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簡介VSV-G-假型自我滅活慢病毒載體是不可或缺的生物實驗工具之一，與之前的γ-逆轉錄病毒載體不同的是，慢病毒載體可轉導非分裂細胞，并可攜帶更多的轉基因盒，在細胞中的轉基因表達時間也更長，即可獲得更高的滴度，而其遺傳毒性相對較低。一般情況下產毒細胞上清液中的載體滴度足以轉導常規細胞系，但原代細胞較難轉導，需要進行載體濃縮以獲得較高濃度。此外，一些載體因整合了會降低滴度的遺傳元件，且大多數細胞類型也不耐受產毒細胞生長培養基或其分泌蛋白，所以濃縮及清洗是慢病毒載體使用的必要步驟。超速離心是病毒顆粒濃縮的常用方法之一，但其濃縮系數較低，每次處理量也偏小，且繁瑣的多步操作會降低病毒顆粒回收率。離心過濾是相對較簡單的濃縮方法，但過濾器本身會捕獲截留大量載體，造成損耗。相較而言，切向流過濾（TFF）操作簡單，損耗低，且可通過洗濾過程有效降低產毒細胞代謝物及分泌蛋白，但傳統的一步式TFF濃縮程度僅可達50-100倍，本實驗使用兩步TFF，成功......閱讀全文
簡介VSV-G-假型自我滅活慢病毒載體是不可或缺的生物實驗工具之一，與之前的γ-逆轉錄病毒載體不同的是，慢病毒載體可轉導非分裂細胞，并可攜帶更多的轉基因盒，在細胞中的轉基因表達時間也更長，即可獲得更高的滴度，而其遺傳毒性相對較低。一般情況下產毒細胞上清液中的載體滴度足以轉導常規細胞系，但原代細胞較難
簡介單純皰疹病毒2型（HSV-2）是潰瘍性生殖器皰疹的主要病原，全球每年新增感染達2300萬例，其治療方式主要圍繞口服抗病毒治療展開，但已有HSV-2候選疫苗進入臨床試驗，包括滅活、活性衰減、亞單位、DNA及多肽疫苗等，其中，野生型病毒刪除UL5和UL29基因構建的復制缺陷型HSV-2疫苗株病毒（d
在現代醫學中，輸血是出血性休克、貧血等病癥重要的治療方法，也是常規手術的重要組成部分，但是肝炎及AIDS等小概率傳播風險，總是干擾著輸血的安全進行。此外，輸血前，還需對供體血液進行分型，并與受體血型交叉匹配，以避免出現排異現象。對此，一種相對簡便的替代方法是，使用血紅蛋白（Hb）類氧載體（HBOCs
背景/介紹抗體（Abs），或免疫球蛋白（Ig），被廣泛用于許多不同的科研和治療性應用1。特別是，單克隆抗體（mAbs）在診斷、蛋白質純化以及醫療應用中的使用顯著增加2-5。妨礙治療性mAbs使用的一個主要障礙是皮下注射需要使用較高的濃度，因為這是優先選擇的給藥方法。按FDA要求，皮下給藥時，注射體積
如圖2所示，1.0mm內徑纖維的起始通量高于0.5mm內徑纖維（18L/m2/hr vs. 12L/m2/hr）。正如預期，通量隨IgG溶液濃度的增加而降低。運行過程中，TMP恒定為5psig，直到接近運行結束時，增加至約10psig。此時，通量降低至0L/m2/hr。圖2同時顯示，在整個運行過程中
來自美國俄亥俄州立大學等的科學家們在2020年第117期的《Biotechnology and Bioengineering》雜志上發表了題為“Novel Manufacturing Method for Producing Apohemoglobin and its Biophysical
實驗概要本文介紹了慢病毒濃縮與純化的兩種方法：超速離心沉淀法，PEG-8000濃縮法。實驗材料慢病毒上清液實驗步驟超速離心沉淀法： 1. 取6個Ultra-clear SW28離心管，用70%乙醇消毒后，放在超凈工作臺中打開紫外燈繼續消毒30分鐘； 2. 每個Ultra-clear SW28離心管中
方法一 超速離心沉淀法1. 取6個Ultra-clear SW28離心管，用70%乙醇消毒后，放在超凈工作臺中打開紫外燈繼續消毒30分鐘。2. 每個Ultra-clear SW28離心管中加入約32ml的預先處理的病毒上清液。3. 取一支10ml的移液管，吸取12 ml 20%的蔗糖溶液。將移液管一
慢病毒包裝技術專題Q:什么是慢病毒 ?A: 慢病毒載體 (Lenti vector)是用于感染細胞以實現穩定導入基因或siRNA的病毒載體系統，其感染效率可以達到100%。慢病毒和細胞結合后通過包裝蛋白將含有目的基因或者干擾序列釋放到細胞內。慢病毒RNA通過逆轉錄酶轉錄為DNA。DNA整合前復合
基本方案 高滴定度 HIV-I 基本載體轉染 293T 細胞實驗步驟實驗材料293T細胞