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    ADC單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以...(二)

    2.1.3 數據分析方法采用 Protein Deconvolution 2.0 軟件對原始質譜圖進行去卷積處理,得到完整的蛋白質分子量信息。 2.2 氨基酸序列、糖基化位點和 ADC 藥物結合位點測定 2.2.1 儀器和試劑質譜儀器:Q-Exactive(賽默飛世爾科技,美國);色譜儀器:Accela 液相色譜系統(賽默飛世爾科技,美國);色譜柱:Thermo Scientific, C18, 100? ,1.9 μm, 2.1×100 mm試劑:二次去離子水,色譜級乙腈,色譜級甲酸。 2.2.2 儀器方法色譜分析條件:具體見表 3; 表 3. 氨基酸序列測定的色譜分析條件流動相A:0.1% 甲酸水溶液;B:0.1% 甲酸乙腈溶液流速300 μL/min柱溫35℃色譜梯度時間/minB相濃度/%054545355090529052.55605 質譜分析條件:具體見表 4;&nb......閱讀全文

    ADC 單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以...(二)

    2.1.3 數據分析方法采用 Protein Deconvolution 2.0 軟件對原始質譜圖進行去卷積處理,得到完整的蛋白質分子量信息。?2.2 氨基酸序列、糖基化位點和 ADC 藥物結合位點測定?2.2.1 儀器和試劑質譜儀器:Q-Exactive(賽默飛世爾科技,美國);色譜儀器:Acce

    ADC 單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以...(四)

    3.2 糖基化位點確定ADC 單抗蛋白與其他單抗蛋白相同,也都包含 N-糖基化修飾,一般發生在保守序列 NXS 或 NXT 中(X 為除脯氨酸外的任意氨基酸)。在糖鏈完整的情況下,直接進行 trypsin 酶解,我們在搜庫時進行 G0F 糖基化可變修飾設定,可以直接獲得該 N 糖基化位點:重

    ADC 單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以...(一)

    ADC 單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以及ADC 藥物結合位點鑒定1. 前言單克隆抗體藥物是具有高度特異性的靶向藥物,能夠特異性作用于腫瘤細胞,被譽為治療惡性腫瘤的“生物導彈”。ADC 抗體藥,則是在抗體蛋白的特定天然氨基酸上非定點偶聯具有抗腫瘤作用的化療藥物(或稱小分子藥物),以增加

    ADC 單抗藥物的分子量、氨基酸序列、糖基化位點以...(三)

    經過 Protein Deconvolution 2.0 軟件去卷積處理之后的單抗分子量分布圖如下所示(圖 4),根據單抗的氨基酸理論序列分子量進行計算,將觀察到的質譜峰進行歸屬,從圖中我們觀察到,該 ADC 單抗分子之間存在 956 Da 左右的質量增加,由此推斷該單抗分子結合了不同數目的

    單抗藥物的分子質量、氨基酸序列以及糖基化位點鑒定 二

    質譜分析條件:具體見表 4;?表 3. 氨基酸序列測定的色譜分析條件表 4. 氨基酸序列測定的質譜分析條件?2.2.3 數據分析方法采用 Proteome Discoverer 1.3 軟件對原始譜圖進行數據庫搜索,具體搜庫參數為:包含單抗氨基酸序列的數據庫;半胱氨酸(C)烷基化(+57.021

    單抗藥物的分子質量、氨基酸序列以及糖基化位點鑒定 一

    1. 前言單抗藥物主要是由兩條重鏈和兩條輕鏈通過鏈內和鏈間二硫鍵以及非共價鍵組成,分子質量大約在 150 kD 左右,每條重鏈和輕鏈在 N 端都包含一個可變區域,在 C 端都包含一個恒定區域,并且在每條重鏈上還存在一個 N 糖基化位點,該位點含有不同的糖鏈結構,如圖 1 所示。目前,在生

    單抗藥物的分子質量、氨基酸序列以及糖基化位點鑒定 三

    經過 Protein Deconvolution 2.0 軟件去卷積處理之后的單抗分子質量分布圖(圖 3),根據單抗的氨基酸序列理論分子質量進行計算,將觀察到的質譜峰進行歸屬,可以初步推斷該單抗藥物存在多種形式的糖鏈結構,主要包括 G0、G0F、G1F 和 G2F,該結論與常見的單抗組成基本

    質譜技術在抗體藥物分析中的應用

    質譜技術是抗體藥物分析最重要的技術手段之一。本文簡述了抗體藥物的發展和質譜技術的原理。對于質譜技術在抗體藥物的分析中應用進行了歸類整理,主要分為在一級結構和高級結構分析中的應用。抗體類藥物是指含有抗體片段的蛋白類藥物,所以在惡性腫瘤、自身免疫性疾病、心血管疾病、感染和器官移植排斥等重大疾病上得到了快

    質譜技術在抗體藥物分析中的應用

    質譜技術是抗體藥物分析最重要的技術手段之一。本文簡述了抗體藥物的發展和質譜技術的原理。對于質譜技術在抗體藥物的分析中應用進行了歸類整理,主要分為在一級結構和高級結構分析中的應用。抗體類藥物是指含有抗體片段的蛋白類藥物,所以在惡性腫瘤、自身免疫性疾病、心血管疾病、感染和器官移植排斥等重大疾病上得到了快

    序列標簽位點的簡介

    任何DNA序列,只要知道它在基因組中的位置,都能被用作STS標簽。作為基因組中的單拷貝序列,是新一代的遺傳標記系統,其數目多,覆蓋密度較大,達到平均每1kb一個STS或更密集。這種序列在染色體上只出現一次,其位置和堿基順序都是已知的。在PCR反應中可以檢測出STS來,STS適宜于作為人類基因組的一種

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