細胞培養常見問題分析
細胞常見問題分析1、冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放放37℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，并注意水面不可以超過冷凍管蓋沿，否則易發生污染情形。另外凍管由液氨桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管之爆裂。2、可否使用與原先培養條件不同之培養基？不能。每一細胞株均有其特定使用自己適應之細胞培養基，若驟然使用和原先提供之培養條件不同的之培養基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活。3、可否使用與原先培養條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產品極大的影響。來自不同特種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。4、懸浮性細胞應如何繼代處理？一般僅需持續加入新鮮培養基于原培養角瓶中，稀釋細胞濃度即可，若培養液太多時，可將培養角瓶口端稍微抬高，直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細胞之培養液至另一新的培養......閱讀全文
細胞培養常見問題分析
細胞常見問題分析 1、冷凍管應如何解凍？ 取出冷凍管后，須立即放放37℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，并注意水面不可以超過冷凍管蓋沿，否則易發生污染情形。另外凍管由液氨桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管之爆裂。 2、可否使用與原先培養條件不同之培養基？
細胞培養常見問題分析
細胞常見問題分析1、冷凍管應如何解凍？取出冷凍管后，須立即放放37℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化，并注意水面不可以超過冷凍管蓋沿，否則易發生污染情形。另外凍管由液氨桶中取出解凍時，必須注意安全，預防冷凍管之爆裂。2、可否使用與原先培養條件不同之培養基？不能。每一細胞株均有其特定使
細胞培養過程常見問題
1.為什么培養的細胞要及時傳代？? ? 答：體外培養的細胞大多具有生長接觸抑制的特性，也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候，它就會停止生長，及時傳代后，細胞的生長得以繼續。2.培養液pH下降很快可能原因有哪些？其解決辦法是什么？? ? 答：通常細胞生長得非常快時，pH值通常下降得很快。此時可以及時
細胞培養常見問題與解答4
22.在High Five無血清培養基中去污劑的濃度是多少？ High Five無血清培養基中去污劑的濃度：0.025 g/L Tween-80，1.0 g/L Pluronic Poly-all。 23.High Five細胞用多大的密度凍存？ 3.0x10E6 ce
細胞培養常見問題解答
1.如何選用特殊細胞系培養基？?培養某一類型細胞沒有固定的培養條件。在MEM中培養的細胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之，MEM做粘附細胞培養、RPMI-1640做懸浮細胞培養是一個好的開始。??2.何時須更換培養基？?視細胞生長密度而定， 或遵照細胞株基本數據上之更換時間，按時更
細胞培養常見問題與解答1
1.為什么要熱滅活血清？加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件，刺激平滑肌收縮，細胞和血小板釋放組胺，激活淋巴細胞和巨噬細胞。在進行免疫學研究、培養ES細胞、昆蟲細胞和平滑肌細胞時，推薦使用熱滅活血清。2.如何用臺盼蘭計數活細胞？用無血清培養基把細胞懸液稀釋到200－2000個/毫升，在0
細胞培養常見問題與解答2
8.培養基中丙酮酸鈉的作用是什么？丙酮酸鈉可以作為細胞培養中的替代碳源。盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是，如果沒有葡萄糖的話，細胞也可以代謝丙酮酸鈉。9.為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現沉淀？GIBICO的胎牛血清 沒有預老化，儲存在2－8℃時，血清中的各種蛋白和脂蛋白（如冷凝集素、纖維蛋白
細胞培養常見問題與解答3
15.如何檢測內毒素(熱源)水平？ LAL（Limulus Amebocyte Lysate）試驗是可用的最敏感和特異的檢測細菌內毒素的方法。Levin和Bang 發現細菌可引起鱟（Limulus polyphemus）血管內的凝集作用。內毒素啟動一個細胞內酶原系統（絲氨酸蛋白酶級
細胞培養常見問題解答（三）
21 偵測出細胞株有支原體污染時， 該如何處理?直接滅菌后丟棄，以避免污染其它細胞株。22 CO2 培養箱之水盤如何保持清潔?定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之。23 為何培養基保存于4 °C 冰箱中，顏色會偏暗紅色， 且pH值會越來越偏堿性?培養基保存于4 °C 冰箱中，
細胞培養常見問題解答（一）
1 冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后， 須立即放入37 °C 水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。2 細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO?除少數特別注明對D
細胞培養常見問題解答（二）
16 細胞欲冷凍保存時， 細胞冷凍管內應有多少細胞濃度?冷凍管內細胞數目一般為1x106 cells/ml vial， 融合瘤細胞則以5x106 cells/ml vial 為宜。17 應如何避免細胞污染?細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉漿菌。主要的污染原因為無菌操作技術不當、操作室
細胞培養常見問題解答（一）
1 冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后， 須立即放入37 °C 水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其在1 分鐘內全部融化， 并注意水面不可超過冷凍管蓋沿， 否則易發生污染情形。另冷凍管由液氮桶中取出解凍時，必須注意安全， 預防冷凍管之爆裂。2 細胞冷凍管解凍培養時， 是否應馬上去除DMSO?除少數特別注明對D
細胞培養板的選擇和常見問題
細胞培養板依底部形狀的不同可分為平底和圓底（U型和V型）；培養孔的孔數有6、12、24、48、96、384、1536 孔等；根據材質的不同有Terasaki板和普通細胞培養板。具體選擇時根據培養細胞的類型、所需培養體積及不同的實驗目的而定。?? ? （1）平底和圓底（U型和V型）培養板的區別和選擇：
細胞培養常見問題解答（四）
另：這里補充一下培養用品的消毒，供參考：細胞培養的最大危險是發生培養物的細菌，真菌和病毒等微生物的污染，污染主要是由于操作者的疏忽而引起，常見的原因有操作間或周圍空間的不潔，培養器皿和培養液消毒不合格或不徹底，由于有關培養的每個環節的失誤均能導致培養失敗，故細胞培養的每個環節都應嚴格遵守操作常規，防
細胞培養常見問題解答（二）
11 欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應為多少轉速?欲回收動物細胞， 其離心速率一般為300xg (約1,000rpm)，5 - 10 分鐘， 過高之轉速， 將造成細胞死亡。12 細胞之接種密度為何?依照細胞株基本數據上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細胞數太少或稀釋的太多亦是造成細胞無法生
細胞培養技術的常見問題及解決方法
細胞培養技術中常見的問題及解決方法包括：細胞污染細菌污染：表現為培養基短期內渾濁，pH 突然降低。解決方法：丟棄被污染的細胞，對培養環境進行徹底消毒，操作時嚴格遵循無菌操作流程。真菌污染：在培養基中可見絲狀或顆粒狀物質，顯微鏡下可見真菌孢子。解決方法：同細菌污染處理方式。支原體污染：細胞生長緩慢，形
動物細胞培養基常見問題20問
培養基是細胞培養中不可缺少的營養成分，但是最基礎的培養基卻給實驗者帶來了一系列的問題。別小看細胞培養，這里可蘊含著大學問。?1.怎樣查到一個特定細胞株的相關知識和培養條件？ATCC（American?Type?Culture?Collection）收集了絕大多數細胞的詳細資料。打開ATCC網頁的Ce
細胞培養常見問題的原因及其解決的辦法
001.問：要怎么樣復蘇細胞？答：細胞復蘇需要準備一個37℃水浴鍋、手套、鑷子，以及防護眼鏡。戴上手套，用鑷子夾住液氮罐中拿出的凍存管，然后快速在37℃水浴鍋里融解細胞。防護眼鏡可以防止液氮罐里剛剛拿出來的管子液氮爆炸…… 002.問：培養基不夠用，我能不能換一下細胞培養基啊？答：千萬別這么做，細胞
動物細胞培養基常見問題20問
培養基是細胞培養中不可缺少的營養成分，但是最基礎的培養基卻給實驗者帶來了一系列的問題。別小看細胞培養，這里可蘊含著大學問。 1.怎樣查到一個特定細胞株的相關知識和培養條件？ ATCC（American Type Culture Collection）收集了絕大多數細胞的詳細資料。
水質分析常見問題
26、配總磷過硫酸鉀，由于不好溶，加塞子水浴加熱到了10秒左右，塞子不是很緊，過硫酸鉀還能使用嗎?答：如果進水不建議使用，可以做標準溶液試一試。過硫酸鉀不好溶可以多攪拌或超聲，不建議加熱，控制不好溫度過高后會導致過硫酸鉀失效。另過硫酸鉀最佳保存溫度25-30℃，冷藏容易結晶。27、用3B做甲醛之前做
水質分析常見問題
13、請問做氨氮實驗時，為什么加入N3試劑出現大量白色渾濁，加入N2試劑后下層紅色上層青色不斷有小氣泡上升?答：鈣鎂離子高，應做絮凝沉淀預處理。水樣帶色或渾濁以及含其他一些干擾物質，影響氨氮的測定。因此，在分析時需做適當的處理。對較清潔的水，可采用絮凝沉淀發;對污染嚴重的水或工業廢水，則用蒸餾法消除
水質分析常見問題
11、請問定量器為什么吸不起來?答：定量器內有兩個玻璃柱，吸液時彎頭附近玻璃柱會將底部封死，溶液會吸上來;排液時下面玻璃柱會將底部封死讓溶液從彎頭排出。兩個玻璃柱相當于兩個單向閥。新定量器使用時吸不上來就是彎頭附近玻璃柱底部沒完全密封，可用手指輕彈幾下或用洗耳球將溶液吸到彎頭玻璃柱處就可以了。12、
水質分析常見問題
19、含氯酸鈉廢水COD如何檢測?答：含氯酸鈉廢水的COD檢測水樣的原水COD很高，用戶使用了氯酸鈉來處理，氯酸鈉具有氧化性，能降低COD，但這種廢水，使用正常方法無法檢測，經過查找資料及連華技術人員的建議，我們進行了方法測試，找到解決方案。1)取2.5ml水樣，加入4.8ml的E試劑，注意速度不要
芯片常見問題分析
1 芯片實驗和定量PCR的優劣比較? 基因表達譜芯片實驗可以對大量基因一次性進行定量研究,定量PCR則對大量基因需逐一進行定量研究。 2 在芯片制作過程中的PCR原液是否可以為客戶保存? 可以抽干冷凍保存一年。 3 可否用DNA和芯片雜交? 不可以，因為芯片上的樣品是cDNA而真核基因D
水質分析常見問題
05、做總磷實驗時，過硫酸鉀結晶了，影響檢測結果嗎，該怎么解決?答：過硫酸鉀配制時較難溶解，使用超聲波幫助其溶解。如果沒有超聲波，尤其是冬季室溫較低，可以加熱使其溶解(溫度不能超過60℃，否則過硫酸鉀會分解)，放冷后會有析出，因為溶液為過飽和，再加熱溶解是可以使用的，不影響總磷的測定。06、請問在做
水質分析常見問題
24、測定cod用密封管消解行不行?答：可以的，但是建議使用敞口管消解。密封消解時如果密封蓋沒有擰緊，在顛倒搖勻的時候，可能會讓溶液灑出，導致測值結果不準，甚至可能會造成人身傷害;部分水樣在消解時會釋放大量的氣體，此種水樣不可密封消解，如水里的次氯酸根太高，消解時會釋放出大量氯氣，密封消解會導致消解
水質分析常見問題
水質分析常見問題水質分析又稱水化學分析。即用化學和物理方法測定水中各種化學成分的含量。水質分析過程中常見的問題有哪些呢？01、BOD緩沖劑液化了還能用嗎?答：BOD緩沖劑時間稍長后會出現液化的現象，這是正常情況，不影響使用。02、我們測氨氮，是以氮元素計還是以銨根離子計?答:氨氮是指水中以游離氨和銨
水質分析常見問題
21、BOD緩沖劑液化還能用嗎?答：BOD緩沖劑時間稍長后會出現液化的現象，這是正常情況，不影響使用。22、儀器測總氮時空白和標液正常，測水樣顯示(9999)什么原因?答：儀器測標樣沒問題，儀器一般不會有問題，可能是水樣濃度太高需要稀釋，總氮直測范圍0.05-10mg/L，275nm波長下的吸光度盡
水質分析常見問題
08、請問BOD營養鹽有黃色不溶物正常嗎?答：正常，營養鹽配好是淡黃色不完全溶解的溶液，用前需搖勻。09、請問N2試劑前一天配出來沒什么問題，為什么放一天后變棕黃色變渾?答：N2試劑配好后應轉移到聚乙烯瓶中密封、避光、低溫儲存。如果放到礦泉水瓶內，時間稍長會出現變質。如果未密封保存，空氣中的有機氣體
水質分析常見問題
24、測定cod用密封管消解行不行?答：可以的，但是建議使用敞口管消解。密封消解時如果密封蓋沒有擰緊，在顛倒搖勻的時候，可能會讓溶液灑出，導致測值結果不準，甚至可能會造成人身傷害;部分水樣在消解時會釋放大量的氣體，此種水樣不可密封消解，如水里的次氯酸根太高，消解時會釋放出大量氯氣，密封消解會導致消解