自噬雙標腺相關病毒說明（一）
一．關于自噬及LC31. 自噬大自噬（macroautophagy），也就是通常說的自噬（autophagy），是真核細胞蛋白降解的途徑之一。自噬可以被描述為細胞質內的成分（細胞器、蛋白等）被雙層膜的囊泡包裹，形成自噬體（autophagosome），進而傳遞到溶酶體進行降解的過程。詳細來說，自噬過程與內涵體途徑（endolysosomal pathway）密不可分（見圖1）。一方面，自噬體能夠與晚期內體（late endosome）融合形成中間囊泡（amphisome）最終形成自噬溶酶體（autolysosome）；另一方面，自噬體能夠直接與溶酶體（lysosome）融合形成自噬溶酶體。無論通過哪條途徑，自噬溶酶體最終通過酸性水解酶將細胞器、蛋白等消化分解。細胞本底水平的自噬發生在營養充足的條件下，可保護細胞免受錯誤折疊蛋白或受損細胞器的影響，從而防止某些疾病的發生（如神經退行性疾病和癌癥）。饑餓等也可誘導自噬的發生，通過降解......閱讀全文
自噬雙標腺相關病毒說明（一）
一．關于自噬及LC31. 自噬大自噬（macroautophagy），也就是通常說的自噬（autophagy），是真核細胞蛋白降解的途徑之一。自噬可以被描述為細胞質內的成分（細胞器、蛋白等）被雙層膜的囊泡包裹，形成自噬體（autophagosome），進而傳遞到溶酶體進行降解的過程。詳細來說，自噬過
自噬雙標腺相關病毒說明（二）
(Tom Egil Hansen and Terje Johansen，BMC Biology，2011)?圖4?Vigene自噬雙標病毒載體圖譜五．Vigene?mCherry-GFP-LC3B?自噬雙標操作方法（一）體外實驗以2型AAV病毒為例，Vigene為您推薦的MOI值104-105，是根
重組系統腺相關病毒產品說明
一．Cre-loxP重組系統作用原理Cre重組酶和loxP位點Cre重組酶（Cyclization Recombination Enzyme）由大腸桿菌噬菌體P1的Cre基因編碼，是由343個氨基酸組成的38kD的蛋白質。它不僅具有催化活性，而且與限制酶相似，能夠特異性識別loxP位點。LoxP（l
自噬信號通路相關--MTOR
雷帕霉素（mTOR）的哺乳動物靶標，也稱為雷帕霉素和FK506結合蛋白12-雷帕霉素相關蛋白1（FRAP1）的機制靶標，是人類中由MTOR基因編碼的激酶。 mTOR是蛋白激酶的磷脂酰肌醇3-激酶相關激酶家族的成員。 mTOR與其他蛋白質結合，并作為兩種不同蛋白質復合物的核心成分，mTOR復合物1和m
自噬信號通路相關--MYCN
這個基因是myc家族的一員，編碼一個具有基本螺旋-環-螺旋（bhlh）結構域的蛋白質。這種蛋白位于細胞核內，必須與另一種bhlh蛋白二聚以結合DNA。這種基因的擴增與多種腫瘤有關，尤其是神經母細胞瘤。該基因有多種編碼不同亞型的選擇性剪接轉錄變體。This gene is a member of th
病毒包裝技術——腺相關病毒(AAV)包裝（一）
摘要:腺相關病毒(AAV)是一種人細小病毒，?因為能作為一種基因治療載體而受到廣泛關注。目前大多數生成rAAV的實驗方案需要共轉染一個載體質粒和一個表達病毒復制和結構基因的包裝質粒到腺病毒(Ad)感染的培養細胞中。但是也可以通過新的輔助質粒(pH3和pH5)，排除了Ad共轉染的需求。輔助質粒表達AA
細胞自噬研究詳解（二）
4、自噬流檢測方法細胞經自噬誘導或抑制后，需對自噬流的水平進行觀察和檢測，常用的技術手段見表1： 表1?自噬體計數及自噬流檢測方法匯總（Mizushima et al, Cell, 2010）其中，電鏡觀察法由于受到實驗條件和設備的限制應用范圍有限；而由于自噬過程發生快速，通過IB/WB檢測LC3-
細胞自噬研究詳解（一）
一、自噬簡介1、大自噬（macroautophagy），也就是通常說的自噬（autophagy），是真核細胞蛋白降解的途徑之一。自噬可以被描述為細胞質內的成分（細胞器、蛋白等）被雙層膜的囊泡包裹，形成自噬體（autophagosome），進而傳遞到溶酶體進行降解的過程。詳細來說，自噬過程與內涵體途徑
自噬受體蛋白招募自噬起始相關ULK復合物分子機制
Nat Comm 細胞自噬（Autophagy）是真核細胞中一種高度受調控的、溶酶體依賴的細胞代謝過程，對于維持細胞內穩態以及促進細胞的生長、發育和存活具有至關重要的作用。選擇性自噬通過自噬受體蛋白來特異性地識別和降解特定的底物，包括蛋白聚集體、受損線粒體、外源性的入侵病原體等。選擇性自噬在眾
自噬體的自噬發生條件
自噬體（autophgosome）自噬溶酶體（autolysosome）當自噬體與溶酶體融合后，形成自噬溶酶體。自噬性溶酶體是一種自體吞噬泡, 作用底物是內源性的,即細胞內的蛻變、破損的某些細胞器或局部細胞質。這種溶酶體廣泛存在于正常的細胞內，在細胞內起“清道夫”作用，作為細胞內細胞器和其它結構自然