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    影響毛細管區帶電泳色譜儀分離的操作條件

    影響毛細管區帶電泳色譜儀分離的操作條件有緩沖液、添加劑、分離電壓和分離溫度等。一、緩沖液:CZE分離過程在緩沖液中進行,緩沖液的選擇直接影響粒子的遷移和分離。配制緩沖液時,必須使用高純蒸餾水和試劑。使用前要用0.45μm濾膜過濾以除去顆粒等。1、緩沖液的選擇須遵循的要求:(1)在所選擇的pH范圍內有很好的緩沖容量。(2)在檢測波長處無吸收或吸收值低。(3)為達到有效的進樣和合適的電泳淌度,緩沖液pH值至少與被測組分的等電點相差l個pH單位。(4)自身淌度低,即分子大而荷電小,以減少電流的產生。(5)只要條件允許,盡可能采用酸性緩沖液。在低pH值下,吸附和電滲流都很小,毛細管涂層的壽命較長。(6)與毛細管種類匹配,涂層毛細管只能在一定pH范圍內使用。2、常用緩沖液:常用緩沖液有硼砂、磷酸鹽、檸檬酸鹽、琥珀酸鹽和醋酸鹽等。3、緩沖液pH值:(1)緩沖液pH值的選擇與樣品性質有關。1)通常酸性組分選擇在堿性條件下分離。2)通常堿性組......閱讀全文

    電泳技術

    電泳法,是指帶電荷的供試品(蛋白質、核苷酸等)在惰性支持介質(如紙、醋酸纖維素、瓊脂糖凝膠、聚丙烯酰胺凝膠等)中,于電場的作用下,向其對應的電極方向按各自的速度進行泳動,使組分分離成狹窄的區帶,用適宜的檢測方法記錄其電泳區帶圖譜或計算其百分含量的方法。    電泳技術的

    電泳分析常用方法

    (一)醋酸纖維素薄膜電泳 醋酸纖維素是提纖維素的羥基乙酰化形成的纖維素醋酸酯。由該物質制成的薄膜稱為醋酸纖維素薄 膜。這種薄膜對蛋白質樣品吸附性小,幾乎能完全消除紙電泳中出現的“拖尾”現象,又因為膜的親水性比較小,它所容納的緩沖液也少,電泳時電流的大部分由樣 品傳導,所以分離速度快,電泳時間短,樣品

    毛細管區帶電泳色譜儀分析技術

    毛細管區帶電泳色譜儀(CZE)又稱自由溶液區帶電泳儀,整個系統采用同一種緩沖液充滿,以毛細管為分離通道,以高壓直流電場為驅動力,利用荷電粒子之間的淌度差異進行分離。一、工作原理: CZE中,粒子的電荷性質不同,電泳方向不同;粒子的電荷數量不同,電泳速度不同;粒子的分子量不同,電泳速度不同

    全國生物醫藥色譜會分會報告集錦(一)

      2012年4月21日下午,全國生物醫藥色譜及相關技術學術交流會各分會在美麗的重慶大學虎溪校區陸續展開。以下是“生化與醫藥分會”的精彩內容,來自各著名高校、研究院所的專家、老師,就色譜新技術、新觀念以及在藥品、蛋白質、天然產物等分析、分離方面的應用進行了深入的交流。分

    影響毛細管電泳色譜儀譜峰展寬的因素

    影響毛細管電泳色譜儀(CE)譜峰展寬的因素有進樣、縱向擴散、焦耳熱、吸附、電分散和層流等。一、進樣:當進樣塞長度太大時,引起的譜峰展寬大于縱向擴散,分離效率會明顯下降。實際操作時,進樣塞長度小于毛細管總長度的1%~2%。二、縱向擴散:擴散是物質分子由高濃度區域自發遷移到低濃度區域的過程。在理想的情況

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