MTT(四唑鹽)比色法
MTT比色法 實驗方法原理 活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶于水的藍紫色產物(formazan),并沉淀在細胞中,而死細胞沒有這種功能。二甲亞砜(DMSO)能溶解沉積在細胞中藍紫色結晶物,溶液顏色深淺與所含的formazan量成正比。再用酶標儀測定OD值。 實驗材料 細胞樣品 試劑、試劑盒 PBS DMSO 胰蛋白酶 甘氨酸緩沖液 二甲亞楓 ......閱讀全文
四唑鹽(MTT)比色實驗
MTT法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 活細胞的線粒體中的琥珀脫氫酶能使外源性的MTT還原為難溶性的藍紫色結晶物并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜能溶解細胞中的紫色
四唑鹽(MTT)比色實驗
MTT法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 活細胞的線粒體中的琥珀脫氫酶能使外源性的MTT還原為難溶性的藍紫色結晶物并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜能溶解細胞中的紫色
MTT(四唑鹽)比色法
MTT比色法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶于水的藍紫色產物(formazan),并沉淀在細胞中,而死細胞沒有這種功能。二甲亞砜(DMSO)能溶解沉積在細胞中藍
MTT(四唑鹽)比色法
四唑鹽(MTT)比色法可應用于:(1)檢測細胞存活和生長;(2)大規模的抗腫瘤藥物篩選;(3)細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定;(4)生物活性因子的活性檢測。??實驗方法原理活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶于水的藍紫色產物(formazan),并沉淀在細胞中,而死細胞沒有這種功能。二甲亞砜(DM
四唑鹽(MTT)比色法
四唑鹽(MTT)商品名為噻唑藍操作步驟一、接種細胞1、用胰蛋白酶消化匯合的單層細胞,將細胞收集到含血清的培養基中。 2、離心細胞懸液,使細胞沉積下來。用培養基重懸細胞,計數。 3、將細胞稀釋至2.5×103-50×103 個/ml,每個微滴定板可容納20ml細胞重懸液。 4、用加樣器在平底96
MTT(四唑鹽)比色法
實驗方法原理 MTT法是Mosmann 1983年報道的,以后此方法得到了迅速發展并廣泛應用于臨床與科研研究。其原理是活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶于水的藍紫色產物(formazan),并沉淀在細胞中,而死細胞沒有這種功能。二甲亞砜(DMSO)能溶解沉積在細胞中藍紫色結晶物,溶液顏色深淺
四唑鹽(MTT)比色法
四唑鹽(MTT)比色法僅供參考 MTT常用濃度為5mg/ml;向大家推薦一本書《動物細胞培養--基本技術指南》注:此書中MTT濃度為50mg/ml1、藥物的細胞毒性四唑鹽(MTT)比色法操作步驟接種細胞(1)用胰蛋白酶消化匯合的單層細胞,將細胞收集到含血清的培養基中。(2)離心細胞懸液,使細胞沉積下
四唑鹽(MTT)比色實驗——MTT法
實驗方法原理活細胞的線粒體中的琥珀脫氫酶能使外源性的MTT還原為難溶性的藍紫色結晶物并沉積在細胞中,而死細胞無此功能。二甲基亞砜能溶解細胞中的紫色結晶物,用酶聯免疫檢測儀在490? nm 波長處測定其光吸收值,可間接反映細胞數量。在一定細胞數范圍內,MTT結晶物形成的量與細胞數成正比。?實驗材料細胞
培養細胞的活力測定(四唑鹽比色法)
培養細胞活力測定是腫瘤體外研究中應用最廣的技術手段之一。任何培養瓶內生長的細胞都由死細胞和活細胞組成,從形態上區別死、活細胞是困難的。方法:四唑鹽(MTT)比色法四唑鹽(MTT)商品名為噻唑藍四唑鹽比色法的原理:活細胞中脫氫酶能將四唑鹽還原成不溶干水的藍紫色產物(formazan),并沉淀在細胞中,
什么是“四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT法)”
“四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT法)”,即四甲基偶氮唑鹽微量酶反應比色法。MTT是一種噻唑鹽,化學名3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-二苯基溴化四唑,水溶液為黃橙色。小鼠脾細胞受到ConA作用后發生增殖活化,其胞內線粒體琥珀酸脫氫酶活性相應升高,MTT作為其底物參與反應,形成藍色的甲臜(For
免疫組化技術專題:MTT(四唑鹽比色實驗)大匯總(一)
一、實驗前應明確的問題 1. ?選擇適當的細胞接種濃度。 一般情況下,96孔培養板的一內貼壁細胞長滿時約有105個細胞。但由于不同細胞貼壁后面積差異很大,因此,在進行MTT試驗前,要進行預實驗檢測其貼壁率、倍增時間以及不同接種細胞數條件下的生長曲線,確定試驗中每孔的接種細胞數和培養時間,以保證培養終
免疫組化技術專題:MTT(四唑鹽比色實驗)大匯總(二)
二、實驗步驟 (一)貼壁細胞 1. ?收集對數期細胞,調整細胞懸液濃度,每孔加入100 ul,鋪板使待測細胞調密度至1 000-10 000孔,(邊緣孔用無菌PBS填充)。2. ?5%CO2,37 ℃孵育,至細胞單層鋪滿孔底(96孔平底板),加入濃度梯度的藥物,原則上,細胞貼壁后即可加藥,或兩小時,
單層貼壁細胞細胞毒性試驗四唑鹽(MTT)比色法實戰篇
單層貼壁細胞四唑鹽(MTT)比色法僅供參考 MTT常用濃度為5mg/ml;向大家推薦一本書《動物細胞培養--基本技術指南》注:此書中MTT濃度為50mg/ml1、藥物的細胞毒性四唑鹽(MTT)比色法操作步驟接種細胞(1)用胰蛋白酶消化匯合的單層細胞,將細胞收集到含血清的培養基中。(2)離心細胞懸液,
四唑氮法的定義
中文名稱四唑氮法英文名稱tetrazolium method定 義以四唑鹽作為氧化酶活性的定性標志,在組織切片中顯示酶活性定位的方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
鹽霧試驗箱四種鹽霧試驗原理完全解析
鹽霧試驗箱四種鹽霧試驗原理完全解析 鹽霧試驗箱可以做的試驗有四種:中性鹽霧試驗(NSS)、銅加速乙酸鹽霧試驗(CASS)、交變鹽霧試驗、醋酸鹽霧試驗(ASS試驗)。當然,不同的試驗不光是試驗所需溶液不一樣,就連箱體的設計與結構可能也有所不同。 一、中性鹽霧試驗(NSS)試驗箱
關于頭孢塞肟四唑的簡介
頭孢塞肟四唑為半合成的第三代頭孢霉素。抗菌譜與其它第三代頭孢菌素類似,對革蘭陰性菌有高效,對各種陰性菌產生的β內酰胺酶特別穩定,具有殺菌作用。對大腸桿菌、克雷白桿菌屬、沙雷菌屬、流感桿菌、腸桿菌屬及枸櫞酸桿菌屬等均有效。
硝基藍四氮唑還原試驗的簡介
硝基藍四氮唑還原試驗是對中性粒細胞吞噬力測定。靜脈血4ml,肝素抗凝。NBT實驗主要用于檢測中性粒細胞的胞內殺傷功能。
簡述四唑硝基藍的臨床意義
(1)升高:全身細菌性感染、真菌感染。 (2)≤30%:慢性肉芽腫、先天性丙種球蛋白缺乏癥、系統性紅斑狼瘡(SLE)、應用免疫抑制劑。 (3)
關于頭孢塞肟四唑的藥物概述
頭孢塞肟四唑主要用于各種敏感菌所致的呼吸系、肝膽系統、泌尿生殖系、腹膜等部位的感染,并可用于敗血癥和燒傷、手術后感染。對綠膿桿菌的抗菌活性比頭孢哌酮及頭孢唑肟強,但對鏈球菌屬的抗菌效力不如第一、二代。 臨床上主要用于各種敏感菌所致的敗血癥、燒傷感染、上呼吸道感染、肺炎、膽囊炎、膽管炎、腹膜
四唑氮法方法的特點及應用
中文名稱四唑氮法英文名稱tetrazolium method定 義以四唑鹽作為氧化酶活性的定性標志,在組織切片中顯示酶活性定位的方法。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞生物學技術(二級學科)
氯化三苯四氮唑的基本介紹
氯化三苯四氮唑又稱2,3,5-氯化三苯基四氮唑、四唑紅,簡稱TTC,TTZ,或TPTZ,一種脂溶性光敏感復合物,即可用來檢測種子的生存能力,也可用來檢測哺乳動物組織的缺血梗塞。檢測機制在于TTC本身可作為一種氧化還原指示劑,活細胞內的脫氫酶(尤其是線粒體內的琥珀酸脫氫酶)可以將TTC還原。對于種
硝基藍四氮唑還原試驗的方法
硝基藍四氮唑還原試驗將終濃度2和5μmol/L青蒿素處理的U937細胞培養1~5d.收集細胞,以不含血清的RPMI1460洗滌離心,棄上清,每管加入0.5mL的1g/LNBT溶液和0.1mLTPA溶液,搖勻,37℃反應30~60min.吸取少量細胞懸液,涂片,空氣干燥,常規WrightGiems
簡述頭孢塞肟四唑的藥理作用
頭孢塞肟四唑對需氧的革蘭陽性菌以至厭氧的革蘭陰性菌都有廣譜抗菌作用。由于頭孢塞肟四唑抑制頭孢結合蛋白,對革蘭陽性菌有殺菌作用,對革蘭陰性菌可抑制其細胞壁的合成而產生抗菌作用。頭孢塞肟四唑代謝物的抗菌力只為本品的1/16~1/128,非常弱。
關于頭孢羥芐四唑甲酸酯的簡介
頭孢羥芐四唑甲酸酯是一種藥品。 本品為一種半合成第二代頭孢菌素。對金葡菌、鏈球菌、腦膜炎球菌、流感桿菌、克雷白桿菌、大腸桿菌、奇異變形桿菌、沙門菌、志賀菌等有高度抗菌作用。本品可對抗β-內酰胺酶,對耐青霉素的金葡菌有效。臨床主要用于敏感菌所致的呼吸道感染、腎盂腎炎、尿路感染及骨、關節、耳鼻咽喉
關于四唑硝基藍的基本信息介紹
又稱為硝基藍四唑, 氯化硝基四氮唑藍· 英文名:Tetranitroblue tetrazolium chloride(NBT).別名 3,3'-(3,3'-Dimethoxy[1,1'-biphenyl]-4,4'-diyl)bis[2,5-bis(p-nitr
氯化三苯四氮唑的生產方法介紹
1、合成苯腙:苯肼溶于95%乙醇中,加入苯甲醛水浴回流1h即得苯腙。 2、偶合:將苯腙溶于吡啶中,與苯胺重氮鹽偶合。 3、合成2 -3-5 -三苯基氯化四氮唑:將上述偶合物溶于甲醇中加入亞硝酸異戊酯,然后慢慢加入通過鹽酸氣的甲醇溶液,加完放置3~4h,再通鹽酸氣20min狀,水浴加熱片刻,加
關于硝基藍四氮唑還原試驗的簡介
硝基藍四氮唑還原試驗是對中性粒細胞吞噬力測定。靜脈血4ml,肝素抗凝。NBT實驗主要用于檢測中性粒細胞的胞內殺傷功能。 正常參考值: 白細胞吞噬細菌百分率62~76% 吞噬指數132~172%
氯化三苯基四氮唑法測定根系活力
一、原理氯化三苯基四氮唑(TTC)是標準氧化還原電位為80mV的氧化還原物質,溶于水中成為無色溶液,但還原后即生成紅色而不溶于水的三苯基甲 ?(TTF),如下式: 生成的TTF比較穩定,不會被空氣中的氧自動氧化,所以TTC被廣泛地用作酶試驗的氫受體,植物根所引起的TTC還原,可因加入琥珀酸、延胡索酸
硝基四唑氮藍試驗的臨床意義
NBT低值見于慢性肉芽腫、先天性丙球缺乏癥、紅斑狼瘡以及使用免疫抑制劑等。此法還可用于區別細菌與病毒感染。如為病毒感染時,雖有發熱,但NBT仍正常;只有細菌、真菌感染時,NBT陽性細胞增加。NBT試驗還可用于器官移植后發熱反應的鑒別診斷。如因細菌感染而發熱,NBT值升高;但如因體內非特異性反應而
硝基藍四氮唑還原試驗的異常結果分析
升高:常見于細菌性感染,如敗血癥,化膿性關節炎,骨髓炎,細菌性腦膜炎等。而病毒性感染、器官移植后排斥反應引起的發熱則不升高。 降低:主要用于診斷中性粒細胞缺陷病,如兒童慢性肉芽腫,髓性過氧化物酶缺乏癥等。