高壓液相色譜簡述
Martin 和Synge在1941年就提出高效相色譜的設想,然而直到六十年代后期,由于各種技術的發展,高效液相色譜才付諸實現。這種色譜技術曾被稱為高速液相色譜(HighSpeed Liquid Chromatography),高壓液相色譜(High Parss-ure Lipuid Chromatography),目前使用最多的名稱是高效液相色譜(High Pe-rformance Liauid Chromatography,HPLC)。高效液相色譜已經廣泛地應用,成為一項不可缺少的技術。它的主要優點是⑴分辯率高于其它色譜法;⑵速度快,十幾分鐘到幾十分鐘可完成;⑶重復性高;⑷高效相色譜柱可反復使用;⑸自動化操作,分析精確度高。根據分離過程中溶質分子與固定相相互作用的差別,高效液相色譜可分為四個基本類型,即液-固色譜、液-液色譜、離子交換色譜和體積排阻色譜。高效液相色譜在生物領域中廣泛用于下列產物的分離和鑒定:⑴......閱讀全文
高壓液相色譜簡述
Martin 和Synge在1941年就提出高效相色譜的設想,然而直到六十年代后期,由于各種技術的發展,高效液相色譜才付諸實現。這種色譜技術曾被稱為高速液相色譜(HighSpeed Liquid Chromatography),高壓液相色譜(High Parss-ure Lipuid C
高壓液相色譜
Martin 和 Synge在1941年就提出高效相色譜的設想,然而直到六十年代后期,由于各種技術的發展,高效液相色譜才付諸實現。這種色譜技術曾被稱為高速液相色譜(HighSpeed Liquid Chromatography),高壓液相色譜(High Parss-ure Lipuid Chroma
簡述高壓或中壓制備型液相色譜流速
方法的檢出限和定量限是有區別的 3倍信噪比是檢出限 10倍信噪比是定量限 可以簡單的這樣來理解,檢出限是方法能測出該物質時的最低濃度。定量限是方法能準確定量出該物質時最低的濃度。
高壓液相色譜淋洗劑
?高壓液相色譜淋洗劑高壓液相色譜淋洗劑又稱流動相或洗脫劑,是高壓液相色譜分析中必不可少的試劑,其作用有兩個,一是攜帶樣品前進,二是給分析樣品提供一個分配相,進而調節選擇性,達到混合樣品的分離。高壓液相色譜法根據固定相的類型和分離原理可分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法、離子交換色譜法、凝膠滲透色譜法
高壓液相色譜淋洗劑
高壓液相色譜淋洗劑高壓液相色譜淋洗劑又稱流動相或洗脫劑,是高壓液相色譜分析中必不可少的試劑,其作用有兩個,一是攜帶樣品前進,二是給分析樣品提供一個分配相,進而調節選擇性,達到混合樣品的分離。高壓液相色譜法根據固定相的類型和分離原理可分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法、離子交換色譜法、凝膠滲透色譜法、
高壓液相色譜的概念
高壓液相色譜又叫高效液相色譜(High Performance Liquid Chromatography,HPLC),是利用更細的高效填料進行分離的,具有高柱效、高流速、分離時間短的特點。與經典液相色譜相比,高效液相色譜有很大不同,表1列出了一些不同之處。
高壓液相色譜特點簡介
高壓 液相色譜法以液體為流動相(稱為載液),液體流經色譜柱,受到阻力較大,為了迅速地通過色譜柱,必須對載液施加高壓。一般可達150~350×105Pa。 高速 流動相在柱內的流速較經典色譜快得多,一般可達1~10ml/min。高效液相色譜法所需的分析時間較之經典液相色譜法少得多,一般少于1
液相色譜高壓輸液系統結構
高壓輸液系統由溶劑貯存器、高壓泵、梯度洗脫裝置和壓力表等組成。
高壓液相制備色譜儀
高壓液相制備色譜儀是一種用于中醫學與中藥學、產品應用相關工程與技術領域的分析儀器,于2016年11月21日啟用。 技術指標 Waters 2545 Binary Gradient Module,二元梯度制備泵。 主要功能 對液體中的成分進行定性定量分析,同時可對復雜相中的各種成分,特別是
高壓液相色譜常見問題
(一)渦流擴散(Eddy diffusion)流動相碰到較大的固體顆粒,就像流水碰到石頭一樣產生渦流。如果柱裝填得不均勻,有的部分松散或有細溝,則流動相的速度就快;有的部位結塊或裝直緊密則流就慢,多條流路有快有慢,就使區帶變寬。因此,固相載體的顆粒要小而均勻,裝柱要松緊均一,這樣渦流擴散小,
簡述液相色譜理論
液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相,稱為經典液相色譜法,此方法柱效低、時間長(常有幾個小時)。高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在經典液相色譜法的基礎上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而
色譜分析技術:高壓液相色譜
一、分類高效液相色譜法可分為四個基本類型:即液-固色譜法,鍵合相色譜法,離子交換色譜法及體積排阻色譜法。(一)液-固色譜法液-固色譜法通常稱吸附色譜法,吸附劑有活性碳,氧化鋁和硅膠,在液-固色譜法中用的載體都是硅膠。硅膠對溶質,分子的吸附能力不是平均分布在整個硅脫表面的,在硅膠表面有一些區域與溶質分
高壓液相色譜(HPLC)系統組成(二)
四、檢測器?? ??檢測器是HPLC儀的三大關鍵部件之一。其作用是把洗脫液中組分的量轉變為電信號。HPLC的檢測器要求靈敏度高、噪音低(即對溫度、流量等外界變化不敏感)、線性范圍寬、重復性好和適用范圍廣。?1.分類?1)按原理可分為光學檢測器(如紫外、熒光、示差折光、蒸發光散射)、熱學檢測器(如吸附
高壓液相色譜淋洗劑的作用
高壓液相色譜淋洗劑高壓液相色譜淋洗劑又稱流動相或洗脫劑,是高壓液相色譜分析中必不可少的試劑,其作用有兩個,一是攜帶樣品前進,二是給分析樣品提供一個分配相,進而調節選擇性,達到混合樣品的分離。
高壓液相色譜的操作注意要點
1)首先對流動相進行過濾,根據需要選擇不同的濾膜,一般為有機系和水系,常用的孔徑為0.20um和0.45um。 2)對抽濾后的流動相進行超聲脫氣10-20分鐘。 3)正常情況下,儀器首先用甲醇沖洗10-20分鐘,然后再進入測試用流動相(如流動相為緩沖試劑,則要二次重蒸水沖洗10-20分鐘,直
高壓液相色譜的特點有哪些?
1、高壓:液相色譜法以液體為流動相(稱為載液),液體流經色譜柱,受到阻力較大,為了迅速地通過色譜柱,必須對載液施加高壓。一般可達150~3.5萬KPa。 2、高速:流動相在柱內的流速較經典色譜快得多,一般可達1~10ml/min。高效液相色譜法所需的分析時間較之經典液相色譜法少得多,一般少于
高壓液相色譜(HPLC)系統組成(一)
?HPLC系統一般由??輸液泵、進樣器、色譜柱、檢測器、數據記錄及處理裝置?等組成。其中輸液泵、色譜柱、檢測器是關鍵部件。有的儀器還有梯度洗脫裝置、在線脫氣機、自動進樣器、預柱或保護柱、柱溫控制器等,現代HPLC儀還有微機控制系統,進行自動化儀器控制和數據處理。制備型HPLC儀還備有自動餾分收集裝置
高壓液相色譜出峰太早好嗎
液相色譜儀了峰早當然好了,如果峰型正常,分離效果好,當然是分析時間越短越好。兩個前提是必須的:分離效果正常,峰型對稱。液相色譜儀的目的就是分離樣品進行分析,只要不影響分析結果,出峰越早越好。
色譜柱在高壓液相色譜中的應用
摘要:科學技術的發展,使得色譜技術也得到進一步的發展,不斷有新的聯用的技術得到應用。生物醫學的發展,也不斷要求高靈敏和高選擇性的方法對研究的對象進行定性和定量的研究。 關鍵詞:色譜柱 維護與保養 高壓液相色譜 應用 0 引言 色譜作為一種分離技術與方法,自本世紀初起已經有100多年
色譜柱在高壓液相色譜中的應用
色譜柱的維護與保養在高壓液相色譜中的應用 高效液相色譜(HPLC)是20世紀60年代后期發展起來的分離分析技術,是現代分離測定的重要手段。問世以來,因其具有分離效能高、分析速度快、檢測靈敏度好、能分析高沸點但不能氣化的熱不穩定生理活性物質的特點而被廣泛應用于生物化學、藥物及臨床分析。高效液相色譜柱
簡述液相色譜發展歷史
液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相,稱為經典液相色譜法,此方法柱效低、時間長(常有幾個小時)。高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在經典液相色譜法的基礎上,于60年代后期引入了氣相色譜理論而
高壓液相色譜淋洗劑的相關介紹
高壓液相色譜淋洗劑又稱流動相或洗脫劑,是高壓液相色譜分析中必不可少的試劑,其作用有兩個,一是攜帶樣品前進,二是給分析樣品提供一個分配相,進而調節選擇性,達到混合樣品的分離。高壓液相色譜法根據固定相的類型和分離原理可分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法、離子交換色譜法、凝膠滲透色譜法、親和色譜法等幾
高壓液相色譜操作的注意事項
1)流動相均需色譜純度,水用20M的去離子水。脫氣后的流動相要小心振動盡量不引起氣泡。 2)柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要讓液體過柱子。 3)所有過柱子的液體均需嚴格的過濾。 4)壓力不能太大,最好不要超過150kgf/cm2 . 5)因為緩沖試劑遇有機溶劑,會結晶,有損色譜柱
什么是高壓液相色譜分析?
高壓液相色譜又稱“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高壓液相色譜是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離后,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。該方
高壓快速液相制備色譜儀概述
高壓快速液相制備色譜儀是一種用于化學領域的分析儀器,于2017年6月23日啟用。 技術指標 泵流量范圍:1-250ml/min;泵最大壓力:250bar(3625psi); 四元梯度泵:實現四元梯度洗脫;檢測器波長范圍:200-600nm,支持雙波長同時顯示,支持全波長掃描;UV顯示范圍:0
高效液相色譜鍵合相色譜法簡述
鍵合相色譜法是由液-液色譜法即分配色譜發展起來的。鍵合相色譜法將固定相共價結合在載體顆粒上,克服了分配色譜中由于固定相在流動中有微量溶解,及流動相通過色譜柱時的機械沖擊,固定相不斷損失,色譜柱的性質逐漸改變等缺點。鍵合相色譜法可分為正常相色譜法和反相色譜法。正常相色譜法在正常相色譜法中共價結合到載體
液相色譜柱制備工藝簡述
液相色譜柱制備工藝簡述不同品牌色譜柱制備工藝各異,但都可歸納為如下流程(以硅膠柱為例):硅烷化硅膠制備(四乙氧基硅烷脫乙基與聚合)→Si-OH 基暴露( 脫乙基,置換成H)→海綿狀多孔硅膠構造(物理勻質過程)→官能團鍵合(各種官能團與Si-OH鍵合)→端基封口(對殘余的Si-OH用小分子的氯-甲基、
蛋白分離色譜與高壓制備液相色譜異同討論
蛋白分離色譜與高壓制備液相色譜異同討論快速蛋白液相色譜(FPLC)、中壓液相色譜(MPLC)、低壓液相色譜(LPLC)是近年來從HPLC基礎上發展的新型色譜技術,其中FPLC能以極快的速度把復雜混合物分離,可在短時間內大量純化樣品,具有柱容量大、回收效率高及生物大分子不易失活等特性,在生命科學研究及
變性-高壓液相色譜分析的介紹
變性 -高壓液相色譜(denaturing high -performance liquid chromatography,DHPLC) 是利用DNA構型改變檢測基因突變和遺傳多態性的方法之一,其可以檢測單核苷酸多態和可遺傳的突變。實驗主要過程包括PCR 擴增待測和正常DNA樣品,將擴增產物變性
高壓液相色譜系統的技術指標
高壓液相色譜系統是一種用于環境科學技術及資源科學技術領域的分析儀器,于2015年12月02日啟用。 技術指標 流速范圍 0.01~100ml/min 流速精度 ±0.5% 壓力范圍 0~300bar 最小梯度調節 0.10% 多波長在線掃描 200~800nm全程掃描,CCD陣列檢測器 電導