6. 取出封閉2h的ELISPOT板,吸棄每孔中的封閉液。(不要洗板!) 7. 在ELISPOT板中,先加30μl 無血清培養基(12道排槍)和20μl肽庫(8道排槍),后加50μl細胞(8道排槍) (每孔活細胞總數為2×105,每個病人需活細胞總數為10×106,體積為2.5 ml。每條多肽的終濃度為5μg/ml,活細胞的工作濃度為4×106/ml,活細胞的終濃度為2×106/ml)。 陽性孔中每孔加入50μl 細胞和30μl無血清培養基和20μl PMA+Inomysin(工作液濃度分別為250ng/ml和5ug/ml,終濃度分別為50ng/ml和1ug/ml)。&n......閱讀全文
細胞因子(cytokine)是由細胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物質的統稱。在免疫應答過程中,細胞因子在免疫調節、炎癥應答、腫瘤轉移等生理和病理過程中起重要作用。細胞因子的檢測不僅是基礎免疫研究的有較手段,同時在臨床疾病診斷、病程觀察、療效判斷及細胞因子治療監測方面具有重要價值。但是,由于細胞因子
細胞因子(cytokine)是由細胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物質的統稱。在免疫應答過程中,細胞因子在免疫調節、炎癥應答、腫瘤轉移等生理和病理過程中起重要作用。細胞因子的檢測不僅是基礎免疫研究的有較手段,同時在臨床疾病診斷、病程觀察、療效判斷及細胞因子治療監測方面具有重要價值。但是,由于細胞因子
ELISPOT技術原理 在免疫學領域中,對于疾病以及疫苗研究不僅僅局限于體液免疫應答(B細胞免疫),細胞介導的免疫應答(cell mediated immune response,CMI)也是人們所關注的,而T細胞在CMI中起關鍵作用。在研究免疫應答機制時以
隨著酶聯免疫分析技術在醫學及生物學領域的廣泛應用,使體外檢測各種細胞因子及抗體研究有了新的突破。在研究免疫應答機制時以往常用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測體液中游離的細胞因子(CK)或抗體,但由于游離的循環抗體或CK的半哀期不同,使之在體液中不斷的被代謝或與靶器官結合,而不能確切的反映體內的抗體及