植物總RNA的提取實驗
實驗方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰沉淀總RNA, 洗滌后得到高質量的RNA。本實驗旨在了解和掌握植物總RNA 的分離和純化方法。實驗材料 植物RNA試劑、試劑盒 尿素Tris-HClNa2 EDTANaClTris飽和酚SDSLDS醋酸鈉氯仿-異戊醇異丙醇TE 緩沖液LiCl乙醇儀器、耗材 研缽燒杯離心機實驗步驟 取5～10 g 材料放入研缽中, 加入過量液氮, 迅速研磨成均勻的粉末(在研磨過程中, 保證材料始終浸在液氮中, 研磨約30 min) 。 待液氮自然揮發干凈后, 將材料轉入100 ml 的離心管中, 加入6 ～ 8 倍體積的裂解液1 , 輕輕攪拌后, 0 ℃ 冰浴20 min。12000 r/ min , 4 ℃離心15 min。 取上清, 加入1/ 3 體積的3 mol/ L 醋酸......閱讀全文
植物總RNA的提取實驗
研磨法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰
植物總RNA的提取實驗
實驗方法原理 在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰沉淀總RNA, 洗滌后得到高質量的RNA。本實驗旨在了解和掌握植物總RNA 的分離和純化方法。實驗材料 植物RNA試劑、試劑盒 尿素Tris-HClN
植物總RNA的提取實驗技術
一、實驗目的 通過本實驗學習從植物組織中提取RNA的方法 二、實驗原理 RNA是一類極易降解的分子，要得到完整的 ?RNA，必須最大限度地抑制提取過程中內源性及外源性核糖核酸酶對RNA的降解。高濃度強變性劑異硫氰酸胍，可溶解蛋白質，破壞細胞結構，使核蛋白與核酸分離，失活RNA酶，所以RNA從細胞中釋
植物總RNA的提取實驗_研磨法
在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞在裂解液中裂解, 用醋酸鈉和氯仿沉淀蛋白質, 異丙醇沉淀核酸, 溶解后經氯化鋰沉淀總RNA, 洗滌后得到高質量的RNA。本實驗旨在了解和掌握植物總RNA 的分離和純化方法。實驗方法原理在液氮中研磨植物材料, 使部分細胞破碎, 進一步使植物細胞
植物總RNA的提取規程
一、實驗目的掌握植物總RNA提取的原理和方法二、實驗原理RNA的提取：破壞細胞膜—除去蛋白—除去DNA—除去鹽離子。RNase是一類生物活性極其穩定的酶類，能耐高溫、耐酸、耐堿，高壓滅菌處理也不能使其完全失活。在提取RNA實驗中，要盡量抑制RNase的活性。?DEPC（焦磷酸二乙酯）是很強的RNas
植物組織總RNA的提取
實驗概要由于RNA分子的結構特點，容易受RNA酶的攻擊反應而降解，加上RNA酶極為穩定且廣泛存在，因而在提取過程中要嚴格防止RNA酶的污染，并設法抑制其活性，這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA酶，人的皮膚、手指、試劑、容器等均可能被污染，因此全部實驗過程中均需戴手套操作并經常更換（使用一
總RNA提取實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 一些公司推出的總RNA 提取試劑盒，可以用來制備高質量的可用于建庫的RNA 。該總RNA 純化系統采用兩種著名的RNA 酶抑制劑，異硫氰酸弧(GTC)和β-巰基乙醇，加上整個操作都在冰浴下進行，這樣就能顯著降低RNA 的
總RNA提取實驗
實驗方法原理 GTC和N-十二烷基肌氨酸鈉的聯合使用，將促使核蛋白復合體的解離，使RNA 與蛋白質分離，并將RNA 釋放到溶液中。而進一步從復合體中純化RNA ，則根據Chomc zynski和Sacchi的一步快速抽提法進行，采用酸性酚-氯仿混合液抽提。低pH值的酚將使RNA 進入水相
植物總RNA的提取實驗原理和操作步驟
一、實驗目的通過本實驗學習從植物組織中提取RNA的方法二、實驗原理RNA是一類極易降解的分子，要得到完整的RNA，必須最大限度地抑制提取過程中內源性及外源性核糖核酸酶對RNA的降解。高濃度強變性劑異硫氰酸胍，可溶解蛋白質，破壞細胞結構，使核蛋白與核酸分離，失活RNA酶，所以RNA從細胞中釋放出來時不
總RNA提取實驗步驟
一、細胞或組織破碎?1. ?微生物材料?（1）發酵3~4天（或對數生長期）的菌體，離心收集菌絲體（動植物材料無需此步處理）。?（2）用經DEPC處理的水洗菌絲體2~3次，并盡量除去殘存的水。?（3）加液氮充分研磨，使其成為粉末，以釋放RNA。?（4）研磨后的樣品轉移至12 ml 變性液的容器中勻漿。