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    TRIzol法同時提取RNA、DNA、蛋白質(一)

    TRIzol試劑適用于從細胞和組織中快速分離RNA。TRIzol試劑有多組分分離作用,與其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS法、鹽酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特點是可同時分離一個樣品的RNA\DNA\蛋白質.TRIzol使樣品勻漿化,細胞裂解,溶解細胞內含物,同時因含有RNase抑制劑可保持RNA的完整性。在加入氯仿離心后,溶液分為水相和有機相,RNA在水相中。取出水相用異丙醇沉淀可回收RNA;用乙醇沉淀中間層可回收DNA;用異丙醇沉淀有機相可回收蛋白質。 RNA的提取準備試劑:氯仿,異丙醇,75℅乙醇,無RNase的水或0.5℅SDS(溶液均需用DEPC處理過的水配制)。操作步驟:1. 勻漿處理:a.組織將組織在液氮中磨碎,每50~100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應超過TRIzol體積10℅。b.單層培養細胞 直接在培養板中加入TRIzol裂解細胞,每250px2面積(即8......閱讀全文

    RNA抽提指南(TRIZOL法)

    RNA抽提指南(TRIZOL法)注意事項:* 全程佩戴一次性手套。皮膚經常帶有細菌和霉菌,可能污染RNA的抽提并成為RNA酶的來源。培養良好的微生物實驗操作習慣預防微生物污染。* 使用滅菌的,一次性的塑料器皿和自動吸管抽提RNA,避免使用公共儀器所導致的RNA酶交叉污染。例如,使用RNA探針的實驗室

    總RNA的提取(Trizol法提取)

    在收集到生物材料之后,最好能即刻進行RNA制備工作。若需暫時儲存,則應以液氮將生物材料急速冷凍后,儲存于-80℃冷凍柜。在制備RNA時,將儲存于冷凍柜的材料取出,立即以加入液氮研磨的方式打破細胞,不可以先行解凍,以避免RNase的作用。1.????? 提取組織RNA時,每50~100mg組織用1ml

    Trizol法提取總RNA的原理

    Trizol試劑的主要成分是苯/酚。苯/酚的主要作用是對細胞進行裂解,從而使細胞當中的蛋白質以及核酸物質解聚而得以釋放。苯/酚雖然可以有效的使蛋白質變性,但它不能完全抑制RNA酶的活性,因此Trizol中還加入了8-羥基喹/啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內源和外源RNase(即RNA酶)。Tr

    Trizol法提取總RNA的純化要求

    1.純化后不應存在對酶(如逆轉錄酶)有抑制作用的物質。2.排除有機溶劑和金屬離子的污染。3.蛋白質、多糖和脂類分子等的污染降到最低程度。4.排除DNA分子的污染。

    TRIzol法提取組織和細胞總RNA

    (一)試劑準備1 . TRIzol 試劑。2 .氯仿3 .異丙醇4 . 75% 乙醇( DEPC H2O 配制)5 . DEPC H2O (二)操作步驟 1 . 樣品處理: (1)培養細胞:收獲細胞 1-5×10 7 ,移入 1.5ml 離心管中,加入 1ml Trizol ,混勻,室溫

    TRIzol法為什么在液氮下破碎細胞

    TRIZOL法是最經典的提取RNA的方法,在液氮下其一可以盡量避免RNA的降解,放入液氮會使TRIZOL凝固,在研磨固體的TRIZOL,細胞會更容易破碎。

    TRIzol法同時提取RNA、DNA、蛋白質

    TRIzol試劑適用于從細胞和組織中快速分離RNA。TRIzol試劑有多組分分離作用,與其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS法、鹽酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特點是可同時分離一個樣品的RNA\DNA\蛋白質.TRIzol使樣品勻漿化,細胞裂解,溶解細胞內含物,同時因含有RNase抑制劑可保持RNA

    總RNA提取試劑(Trizol法)使用說明

    『用途與特點』1.? ? 本試劑盒可用于幾乎所有新鮮或液氮保存的動物和植物組織、昆蟲和細胞RNA的快速提取,通用性好。2.? ? 無須DNA酶、RNA酶抑制劑等。3.? ? 所需樣品量少,并且可根據起始材料的多少自行調整。4.? ? 操作簡便,整個過程

    TRIzol法同時提取RNA、DNA、蛋白質

    TRIzol試劑適用于從細胞和組織中快速分離RNA。TRIzol試劑有多組分分離作用,與其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS法、鹽酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特點是可同時分離一個樣品的RNA\DNA\蛋白質.TRIzol使樣品勻漿化,細胞裂解,溶解細胞內含物,同時因含有RNase抑制劑可保持RNA

    TRIzol Prep

    Procedure1.? Homogenize cells (10 million) or tissue (50-100 mg) in 1 mL?TRIzol Reagent?(e.g. scrape and pass through 30G needle, dounce homogenize an

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