表面呈特有的「油煎蛋」狀。無細胞壁，不能維持固定的形態而呈現多形性，對滲透壓敏感，對抑制細胞壁合成的抗生素不敏感。革蘭氏染色不易著色，故常用 Giemsa 染
支原體分型試驗
1、材料Dienes染色液，1.5%毛地黃皂苷液。2、方法（1）Dienes菌落染色：Dienes染色液是將2.5g亞甲藍、1.5g天青II、10g麥芽糖、0.5g碳酸鈉溶于100ml蒸餾水中。染色時直接吸入染色液覆蓋菌落上1min左右，用生理鹽水洗去染色液后，在低倍顯微鏡下可見支原體菌落成藍色，其
支原體的培養技巧
支原體（霉形體）的培養技巧支原體是介于病毒與細菌之間的一類微生物，在自然界廣泛存在，使人和多種動物、植物害病。 它缺乏細胞壁而不同于細菌，能在無細胞培養基生長繁殖，并含有RNA和DNA而有別于病毒。支原體以二分裂方式繁殖，基本形態為圓形、絲狀形，后者易形成分枝狀菌絲，因而得名支原體。其大小介于
支原體常用檢測方法
支原體這種微小的微生物(直徑0.2-0.8 μm)，是細胞培養中令人頭疼的大問題。支原體污染可能來自培養基、血清或實驗操作者，會影響細胞生長率、細胞形態、基因表達、細胞代謝和細胞活力。支原體感染不易察覺，因此對培養細胞定期進行支原體檢測就非常重要。 污染實驗室培養細胞的支原體
支原體陽性嚴重嗎
支原體陽性說明感染了支原體，是否嚴重應該看具體造成的癥狀，支原體感染之后，造成的癥狀有輕有重。肺炎支原體可以造成呼吸道的感染，但大多數是簡單的上呼吸道感染，僅僅有打噴嚏、流鼻涕，并不嚴重；有一些可以造成支氣管炎，出現咳嗽、咳痰，也不是那么嚴重；如果造成了明顯的肺炎，這時候可能比較嚴重。除此之外，像解
PCR法檢測支原體
PCR法是20世紀80年代中期建立起來的一種體外DNA擴增技術，其基本原理是酶促DNA合成反應，即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下，經DNA聚合酶的作用，使DNA 鏈擴增延伸。該方法具有靈敏度高、特異性強、快速的特點，但其對實驗環境的要求嚴格，實驗成本較高，有時還有假陽性的現象出現。1、儀
PCR法檢測支原體
實驗方法原理PCR法的基本原理是酶促DNA合成反應，即在DNA模板、引物和脫氧核糖核酸存在下，經DNA聚合酶的作用，使DNA鏈擴增延伸。實驗材料細胞樣品試劑、試劑盒dNTPTapDNA聚合酶瓊脂糖礦物油支原體檢測試劑盒儀器、耗材超凈工作臺PCR儀電泳儀凝膠成像分析系統臺式離心機旋渦混懸器實驗步驟1.
同樣是細胞被支原體污染，怎么挑選支原體祛除劑
養細胞時，除了支原體的檢測需要定期進行外，支原體的預防和祛除也是一個重要方面。?它包括工作區域中的支原體的預防和祛除和培養箱水槽、水浴鍋中預防支原體的污染。但一旦發生細胞培養時有支原體污染，應如何挑選支原體祛除劑呢？這里指的支原體祛除劑，是加入到細胞培養基中來發揮作用。?德國MB有三種支原體祛除劑，
應對破壞細胞的支原體~qPCR支原體檢測試劑來幫你
織細胞培養工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環境污染；嚴格實驗操作；細胞培養基和器材要保證無菌；在細胞培養基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯合處理。德國MB公司qPCR支原體檢測試，該