小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
實驗概要免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(immunocytochemistry)。實驗材料二甲苯酒精(100%,95%)EDTA抗原修復工作液(pH8.0,稀釋50倍使用)0.5M Tris-NaCl (TBS) pH7.4(稀釋10倍使用)DAB顯色液(臨用前配制:試劑盒A、B、C各50ul,于1ml水中混勻) 實驗步驟1. 石蠟切片置60℃烘箱中烘烤過夜2. 二甲苯中脫蠟,梯度酒精入水(無水乙醇,95%酒精),浸泡于蒸餾水中待用3. 抗原修復取500mlEDTA抗原修復工作液于1000ml燒杯中,在小功率電爐上加熱,至似沸微沸(為了防止脫片)。將組織切片......閱讀全文
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
材料二甲苯 酒精(100%,95%) EDTA抗原修復工作液(pH8.0,稀釋50倍使用) 0.5M Tris-NaCl (TBS) pH7.4(稀釋10倍使用) DAB顯色液(臨用前配制:試劑盒A、B、C各50ul,于1ml水中混勻)。方法1.? 石蠟切片置60℃烘箱中烘烤過夜 2.?
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
實驗概要免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學
小鼠組織切片免疫組化實驗步驟
實驗概要免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學
石蠟切片免疫組化實驗步驟
脫蠟和水化1. 將切片依次浸入二甲苯Ⅰ10 min,二甲苯Ⅱ(10 min)。2. 再次浸入無水乙醇Ⅰ(5 min)-無水乙醇Ⅱ(5 min)-95%酒精(5 min)-80%酒精(5 min)-70%酒精(5 min),然后去離子水沖洗2次,每次2 min。 抗原修復?(可選)3. 將組織切片放入
石蠟切片免疫組化步驟
實驗概要石蠟切片免疫組織化學染色主要試劑染色缸;染色架;保濕盒;晾片盤;微量移液器;0.2MPBS,乙醇,二甲苯,BSA,中性樹膠等實驗步驟1.?????石蠟切片放置在60℃恒溫箱中烘烤120分鐘;2.?????脫蠟和水化:二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→無水乙醇(5min×2次)→95
石蠟切片免疫組化染色步驟
1、載玻片的處理:抗原修復過程中,由于高溫、高壓、輻射等諸多因素的影響,極易造成脫片。為保證試驗的正常進行,可選用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等幾種試劑,對已清洗的載玻片進行處理。具體方法如下:1.1
普通組織石蠟包埋切片步驟
1、取材:新鮮組織固定于4%多聚甲醛24h以上。將組織從固定液取出在通風櫥內用手術刀將目的部位組織修平整,將修切好的組織和對應的標簽放于脫水盒內。 2、脫水:將脫水盒放進吊籃里于脫水機內依次梯度酒精進行脫水。75%酒精4h-85%酒精2h-90%酒精2h-95%酒精1h-無水乙醇I 30min
石蠟切片免疫組化實驗
即用型(Envision)快速酶免疫組化二步法 鏈霉菌抗生物素蛋白-過氧化物酶連結SP法 卵白素-生物素-過氧化物酶復合物(ABC)法 鏈霉親和素—生物素—過氧化物酶復合物(SABC)法 ? ? ? ? ? ?
石蠟切片免疫組化實驗
即用型(Envision)快速酶免疫組化二步法免疫組化可應用于:(1)確定組織細胞內抗原 (多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究;(2)診斷異常細胞,指導治療。實驗方法原理根據聚合酶技術把辣根過氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子結合在多聚酶上形成多聚物分子,其與待檢的抗原特異性的結合后,加入
石蠟切片免疫組化實驗
實驗方法原理 根據聚合酶技術把辣根過氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子結合在多聚酶上形成多聚物分子,其與待檢的抗原特異性的結合后,加入底物顯色。實驗材料 石蠟切試劑、試劑盒 PBS檸檬酸鹽緩沖液蒸餾水增強劑酶標抗鼠 兔聚合物蘇木素酒精二甲苯樹膠鹽酸二氨基聯苯胺儀器、耗材 烘箱微波盒塑料切片架顯微鏡膠頭