用三嗪染料配基吐溫80磷酸鹽液固萃取2體系分離純化乳酸脫氫酶
摘 要 目的 利用三嗪類染料Cibacron B lue F3G2A 修飾的吐溫80, 與磷酸鉀鹽構建染料配基吐溫802鹽液2固親和萃取體系, 從豬心肌勻漿液中分離純化乳酸脫氫酶。方法 成相染料配基吐溫80 濃度為15% (其中吐溫80 中含染料配基吐溫80 為10% ) ; 成相磷酸鉀鹽濃度為1. 49 mo l?L (pH 8. 50) ; 勻漿液加入量為體系的1% , 一次成相正萃取。將吐溫80 相保溫溶解, 改變磷酸鉀鹽濃度為0. 91mo l?L , 二次成相反萃取。結果 一次成相正萃取吐溫80 相平均酶活收得率97% , 純化8. 0 倍。二次成相反萃取, 鹽水相酶活收得率近100% , 實現了酶與吐溫80 相的分離。結論 三嗪染料配基吐溫802磷酸鹽液2固萃取體系, 分離純化乳酸脫氫酶, 具有良好選擇性和分離純化效果。對其進一步研究與開發, 具有較大實際應用價值。點擊這里進入下載頁面：進入下載頁面......閱讀全文
乳酸脫氫酶的測定
乳酸脫氫酶催化乳酸氧化為丙酮酸為可逆反應，正反兩個方向的反應均能測定。但逆反應測得的乳酸脫氫酶活性比正反應高得多，所以采用不同的測定方法得出的結果也會不同。
乳酸脫氫酶是什么
乳酸脫氫酶是一種糖酵解酶。存在于機體所有組織細胞的胞質內，其中以腎臟含量較高。 乳酸脫氫酶同功酶有五種形式，即LDH－1（H4）、LDH-2（H3M）、LDH－3（H2M2）、LDH-4（HM3）及LDH-5（M4），可用電泳方法將其分離。LDH同功酶的分布有明顯的組織特異性，所以可以根據其組
乳酸脫氫酶的概述
乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LD/LDH）為含鋅離子的金屬蛋白，分子量為135~140kD，由H和M兩種亞基組成，是糖無氧酵解及糖異生的重要酶系之一，可催化丙酸與L-乳酸之間的還原與氧化反應，也可催化相關的a-酮酸。LDH廣泛存在于人體組織中，以腎臟含量最高，其次是心
乳酸脫氫酶的測定
乳酸脫氫酶催化乳酸氧化為丙酮酸為可逆反應，正反兩個方向的反應均能測定。但逆反應測得的乳酸脫氫酶活性比正反應高得多，所以采用不同的測定方法得出的結果也會不同。
乳酸脫氫酶的簡介
乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LD/LDH）為含鋅離子的金屬蛋白，分子量為135~140kD，由H和M兩種亞基組成，是糖無氧酵解及糖異生的重要酶系之一，可催化丙酸與L-乳酸之間的還原與氧化反應，也可催化相關的a-酮酸。LDH廣泛存在于人體組織中，以腎臟含量最高，其次是心
乳酸脫氫酶的簡介
乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LD/LDH）為含鋅離子的金屬蛋白，分子量為135~140kD，由H和M兩種亞基組成，是糖無氧酵解及糖異生的重要酶系之一，可催化丙酸與L-乳酸之間的還原與氧化反應，也可催化相關的a-酮酸。LDH廣泛存在于人體組織中，以腎臟含量最高，其次是心
乳酸脫氫酶的檢查
（1）參考值；漏出液LD：接近血清。滲出液LD＞200U/L，積液LD/血清LD比值大于0.6。 （2）臨床意義：①LD活性增高見于化膿性積液、惡性積液、結核性積液等。化膿性積液LD活性增高最明顯，且LD增高程度與感染程度呈正相關；其次為惡性積液；結核性積液LD略為增高。②如果積液LD/血清L
乳酸脫氫酶的簡介
乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LD/LDH）為含鋅離子的金屬蛋白，分子量為135~140kD，由H和M兩種亞基組成，是糖無氧酵解及糖異生的重要酶系之一，可催化丙酸與L-乳酸之間的還原與氧化反應，也可催化相關的a-酮酸。LDH廣泛存在于人體組織中，以腎臟含量最高，其次是心
乳酸脫氫酶的形式
乳酸脫氫酶有5種同工酶形式，即LDH1、LDH2、LDH3、LDH4、LDH5，可用電泳法進行分離。人體心肌、腎、紅細胞以LDH1和LDH2為最多。肝和橫紋肌則以LDH4和LDH5為主。脾、胰、甲狀腺、腎上腺中LDH3較多。乳酸脫氫酶同工酶是觀察心肌疾病、肝膽疾病等的指標之一。
乳酸脫氫酶的定義
乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LD??或LDH??，EC1.1.1.27?）是一類NAD依賴性激酶，有LDHA、LDHB、LDHC三種亞基，可構成6種四聚體同工酶。?動物乳酸脫氫酶是由4個亞單位組成的四聚體，常見的A、B兩種亞基構成的5種LDH同工酶（LDH1-5），C亞基
影響固液萃取效率的因素有哪些？
萃取溫度,被提取百物的溶解度與溫度有關2.固相物質與萃取劑的接觸面積（通常將固體碾碎）3.溶劑的理化性質4.萃取過程中條件的維持,如加熱或冷水浴,趁熱過濾等度。固-液萃取問，也叫浸取，用溶劑分離固體混合物中的組分，如用水浸取甜菜中的糖答類；用酒精浸取黃豆中的豆油以提高油產量；用水從中藥中浸取有效成分
影響固液萃取效率的因素有哪些
萃取溫度,被提取物的溶解度與溫度有關2.固相物質與萃取劑的接觸面積（通常將固體碾碎）3.溶劑的理化性質4.萃取過程中條件的維持,如加熱或冷水浴,趁熱過濾等。固-液萃取，也叫浸取，用溶劑分離固體混合物中的組分，如用水浸取甜菜中的糖類；用酒精浸取黃豆中的豆油以提高油產量；用水從中藥中浸取有效成分以制取流
固相萃取
固相萃取（Solid-Phase Extraction，簡稱SPE）是近年發展起來一種樣品預處理技術，由液固萃取柱和液相色譜技術相結合發展而來，主要用于樣品的分離、純化和濃縮，與傳統的液液萃取法相比較可以提高分析物的回收率，更有效的將分析物與干擾組分分離，減少樣品預處理過程，操作簡單、省時、省力。
固相萃取
?固相萃取的基本原理是樣品在兩相之間的分配，即在固相（吸附劑）和液相（溶劑）之間的分配。?固相萃取保留或洗脫的機制取決于被分析物與吸附劑表面的活性基團，以及被分析物與液相之間的分子作用力。?洗脫模式有兩種：一種是目標化合物比干擾物與吸附劑之間的親和力更強，因而被保留，洗脫時采用對目標化合物親和力更強
固相萃取固相萃取儀的維護知識
固相萃取儀的維護知識：? 1、請把本機放置在水平的實驗臺上或通風櫥內使用，請勿讓本機接近熱源，不要讓物品遮蓋正面板和底板的通風孔；? 2、請保持環境的整潔，灰塵過多、高溫高濕環境會影響本機使用壽命；? 3、油脂、非極性溶劑等可能對儀器造成損害，應避免其接觸；? 4、清潔本機前，請從交流電源插座上拔下
固相萃取技術?固相萃取技術簡要過程
固相萃取技術簡要過程1.一個樣品包括分離物和干擾物通過吸附劑；2.吸附劑選擇性的保留分離物和一些干擾物，其他干擾物通過吸附劑；3.用適當的溶劑淋洗吸附劑，使先前保留的干擾物選擇性的淋洗掉，分離物保留在吸附劑床上；4.純化、濃縮的分離物從吸附劑上淋洗下來。
固相萃取與固相微萃取的區別
固相微萃取技術是一項新穎的樣品前處理與富集技術,屬于非溶劑型選擇性萃取法。固相微萃取是近年來國際上興起的一項試樣分析前處理新技術，是在固相萃取基礎上發展起來的，它保留了其所有的優點，摒棄了其需要柱填充物和使用溶劑進行解吸的弊病，只要一支類似進樣器的固相微萃取裝置即可完成全部前處理和進樣工作。
固相微萃取和固相萃取的區別
固相微萃取技術是一項新穎的樣品前處理與富集技術,屬于非溶劑型選擇性萃取法。固相微萃取是近年來國際上興起的一項試樣分析前處理新技術，是在固相萃取基礎上發展起來的，它保留了其所有的優點，摒棄了其需要柱填充物和使用溶劑進行解吸的弊病，只要一支類似進樣器的固相微萃取裝置即可完成全部前處理和進樣工作。固相萃取
固相微萃取和固相萃取的區別
固相微萃取和固相萃取的工作原理區別固相萃取技術基于液相色譜的原理，可近似看作一個簡單的色譜過程。吸附劑作為固定相，而流動相是萃取過程中的水樣。當流動相與固定相接觸時，其中的某些痕量物質（目標物）就保留在固定相中。這時用少量的選擇性溶劑洗脫，即可得到富集和純化的目標物。固相萃取可分為在線萃取和離線萃取
固相萃取與固相微萃取的區別
固相萃取（SPE）有三個重要的過程：首先，樣品通過吸附床，樣品中的分析物被固體吸附劑完全萃取出來；其次，使用一種溶劑將干擾組分從吸附劑中洗脫下來；最后，使用另一種溶劑將分析物從吸附劑上洗脫下來，得到的溶液再進行蒸發、濃縮等。固相微萃取（SPME）是利用平衡萃取和選擇性吸附的原理將分析物從樣品體系
固相萃取土壤萃取技術
在《土壤有機污染物前處理技術大全》中提到，“一般使用有機溶劑對樣品進行提取的操作才叫‘萃取’”。其實傳統意義上的萃取，其定義是利用物質在兩種互不相溶（或微溶）的溶劑中溶解度或分配系數的不同，使物質從一種溶劑內轉移到另外一種溶劑中，我們又稱之為“溶劑萃取”或者“液液萃取”。在“萃取”中，有一個關鍵的概
乳酸脫氫酶的生理變異
乳酸脫氫酶（LD）高低和性別關系不大，嬰兒酶活性可達成年人兩倍，兒童和少年活性比成年人高10%～15%醫`學教育網搜集整理。血清LD同工酶目前常用電泳法測定，由于具體方法差異，各學者報告的結果出入較大，但在成年人存在著如下規律：LD2＞LD1＞LD3＞LD4＞LD5，值得注意的是有學者報告，部分
淚液乳酸脫氫酶檢查作用
淚液乳酸脫氫酶檢查對角膜疾病的診斷有輔助意義。在細菌性角膜潰瘍和角結膜化學傷時，淚LDH和MDH活性下降。凡角結膜上皮損傷，LDH同工酶H/M比值和MDHm均有不同程度升高，但MDHm更能反映角膜組織損害的情況和病變程度。如在角膜潰瘍和可疑干性角結膜炎(KCS)，MDHm升高而淚LDH的H/M比
L乳酸脫氫酶測定
實驗方法原理 LDH，S-乳酸：NAD＋氧化還原物；L-乳酸脫氫酶。L-乳酸 + NAD + ? 丙酮酸 + NADPH + H +由于借助 ADH，反應可以從兩個方向檢測，但是對于這個平衡，即使考慮到 NADH 在反應起始時有高吸收值，丙酮酸的還原反應也是首選的。實驗材料 LDH 稀釋溶液試劑、試
乳酸脫氫酶的生理變異
乳酸脫氫酶（LD）高低和性別關系不大，嬰兒酶活性可達成年人兩倍，兒童和少年活性比成年人高10%～15%。血清LD同工酶目前常用電泳法測定，由于具體方法差異，各學者報告的結果出入較大，但在成年人存在著如下規律：LD2＞LD1＞LD3＞LD4＞LD5，值得注意的是有學者報告，部分正常兒童血中LD1可
乳酸脫氫酶測定的原理
乳酸脫氫酶催化乳酸至丙酮酸之間的可逆性反應，目前正反兩個方向的反應均能測定，由于逆反應的速度比正反應快4倍，測得的活性也高得多，因此采用不同反應方式的試劑盒得出的結果也不相同。 1994年IFCC推薦的參考方法為從乳酸至丙酮的正反應。 L-乳酸+氧化型輔酶Ⅰ→丙酮酸+還原型輔酶Ⅰ。
乳酸脫氫酶的結構功能
研究表明，L-乳酸脫氫酶（L-LDH）和L-蘋果酸脫氫酶屬于同一家族，而D-乳酸脫氫酶（D-LDH）屬于D-2-羥酸脫氫酶家族。D-乳酸脫氫酶大多數D-乳酸脫氫酶催化是可逆反應，極少數不可逆；對于可逆的D-乳酸脫氫酶來說，只有環境中乳酸濃度較高時才催化逆反應，即催化乳酸合成丙酮酸，來參與細菌的代謝。
血清乳酸脫氫酶的簡介
乳酸脫氫酶（LDH或LD）是糖無氧酵解及糖異生的重要酶系之一，可催化丙酮酸與L-乳酸之間的還原與氧化反應，也可催化相關的α-酮酸。LDH廣泛存在于人體組織中，以心、腎、骨骼肌含量最高，肝、脾、胰和肺組織次之。這些組織中的LDH的活力比血清中高得多。所以當少量組織壞死時，該酶即釋放血而使其他血液中
乳酸脫氫酶的組織分布
乳酸脫氫酶（LD）雖廣泛存在于人體各組織中，但是不同組織中同工酶組成有差異，大致可分為三類：一類以LD1為主，心肌為此類代表，LD可占總酶活性50%以上，此外有紅細胞等。另一類以LD5為主，以橫紋肌為代表，此外有肝臟等。第三類以LD3為主，脾、肺為此類代表。LD主要存在于細胞質中，線粒體中未查到
乳酸脫氫酶測定的原理
乳酸脫氫酶催化乳酸至丙酮酸之間的可逆性反應，目前正反兩個方向的反應均能測定，由于逆反應的速度比正反應快4倍，測得的活性也高得多，因此采用不同反應方式的試劑盒得出的結果也不相同。?1994年IFCC推薦的參考方法為從乳酸至丙酮的正反應。L-乳酸+氧化型輔酶Ⅰ→丙酮酸+還原型輔酶Ⅰ。