高效液相色譜法的定義、類型流程
在所有色譜技術中，液相色譜法（liquidchromatography，LC）是最早（1903年）發明的，但其初期發展比較慢，在液相色譜普及之前，紙色譜法、氣相色譜法和薄層色譜法是色譜分析法的主流。 到了20世紀60年代后期，將已經發展得比較成熟的氣相色譜的理論與技術應用到液相色譜上來，使液相色譜得到了迅速的發展。特別是填料制備技術、檢測技術和高壓輸液泵性能的不斷改進，使液相色譜分析實現了高效化和高速化。具有這些優良性能的液相色譜儀于1969年商品化。從此，這種分離效率高、分析速度快的液相色譜就被稱為高效液相色譜法，也稱高壓液相色譜法或高速液相色譜法。 氣相色譜只適合分析較易揮發、且化學性質穩定的有機化合物，而HPLC則適合于分析那些用氣相色譜難以分析的物質，如揮發性差、極性強、具有生物活性、熱穩定性差的物質。現在，HPLC的應用范圍已經遠遠超過氣相色譜，位居色譜法之首。 高效液相色譜的類型廣義地講，固定相為......閱讀全文
高效液相色譜法的原理
高效液相色譜法的原理是以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離后，進入檢測器進行檢測。高效液相色譜法有“四高一廣”的特點：①高壓：流動相為液體，流經色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載
高效液相色譜法的原理
高效液相色譜法的原理是以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離后，進入檢測器進行檢測。高效液相色譜法有“四高一廣”的特點：①高壓：流動相為液體，流經色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載
高效液相色譜法的簡介
高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶
高效液相色譜法（二）
二、進樣 器一般HPLC分析常用六通進樣閥（以美國RHEODYNE公司的7725和7725I型最常見），其關鍵部件由圓形密封墊子（轉子）和固定底座（定子） 組成。耐高壓（35～40MPA），進樣量準確，重復性好（0.5％），操作方便。六通閥進樣方式有部分裝液法和完全裝液法兩種。①用部分裝
高效液相色譜法（四）
四、檢測器HPLC的檢測器分為兩類：通用型檢測器和專用型檢測器。1．通用型檢測器可連續測量 色譜柱的流出物的全部特性變化，通常采用差分測量法，這類檢測器包括示差折光檢測器、介電常數檢測器、電導檢測器等，通用檢測器適用范圍廣，但由于對流動 相有響應，因此易受溫度變化、流動相和組分的變化的影響，
高效液相色譜法簡介
以高壓液體為流動相的液相色譜分析法稱高效液相色譜法（HPLC）。其基本方法是用高壓泵將具有一定極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑泵入裝有填充劑的色譜柱，經進樣閥注入的樣品被流動相帶入色譜柱內進行分離后依次進入檢測器，由記錄儀、積分儀或數據處理系統記錄色信號或進行數據處理而得到分析結果。由于高效液相色
高效液相色譜法特點
高效液相色譜法有“四高一廣”的特點： ①高壓：流動相為液體，流經色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱醫學教育|網，必須對載液加高壓。 ②高速：分析速度快、載液流速快，較經典液體色譜法速度快得多，通常分析一個樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內即可完成，一般小于1小時。 ③高效
高效液相色譜法概述
? 高效液相色譜法（highperformanc，liquidchromatography，HPLC）是在經典液相色譜法基礎上發展起來的一種新型分離、分析技術。經典液相色譜法由于使用粗顆粒的固定相，填充不均勻，依靠重力使流動相流動，因此分析速度慢，分離效率低。新型高效的固定相、高壓輸液泵、梯度洗脫技
高效液相色譜法（三）
三、色譜柱色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心臟。對色譜柱的要求是柱效高、選擇性好，分析速度 快等。市售的用于HPLC的各種微粒填料好多孔硅膠以及以硅膠為基質的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球（包括離子交換樹脂）、多孔碳等，其粒度一般為 3，5，7，10U
高效液相色譜法（一）
高效液相色譜法（HPLC）是目前應用廣泛的分離、分析、純化有機化合物（包括能通過化學反應轉變為有機化合物的無機物）的有效方法之一。 ? 在已知的有機化合物中，約有80%能用高效液相色譜法分離、分析，而且由于此法條件溫和，不破壞樣品，因此特別適合高沸點、難氣化揮發、熱穩定性差的有機 化合物和
高效液相色譜法依據
高效液相色譜法是在經典色譜法的基礎上，引用了氣相色譜的理論，在技術上，流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成，從而使柱效大大高于經典液相色譜(每米塔板數可達幾萬或幾十萬);同時柱后連有高靈敏度的檢測器，可對流出物進行連續檢測。一、特點：1.
高效液相色譜法分類
高效液相色譜法按分離機制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法(正相與反相)、離子交換色譜法、離子對色譜法及分子排阻色譜法。1. 液固色譜法使用固體吸附劑，被分離組分在色譜柱上分離原理是根據固定相對組分吸附力大小不同而分離。分離過程是一個吸附——解吸附的平衡過程。常用的吸附劑為硅膠或氧化鋁，粒度5
手性高效液相色譜法
手性高效液相色譜法分為直接法和間接法。對映體（enantiomer）：在空間上不能重疊，互為鏡像關系的立體異構體。立體異構體指分子中的結構基團在空間三維排列不同的化合物。手性藥物（chiral,drug）：含有手性中心的藥物。手性中心即為化合物中某個碳原子上連接4個互不相同的基團時，稱該碳原子被稱為
高效液相色譜法詞匯
? 高效液相色譜法：high performance liquid chromatography，HPLC 高速液相色譜法：high speed LC，HSLC 高壓液相色譜法：high pressure LC，HPLC 高分辨液相色譜法：high resolution LC
手性高效液相色譜法
手性高效液相色譜法分為直接法和間接法。對映體（enantiomer）：在空間上不能重疊，互為鏡像關系的立體異構體。立體異構體指分子中的結構基團在空間三維排列不同的化合物。手性藥物（chiral,drug）：含有手性中心的藥物。手性中心即為化合物中某個碳原子上連接4個互不相同的基團時，稱該碳原子被稱為
高效液相色譜法與經典液相色譜法的區別
高效液相色譜法包括正相高效液相色譜法和反相高效液相色譜法.正相高效液相色譜法中流動相的極性小于固定相的極性,也就是以及性鍵合相為固定相（常以氨基、氰基鍵合相等作為固定相）.反相高效液相色譜法中流動相的極性大于固定相的極性,也就是以非極性鍵合相為固定相（常以十八硅烷C18、辛烷C8、甲基C1、苯基等作
高效液相色譜法的研究歷史
1903年俄國植物化學家茨維特（Tswett）首次提出“色譜法”（Chromatography）和“色譜圖”（Chromatogram）的概念。茨維特使用色譜法 chromatography （來自希臘字， chroma 意思是顏色， graphy 意思是記錄 - 直譯為顏色記錄）來描述他的彩色試驗
高效液相色譜法的優缺點
優點：分離效率高，選擇性好，檢測靈敏度高，操作自動化，應用范圍廣；與氣相色譜法相比具有的優點：不受試樣的揮發性和熱穩定性限制，應用范圍廣；流動相種類多，可通過流動相的優化達到高的分離效率；一般在啊室溫下分析即可，不需高柱溫。缺點：分析成本高，液相色譜儀價格及日常維護費用貴，分析時間一般比氣相長。
高效液相色譜法的優缺點
優點：分離效率高，選擇性好，檢測靈敏度高，操作自動化，應用范圍廣；與氣相色譜法相比具有的優點：不受試樣的揮發性和熱穩定性限制，應用范圍廣；流動相種類多，可通過流動相的優化達到高的分離效率；一般在啊室溫下分析即可，不需高柱溫。缺點：分析成本高，液相色譜儀價格及日常維護費用貴，分析時間一般比氣相長。
高效液相色譜法的相關敘述
高效液相色譜法(HPLC)是上個世紀七十年代迅速發展起來的一項高效、快速的分析分離技術，是現代分離測試的重要手段。色譜法的分離原理是：溶于流動相(mobile phase)中的各組分經過固定相時，由于與固定相(station phase)發生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強弱不同，在固定
高效液相色譜法的應用簡介
1.在環境分析中的應用：可用于環芳烴(PAHs)、農藥殘留分析等。 2.在食品分析中的應用：可用于食品營養分析、食品添加劑分析、食品污染物分析等。 3.在生命科學中的應用：生命科學、遺傳工程、臨床化學、分子生物學和生物化學中分子量物質的純化、分離和測定可以從分子水平上進行研究。 4.在醫學
高效液相色譜法定性的參數
1.儀器工作條件環境溫度:5-35℃相對濕度:20%-80%2.儀器外觀儀器表面應光潔平整、字跡清晰,表面涂覆色澤均勻,不應有明顯劃傷、露底、裂紋、氣泡等現象。各調節旋鈕、按鍵、開關等工作正常,無松動;指示、顯示清晰完整。
關于高效液相色譜法的簡介
高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混
高效液相色譜法的組成結構
可分為“高壓輸液泵”、“色譜柱”、“進樣器”、“檢測器”、“餾分收集器”以及“數據獲取與處理系統”等部分。
高效液相色譜法的技術動態
液相色譜和質譜連接，可以增加額外的分析能力，能夠準確鑒定和定量像細胞和組織裂解液，血液，血漿，尿液和口腔液等復雜樣品基質中的微量化合物。高效液相色譜質譜系統（ABSciex Eksigent LC / MS和LC / MS / MS）提供了一些獨特的優勢，包括：快速分析和流轉所需的最少樣品準備高靈敏
潑尼松的測定—高效液相色譜法
方法名稱潑尼松的測定—高效液相色譜法應用范圍該方法采用高效液相色譜法測定潑尼松的含量。該方法適用潑尼松。方法原理供試品和內標均制成甲醇溶液，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處檢測潑尼松（C21H26O5）和內標乙酰苯胺的吸收值，計算出其含量。試劑1、甲醇2、水3、四
高效液相色譜法的工作原理
流動相通過高壓泵進入系統，樣品溶液通過注射器進入流動相，流動相加載到色譜柱(固定相)中。由于樣品溶液中各組分在兩相中的分配系數不同，經過兩相反復吸附-解吸分配后，各組分的運動速度有很大的不同。它被分離成一個單獨的組件，然后依次從列中流出。當樣品濃度通過檢測器時，樣品濃度被轉換成電信號并傳送給記錄
高效液相色譜法的主要優點
高效液相色譜法的主要優點是：? ? ? ??⑴分辯率高于其它色譜法；⑵速度快，十幾分鐘到幾十分鐘可完成；⑶重復性高；⑷高效相色譜柱可反復使用；⑸自動化操作，分析精確度高。
高效液相色譜法的技術特點
高效液相色譜法有“四高一廣”的特點：①高壓：流動相為液體，流經色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載液加高壓。②高速：分析速度快、載液流速快，較經典液體色譜法速度快得多，通常分析一個樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內即可完成，一般小于1小時。③高效：分離效能高。可選擇固定
高效液相色譜法的歷史發展
高效液相色譜法自20世紀60年代問世以來，由于使用了高壓輸液泵、全多孔微粒填充柱和高靈敏度檢測器，實現了對樣品的高速、高效和高靈敏度的分離測定。高效液相色譜由于吸取了經典液相色譜的研制經驗，并引入微處理機技術，極大的提高了儀器的自動化水平和分析精度。現在用微處理機控制的高效液相色譜儀，其自動化程