關于ELISA樣本值低于空白值的問題
在ELISA實驗中,樣本值低于空白值是一個經常性的問題。當樣本值較低接近試劑盒的靈敏度就容易發生樣本值低于空白值的現象,特別是在血清和血漿樣本的檢測。究其原因,主要在于兩個方面,一方面是誤差,另一方面是基質效應。下文逐個分析不同影響因素的原理、和解決方案。一、誤差 Error誤差分為三類,系統誤差、隨機誤差和過失誤差。這三類誤差中,系統誤差對樣本值和空白值之間的差異無影響。ELISA樣本值低于空白值在誤差方面主要來源于隨機誤差和過失誤差。1、 隨機誤差 Random Error無法控制的變因,使測量值產生隨機分布的誤差,服從統計學上的正態分布。從統計學上來看,測量值有99%的置信限在±3SD之間,如果CV值是20%,隨機誤差的邊界就是±60%,也就是說在CV值20%的狀況下,樣本值低于空白值60%之內,有可能是隨機誤差的影響,特別是空白值只有一個值時。隨機誤差不可消除,只能通過多次測量獲得的均值盡量......閱讀全文
ELISA試劑盒的樣本收集與前期準備詳細步驟
ELISA的樣本收集與前期準備利用ELISA進行臨床檢驗常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,精液,陰道分泌物等,這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。(一) 臨床樣本的收集1、血液樣本有些生理因素,如吸煙、進食、運動、情緒波動、妊娠、體位等均可影響血液
ELISA實驗過程中各種樣本不同的處理方法
ELISA試驗過程中各種樣本不同的處理辦法在搜集樣本前都必須有一個完好的方案,必須清楚要檢測的成份是否滿足穩定。對搜集后當天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃備用。關于隔天再檢測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃備用,有條件的,zui好-70℃凍存備用。標本應防止重復凍融。 液體類標本: 包含血清、
ELISA試劑盒實驗沒有吸光值或吸光值偏低該如何破?
在做ELISA實驗的過程中,難免會出現一個問題,當出現問題過后我們就需要去找尋問題的原因所在,然后在根據原因想出對應的解決辦法!今天的文章中,將為大家分析:在做ELISA實驗時,加入反應終止液后,沒有吸光值或吸光值偏低該如何破?加入反應終止液后,沒有吸光值或吸光值偏低。a.原因:未加入酶標記物。解決
人前顆粒體蛋白ELISA試劑盒樣本處理及要求:
人前顆粒體蛋白ELISA試劑盒樣本處理及要求:1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-30
魚胃抑素(GIP)ELISA試劑盒液體樣本的收集
1、血清:用無菌管收集,室溫血液自然凝固 10-20 分鐘,2-8℃條件離心 20 分鐘左右(2000-3000 轉/分),仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。2、血漿:應根據標本的要求選擇 EDTA、肝素鈉或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合 10-20 分鐘后,2-8℃條件離心 20 分鐘左右
人環孢素A(CsA)ELISA試劑盒樣本要求及注意事項
人環孢素A(CsA)ELISA試劑盒規格:96T/48T品牌:科順生物代測服務,全程Elisa實驗技術指導,免費代做實驗。特點:靈敏性高、特異性強、重復性好運輸:現貨供應,一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。研究領域:炎癥研究、神經生物學、新陳代謝、信號通路、免疫學、傳染病
ELISA試劑盒實驗土壤/植物樣本的采集及保存方法
ELISA試劑盒實驗土壤/植物樣本的處理方法植物標本的精采集及保存 1、 稱取0.1g(誤差±3%以內)新鮮植物組織樣本,在液氮中充分研磨;2、 加入1ml的提取液(80%甲醇), 置于-20度過夜;3、 于4度,8000rpm,離心1小時,取上清;4、 上清液過C-18固相萃取柱。具體步驟是: 8
ELISA的標準曲線的R值該取多少
R值為相關系數,校準曲線的線性R值至少應>0.99。我們在做定量檢測時一般R值>0.998,這樣回算出的濃度才更準確!如果R值低于0.99的話可能是操作原因,也可能是試劑的問題!
兔乳鐵傳遞蛋白ELISA試劑盒樣本處理及要求
兔乳鐵傳遞蛋白ELISA試劑盒樣本處理及要求: 1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。 2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘
牛腫瘤壞死因子α-ELISA試劑盒樣本處理說明
牛腫瘤壞死因子α ELISA試劑盒樣品收集、處理及保存方法:?1、 血清……操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。2、? 血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、? 細胞上清
鑒別科研類ELISA試劑盒檢測樣本適合種類的方法
目前ELISA試劑盒檢測的樣本中,除了細胞上清外,還有比較大的一部分是血清和血漿樣本。對于ELISA客戶來說,在實驗中可能用到不同的樣本,如何辨別所購的試劑盒能否測手中的樣本呢?對于最常見的細胞上清,我們大家知道,培養細胞過程中,無特別情況一般是10%的牛血清加入培養基中,經過培養后,細胞的吸收消耗
人AKT蛋白ELISA檢測試劑盒樣本處理及要求
人AKT蛋白ELISA檢測試劑盒樣本處理及要求:1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3
如何根據收集好的樣本來選擇合適的ELISA試劑盒?
暑期收集了一批樣本,準備近期訂購試劑盒做實驗,但是不知道應該選擇多大包裝規格的elisa試劑盒。一份樣品至少要幾個孔?是否要設對照孔,空白孔之類的嗎?問題一:其實ELISA試劑盒包裝規格的大小取決于試劑盒里面酶標板的規格大小,常見的有96T(12孔乘以8條)跟48T(12孔乘以4條)兩種。問題二、科
大鼠尿蛋白ELISA檢測試劑盒樣本處理及要求
大鼠尿蛋白ELISA檢測試劑盒樣本處理及要求:1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-30
人的血漿為什么可以作為ELISA試劑盒的樣本?
人的常見樣本是人的血清和血漿,血漿為什么可以作為研究對象呢,這是由血漿的主要成分決定的。血漿的主要作用是運載血細胞,運輸維持人體生命活動所需的物質和體內產生的廢物等。血漿相當于結締組織的細胞間質。血漿是血液的重要組成部分,呈淡黃色液體(因含有膽紅素)。血漿的化學成分中,水分占90~92%,其他10%
你知道嗎?ELISA樣本這么預稀釋省時省力不出錯!
對無全自動酶免分析儀或覺得用全自動酶免分析儀不方便的科室,用ELISA手工做HAV-IgM、HBc-IgM、EBV-VCA-IgA等項目檢測時,樣本需要做預先稀釋,從編號排試管到加樣本稀釋,再吸出稀釋樣本加入反應孔,如樣本量大,用單頭移液器來做,整個過程費時費力,且如稀釋倍數大,加過樣和未加過樣的稀
人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA-Kit-樣本要求
人煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA Kit 樣本要求:在收集標本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。我們提倡新鮮標本盡早檢測,對收集后當天就進行檢測的標本,及時儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,請造模取材后,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條
小鼠ELISA試劑盒樣本取血操作步驟及注意事項
大鼠、小鼠ELISA試劑盒檢測中,經常有客戶采用鼠類的血清,血漿做檢測樣本,但是收集樣本復雜,本章小編就根據大鼠,小鼠ELISA試劑盒樣本取血及注意事項。以小鼠為例:1 剪尾采血? 小鼠每次采血量0.1ml,大鼠每次采血量0.3-0.5ml 左手拇指和食指從背部抓住鼠頸部皮膚,將鼠頭朝下,鼠保定后將
Elisa試劑盒OD值不正常的原因
由于Elisa的操作步驟復雜,影響反應因素較多,在實驗問題中出現了一些大大小小的問題。然而這些問題也都是可以避免的,熟練掌握之后就會簡單的多。近日,有位客戶對Elisa提出問題:OD值不正常是什么情況?是什么原因?我司技術做出嗎如下解析:1.試劑盒未回溫(對應解決方法:試劑盒回溫到25℃);2.溫度
Elisa試劑盒OD值不正常的原因
? ? 由于Elisa的操作步驟復雜,影響反應因素較多,在實驗問題中出現了一些大大小小的問題。然而這些問題也都是可以避免的,熟練掌握之后就會簡單的多。近日,有位客戶對Elisa提出問題:OD值不正常是什么情況?有哪些原因?我公司為Elisa試劑盒OD值不正常找原因,希望對您有所幫助!??? 1.試劑
大鼠腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒樣本要求及注意事項
大鼠腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒 規格:96T/48T 品牌:科順生物 代測服務,全程Elisa實驗技術指導,免費代做實驗。 特點:靈敏性高、特異性強、重復性好 運輸:現貨供應,一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。 研究領域:炎癥研究、神經生物學、新陳代謝
豬白細胞介素10ELISA試劑盒樣本處理
樣本處理及要求1. ?血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20?分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。2. ?血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃?1000×g離心15分鐘,取
豚鼠白介素4(IL4)ELISA試劑盒收集樣本有哪些要求?
1、樣本不能含疊氮鈉(NaN3),因為疊氮鈉(NaN3)是辣根過氧化物酶(HRP)的抑制劑。2、標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能立即試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。3、樣本應充分離心,不得有溶血及顆粒。注意事項1、實驗嚴格按照說明書的操作進行
ELISA吸光值一直在衰減怎么辦?
不知道大家有沒有遇到過在做elisa試劑盒實驗的時候,ELISA吸光值一直在衰減這樣的現象。前幾日接到一個客戶的電話,咨詢一個問題:加完顯色液(購買)顯色一定時間后,再加終止液(2M H2SO4,自己配制)后,立即測試其吸光度值,等過幾分鐘再測試吸光度值,發現兩次測得的吸光度值發生衰減。第二
進口ELISA試劑盒吸光值偏高及解決方法
如何才能有效降低進口ELISA試劑盒吸光值,做elisa實驗,會遇到很多問題,畢竟大家都不是專業做這個,那么遇到elisa實驗結果出現問題,除了查找文獻,還有什么其他解決知道呢?下面一起去看看到底elisa實驗吸光值偏高如何解決?ELISA試劑盒吸光值均偏高的原因以及解決辦法:a.原因:室溫太高。解
ELISA實驗中質控品s/co值偏低的原因分析
原因主要有:1.試劑盒在運輸途中時間太長,溫度太高.2.試劑超過有效期.3.移液器吸力不足,移液抽吸排放太快,移液嘴內壁掛液太多或不清潔。4.恒溫箱溫度不足37℃或置室溫。5.保溫時間不足。6.洗滌液浸泡時間太長,洗滌次數增加。7.顯色液滴加不足。8.底物作用時間不足。9.樣品用NaN3防腐,抑制了
小鼠凝血酶受體(TR)elisa試劑盒實驗中給檢測樣本加...
小鼠凝血酶受體(TR)elisa試劑盒實驗中給檢測樣本加樣的步驟詳解小鼠凝血酶受體(TR)elisa試劑盒實驗中給檢測樣本加樣的步驟詳解1.細胞上清:前處理必須是細胞離心去除,每孔直接加100p1即可。如果濃度太高需稀釋時,用標準品稀釋液直接稀釋。2.腦脊液:前處理必須是細胞離心去除,每孔直接加10
樣本的物種
應選擇物種相同或有交叉反應的抗體,抗體可能與不同物種的同種靶蛋白有交叉反應,因其氨基酸序列同源性較高,如果樣本的種類未列入抗體說明書上的交叉反應種屬表中,并不意味著該抗體不適用于檢測該物種的蛋白,而只是表示該物種尚未用此抗體檢測驗證過,應通過序列比對的方法來預測交叉反應,可應用Expasy?和?NC
樣本的處理
?? ELISA檢測的目的是為實驗提供準確可靠的定量分析實驗依據。為了保證實驗數據的可靠性,在實驗過程中必須堅持全面質量控制和全過程質量控制。在收集標本前都必須有一個完整的計劃。上海勁馬設備有限公司來告訴你。?? ? 注意事項:?? ? 1.每個標本量收集體積=100ul×檢測種類,如要做復孔,標本
牛C反應蛋白(CRP)elisa免疫組化試劑盒?樣本處理及要求
牛C反應蛋白(CRP)elisa免疫組化試劑盒樣本處理及要求:1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右