小鼠心臟組織蛋白樣品的蛋白質組學分析
實驗步驟1. 蛋白質雙向電泳1) 第一向固相pH梯度等電聚焦電泳a. 上樣：第一向等電聚焦采用膠內加樣的方法進行。精確吸取一定量的蛋白樣品(銀染樣品的蛋白上樣量為140 ug計，考染樣品為1.3 mg)加入重泡漲液(8 mol/L尿素，2%CHAPS，痕量濱酚藍，20 mmol/L DTT，0.5 % IPG buffer)，使終體積達到350ul。混勻后均勻加在IPG膠條holder的正、負極之間。將預制IPG膠條(pH 3 -10 NL)除去保護膜，膠面向下，覆于holder中的樣品之上；慢慢下壓膠條，并前后移動，避免生成氣泡。在膠條上方均勻封以1 ml覆蓋油，蓋上蓋子。b. 等電聚焦：將裝有樣品和IPG膠條的strip holder置一向電泳儀(IPGphorTM Isoelectric Focusing System)上進行等電聚焦。等電聚焦參數：0V電壓下泡漲3h，30V電壓下泡漲10 h，500 V電......閱讀全文
小鼠血清、血漿、或相關組織液中C反應蛋白(CRP)含量的測定
實驗概要本實驗應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠C-反應蛋白(CRP)水平。用純化的小鼠C-反應蛋白(CRP)抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中加入C-反應蛋白(CRP)，再與HRP標記的羊抗鼠抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化
全自動組織處理器處理小鼠脾臟
注意：gentleMACSTM Dissociators的使用細節可參考廠家說明書注意：在本文所展示的結果中，每個gentleMACS C管解離一個脾臟?1. 將小鼠脾臟加入含有PEB緩沖液的gentleMACS C管中:? ?1-2個小鼠脾臟：3ml? ?3-4個小鼠脾臟：6ml? ?5-6個小鼠
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
實驗概要免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學
干貨！小鼠肝組織dna的提取詳細步驟
實驗原理 DNA 以核蛋白形式存在于細胞核中。蛋白酶K 或鏈霉蛋白酶 E 均為廣譜蛋白酶，其重要特性是能在 SDS 和 EDTA 存在下保持很高的活性。在勻漿后提取 DNA 的反應體系中， SDS 可破壞細咆膜、核膜，并使組織蛋白與 DNA 分子分離， EDTA 抑制細胞中 DNase 活性，
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
實驗概要免疫組化，是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應，即抗原與抗體特異性結合的原理，通過化學反應使標記抗體的顯色劑（熒光素、酶、金屬離子、同位素）顯色來確定組織細胞內抗原（多肽和蛋白質），對其進行定位、定性及定量的研究，稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
材料二甲苯 酒精（100％，95％） EDTA抗原修復工作液（pH8.0，稀釋50倍使用） 0.5M Tris-NaCl (TBS) pH7.4（稀釋10倍使用） DAB顯色液（臨用前配制：試劑盒A、B、C各50ul，于1ml水中混勻）。方法1.? 石蠟切片置60℃烘箱中烘烤過夜 2.?
常見組織蛋白簡介
組織蛋白酶B組織蛋白酶B（CTSB） 是溶酶體內半胱氨酸蛋白水解酶，其催化作用由Cys ，His 實現，易被巰基試劑抑制，又稱巰基酶，屬于木瓜蛋白酶家族，在pH 3.0 ～ 7.0 都具有活性， 堿性條件下會不可逆失活 。CTSB 存在于細菌、病毒、原生動物、植物和哺乳動物中，在肝、脾、腎、骨、神經
蛋白樣品的定量
目前常用比色法測定樣品蛋白的含量：Bradford法（考馬斯亮藍法）、Lowry法（Folin-酚試劑法）、?BCA法等。但各有優缺點，大家可以根據具體情況選取。按相應蛋白質定量試劑盒操作說明操作，測定樣品濃度。收集完蛋白樣品后，為確保每個蛋白樣品的上樣量一致，需要測定每個蛋白樣品的蛋白濃度。根據所
多樣品組織研磨儀與組織研磨儀的詳細介紹
多樣品組織研磨儀與組織研磨儀的優勢-產品介紹；多樣品組織研磨儀與組織研磨儀兩者均為實驗室的常用的儀器工具、多樣品組織研磨儀與組織研磨儀均為用來研磨物料，其進行試驗后的成品顆粒比較小，為粉末狀。?? ? 一、多樣品組織研磨儀介紹?? ? 1、技術特點：?? ? 1.1、干磨，濕磨，冷凍研磨均適用；??
新研究：干細胞如何修復心臟病發作后的心臟組織損傷
近日，一項刊登在國際雜志npj Regenerative Medicine上的研究報告中，來自梅奧診所的科學家們通過研究發現了一種機體心臟病發作后干細胞激活的心臟愈合機制，研究者發現，干細胞能將心肌組織恢復到心臟病發作之前的狀況，這或許就為后期研究者闡明這些干細胞的作用機制提供了新的線索和思路。
雙向電泳操作步驟——組織來源的蛋白質樣品的溶解和制備
實驗材料蛋白質試劑、試劑盒SDS尿素儀器、耗材離心管轉子實驗步驟1. ?稱重后將樣品加入Dounch勻漿器。每100 mg 組織加入1.5~2.0 ml SDS/或尿素/溶解緩沖液，用B號研棒沖擊50次，然后以A號研棒沖擊50次。2. ?放置幾分鐘后，取一小份樣品于200 ul 離心管100 000
國際最新研究發現電子煙會影響小鼠正常心臟功能
中新網北京10月26日電 (記者 孫自法)電子煙危害小嗎？有什么危害？施普林格·自然旗下學術期刊《自然-通訊》最新發表一篇生理學研究論文稱，電子煙氣溶膠會在小鼠中短暫擾亂正常心臟功能。 該論文介紹，電子煙不通過燃燒煙草來遞送尼古丁。因此，電子煙氣溶膠比之煙草煙霧含有較少的一氧化碳、焦油和致癌化合
多樣品組織研磨機的性能
多樣品組織研磨機是一種特殊的、快速的、高效率的、多試管的一致系統。它能將任何來源(包括土壤、植物和動物的組織/器官、細菌、酵母、真菌、孢子、古生物標本等)的原始DNA、RNA和蛋白質進行提取和純化。 多樣品組織研磨機的產品性能： 1.操作數量多，效果好 快速的工作可以在1分鐘內完成。省時省
電鏡組織化學技術樣品制備
良好的樣品制備是電鏡酶細胞化學技術成功的關鍵。酶電鏡組織化學 樣品制備要求既要保存酶的活性，同時又要保存細胞的超微結構。并能防止酶反應產物擴散。每種酶對固定液的要求和顯示方法雖不盡相同。但電鏡酶組織化學的基本程序相似，下面簡要介紹其基本要求： 1．取材? 組織標本的取材是樣品制備的第一步，
FFPE組織樣品的DNA和RNA純化
福爾馬林固定后石蠟包埋的組織簡稱為FFPE樣品。將組織在 4–10% 的福爾馬林中迅速固定。 固定時間限制在 14–24 小時 (越長的固定時間將越容易導致DNA的片段化，對下游實驗不利)。將固定組織徹底脫水 (徹底脫去福爾馬林殘余，因為其阻礙蛋白酶K的作用)。 純化DNA時，使用新鮮從石蠟塊上切下
植物組織研磨樣品典型實驗方法
TL系列植物組織破碎儀具有對稱的一對高速大振幅的搖臂，通過研磨珠在樣品管內來回不規則撞擊及摩擦，在幾秒到幾分鐘內輕松實現樣品的研磨、粉碎、混合及細胞破壁。精細的研磨，最細可以達到5微米。對于不同的的樣品，TL系列植物組織破碎儀需要用不同的條件來處理，這里面主要涉及研磨速度、研磨時間、研磨溫度和研磨珠
動物組織研磨樣品典型實驗方法
TL系列動物組織研磨儀具有對稱的一對高速大振幅的搖臂，通過研磨珠在樣品管內來回不規則撞擊及摩擦，在幾秒到幾分鐘內輕松實現樣品的研磨、粉碎、混合及細胞破壁。精細的研磨，最細可以達到5微米。對于不同的的樣品，TL系列動物組織研磨儀需要用不同的條件來處理，這里面主要涉及研磨速度、研磨時間、研磨溫度和研磨珠
利用細菌歸巢特性將干細胞引導到心臟組織中治療心臟病
近日，一項發表于Chemical Science的研究報告中，來自布里斯托大學通過研究在世界上首次開發出了一種新方法，將干細胞直接引導到心臟組織中，這或許有望從根本上改善心血管疾病患者的治療手段。圖片來源：University of Bristol 在英國心血管疾病會引發超過四分之一的人群死亡
基于干細胞3D心臟組織的檢測使心臟病藥物更安全
ASTAR生物工程和納米技術研究所（IBN）的研究人員設計了一種來自人類干細胞的三維心臟組織，以測試新藥物在心臟上的安全性和有效性。 “心臟毒性可導致心力衰竭甚至死亡，是藥物失去作用的主要原因，抗生素，抗癌藥和抗糖尿病藥物可能對心臟造成意想不到的副作用，因此盡早檢測新開發的藥物是否對人的心臟安
組織總蛋白提取原理
關鍵詞：腦組織?目的：熟練進行腦組織蛋白質的提取 背景知識：無 原理：無 具體內容： 腦組織總蛋白質提取方法 1．將低溫保存的樣本稱重。 2．加入裂解液。樣本與組織比例=1：3~3.5 w/v，一般為150~170mg：500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制劑。可利用振蕩器、加樣器，將組織
組織總蛋白提取原理
關鍵詞：腦組織 目的：熟練進行腦組織蛋白質的提取 背景知識：無 原理：無 具體內容： 腦組織總蛋白質提取方法 1．將低溫保存的樣本稱重。 2．加入裂解液。樣本與組織比例=1：3~3.5 w/v，一般為150~170mg：500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制劑。可利用振蕩器、加樣器，將組織
組織總蛋白提取原理
關鍵詞：腦組織 目的：熟練進行腦組織蛋白質的提取 背景知識：無 原理：無 具體內容： 腦組織總蛋白質提取方法 1．將低溫保存的樣本稱重。 2．加入裂解液。樣本與組織比例=1：3~3.5 w/v，一般為150~170mg：500μl。加入50×Cocktail蛋白酶抑制劑。可利用振蕩器、加樣器，將組織
常見的組織蛋白簡介
組織蛋白酶B組織蛋白酶B（CTSB） 是溶酶體內半胱氨酸蛋白水解酶，其催化作用由Cys ，His 實現，易被巰基試劑抑制，又稱巰基酶，屬于木瓜蛋白酶家族，在pH 3.0 ～ 7.0 都具有活性， 堿性條件下會不可逆失活。CTSB 存在于細菌、病毒、原生動物、植物和哺乳動物中，在肝、脾、腎、骨、神經細
彈性蛋白的組織分布
在體內，彈性蛋白通常與結締組織中的其他蛋白質相關。體內的彈性纖維是無定形彈性蛋白和纖維原纖維的混合物。這兩種成分主要由較小的氨基酸組成，例如甘氨酸、纈氨酸、丙氨酸和脯氨酸。總彈性蛋白范圍為正常犬動脈中干脫脂動脈重量的58%至75%。新鮮組織和消化組織之間的比較表明，在35%的應變下，至少48%的動脈
Western－Blot－蛋白樣品制備
一、單層貼壁細胞總蛋白的提取：1.倒掉培養液，并將瓶倒扣在吸水紙上使吸水紙吸干培養液（或將瓶直立放置一會兒使殘余培養液流到瓶底然后再用移液器將其吸走）。2.每瓶細胞加 3 ml 4℃ 預冷的 PBS（0.01M pH7.2～7.3）。平放輕輕搖動 1 min 洗滌細胞，然后棄去洗液。重復以上操作兩次
研究發現大量飲酒悄無聲息損傷心臟組織
杯酒言歡。新年期間，歡聚也好，應酬也罷，難免觥籌交錯。 但從健康角度而言，飲酒無論多少都傷身，大量飲酒更是如此。美國心臟協會官方期刊近日發表的一項研究就再次警示：大量飲酒會導致心臟組織損傷，而且可能有癥狀表現之前，損傷就已經發生了。 這項研究在酒文化盛行的國度俄羅斯開展。研究從俄羅斯西北部納
基因編輯小鼠助力心臟缺血再灌注損傷機制研究
冠心病是嚴重威脅人類健康和生命的重大疾病之一，其發病率、死亡率逐年升高,其中急性心肌梗死是冠心病中致死及致殘率最高的一類疾病。盡管介入治療的廣泛開展,治療缺血及再灌注（ischemia/ reperfusion, I/R）損傷的心肌仍是尚未解決的難題，大量患者在急診介入治療后一周內出現急性心衰、
Sema3aCreERT2小鼠用于特異靶向心臟Purkinje纖維
上個月，中國科學院生物化學與細胞生物學研究所周斌研究組又有新科研成果發表在 Scientific Reports 上啦，題為“Genetic targeting of Purkinje fibres by Sema3a-CreERT2 ”，提供了一種新的遺傳學工具——Sema3a-CreERT2
Sema3aCreERT2小鼠用于特異靶向心臟Purkinje纖維
上個月，中國科學院生物化學與細胞生物學研究所周斌研究組又有新科研成果發表在?Scientific Reports?上啦，題為“Genetic targeting of Purkinje fibres by Sema3a-CreERT2?”，提供了一種新的遺傳學工具——Sema3a-CreERT2工具
Sema3aCreERT2小鼠用于特異靶向心臟Purkinje纖維
上個月，中國科學院生物化學與細胞生物學研究所周斌研究組又有新科研成果發表在 Scientific Reports 上啦，題為“Genetic targeting of Purkinje fibres by Sema3a-CreERT2 ”，提供了一種新的遺傳學工具——Sema3a-CreERT2