五、生產規模層析柱的填裝對于填充良好的大規模層析柱, 從其頂端到底端,其中的填料是連續均勻分布的,并表現為最佳的層析效能。CHT 的填裝方法有數種,如何選擇取決于所用的層析柱類型及設備。在填裝層析柱前, 應參閱層析柱、介質轉移設備和介質填裝設備的相關指導手冊。開放性層析柱的最大填充床高度不能高于介質固位板 (釉料或網狀物) 表面間距離的 50%,如 EasyPack(BiCrRadLaboratories)、BPG(GEHealthcare) 和 Moduline2(Millipore)。例如,若該距離為 54 cm, 那么最大的填充高度則為 27 cm。同時計算填充柱的體積。每升填充床體積,使用 630 g 干粉及 1.79L 填充緩沖液,以制備成 50%(V/V) 的漿液。關閉層析柱的排出口,導入填充緩沖液,隨后加入干粉。用塑料攪拌器攪動 CHT-緩沖液的混合物使干粉水化, 將兩者混合形成均質的漿液。再逆......閱讀全文
核酸分子雜交技術由于核酸分子雜交的高度特異性及檢測方法的靈敏性,它已成為分子生物學中最常用的基本技術,被廣泛應用于基因克隆的篩選,酶切圖譜的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突變的檢測等。其基本原理是具有一定同源性的原條核酸單鏈在一定的條件下(適宜的溫室度及離子強度等)可按堿基互補原成雙鏈。雜交的
DNA重組技術(或基因工程)是20世紀生物學的偉大成就,并已滲透到生命科學包括醫學 各個領域,為腫瘤的實驗研究和臨床診斷及治療提供了嶄新的技術和有用的工具。本附錄扼要介紹在分子腫瘤學領域中常用的分子生物學基本技術及其在腫瘤研究中的應用,著重介紹它們的原理和應用。至于具體的技術方法和操作步驟可參閱《分
1 分離方法 采取何種分離純化方法要由所提取的組織材料、所要提取物質的性質決定。對蛋白質、多肽提取分離常用的方法包括:鹽析法、超濾法、凝膠過濾法、等電點沉淀法、離子交換層析、親和層析、吸附層析、逆流分溶、酶解法等。這些方法常常組合到一起對特定的物質進行分離純化,同時上述這些方法也是蛋白
摘 要 綜述了近幾年來多肽類物質的提取分離與分析方法,主要包括高效液相色法、電泳、質譜及核磁共振等方法在肽類物質研究中的最新應用進展。 多肽類化合物廣泛存在于自然界中,其中對具有一定生物活性的多肽的研究,一直是藥物開發的一個主要方向。生物體內已知的活性多肽主要是從內分泌腺組織器官、分泌細胞和體