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    DNA體外轉染試劑_如何準備轉染所需的質粒DNA

    轉染效率受到諸多因素的影響,除了細胞、培養基和載體等影響因素外,另外一項非常重要的因素便是DNA的質量。為了比較不同廠家的轉染效率,我們分別從三家不同的供應商購買了質粒制備試劑盒來制備pEGFP-N3質粒DNA,并通過不同的方法將制備的pEGFP-N3質粒轉運至NIH-3T3細胞。pEGFP-N3質粒分別通過Endofree Maxi Piasmid Kit(Qiagen),PerfectPrep Endofree Piasmid Maxi Kit(5 PRIME,inc)及NucleoBond DNA Maxi Kit(MACHEREY-NAGEL GmbH&Co.KG)制備,我們測定了230,260,280及320nm的吸光值檢測DNA的質量。通過上述三種方法制備的DNA質量如下:MACHEREY-NAGEL>5Prime>Qiagen。pEGFP-N3由PolyJetDNA轉染試劑運至NIH-3T3細胞。轉......閱讀全文

    細胞轉染實驗的實驗步驟-細胞轉染

    1)轉染試劑的準備A.將400ul去核酸酶水加入管中,震蕩10秒鐘,溶解脂狀物。B.震蕩后將試劑放在-20攝氏度保存,使用前還需震蕩。2)選擇合適的混合比例(1:1-1:2/脂質體體積:DNA質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養基。加入合適質量的MyoD或者EGFP的DNA,震蕩

    真核細胞轉染實驗

    真核細胞的轉染 實驗材料 真核細胞 試劑、試劑盒 脂質體 轉染液

    昆蟲細胞轉染實驗

    實驗材料昆蟲細胞試劑、試劑盒胎牛血清脂質體轉染劑儀器、耗材培養皿錐形瓶培養箱離心機轉子實驗步驟1. ?接種2x106個Sf9細胞于60 mm 培養皿,在含10%胎牛血清的完全培養液或無血清培養液中培養,于27℃培養30~60 min,讓細胞貼壁。2. ?相應于毎一待轉染的培養皿,吸取40 ul 無菌

    昆蟲細胞轉染實驗

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    細胞轉染實驗介紹

    一、實驗目的學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法——脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法,觀測外源蛋白的表達(綠色熒光蛋白),為染色準備實驗材料。二、實驗原理上圖所示是脂質體介導轉染的示意圖,它顯示了外源質粒進入細胞的一般過程。外源基因進入細胞主要有四種方法:電擊法、磷酸鈣法和脂質體介

    細胞轉染實驗目的

    學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法—脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法,觀測外源蛋白的表達(綠色熒光蛋白),為染色準備實驗材料。

    昆蟲細胞轉染實驗

    基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 昆蟲細胞 試劑、試劑盒

    昆蟲細胞轉染實驗

    基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 昆蟲細胞 試劑、試劑盒

    真核細胞轉染實驗

    學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法——脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法,觀測外源蛋白的表達(綠色熒光蛋白),為染色準備實驗材料。實驗材料真核細胞試劑、試劑盒脂質體 轉染液儀器、耗材CO2孵箱 離心管 6孔板

    細胞轉染實驗的實驗目的

    學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法—脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法,觀測外源蛋白的表達(綠色熒光蛋白),為染色準備實驗材料。

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