T、B淋巴細胞分離實驗
實驗方法原理 淋巴細胞與用溴花二氨基異硫氫化物（簡稱AET）處理的綿羊紅細胞（SRBC）混合后，其中全部T淋巴細胞均能吸附AET—SRBC，形成牢固穩定而巨大的E—花環，較正常未處理的SRBC形成的E—花環百分比為高，而且形成快速，不易脫落，重復性好。再經淋巴細胞分層液分離時，AET—E花環易沉于管底，而未形成E—花環的T淋巴細胞，用低滲液解花環周圍的 AET—SRBC，便可獲得純T淋巴細胞，而B淋巴細胞可直接取自分層液的界面。實驗材料 新鮮豚鼠血試劑、試劑盒 Hanks液小牛血清199培養液生理鹽水氯化鈉溶液儀器、耗材 離心管離心機實驗步驟 1. AET—RRBC制備（1）AET溶液的制備稱取AET粉劑402毫克，溶于10毫升蒸餾水中，使成為0.143 M 溶液，用4N NaOH溶液調pH9.0。該溶液必須新鮮配制，不宜久存。（2） AET處理RRBC取洗滌好壓積的RRBC，按一份壓積AET—RRBC加入4份新......閱讀全文
T、B淋巴細胞分離實驗
淋巴細胞主要分T淋巴細胞和B淋巴細胞兩大亞群，它們具有不同的特性和功能，用于（1）免疫學研究（2）淋巴細胞的鑒定。實驗方法原理淋巴細胞與用溴花二氨基異硫氫化物（簡稱AET）處理的綿羊紅細胞（SRBC）混合后，其中全部T淋巴細胞均能吸附AET-SRBC，形成牢固穩定而巨大的E-花環，較正常未處理的SR
T、B淋巴細胞分離實驗
實驗方法原理 淋巴細胞與用溴花二氨基異硫氫化物（簡稱AET）處理的綿羊紅細胞（SRBC）混合后，其中全部T淋巴細胞均能吸附AET—SRBC，形成牢固穩定而巨大的E—花環，較正常未處理的SRBC形成的E—花環百分比為高，而且形成快速，不易脫落，重復性好。再經淋巴細胞分層液分離時，AET—E花環易沉于管
T、B淋巴細胞分離試驗
淋巴細胞主要分T淋巴細胞和B淋巴細胞兩大亞群，它們具有不同的特性和功能，為此在進行某些免疫學實驗時，首先需分離出純的T淋巴細胞和B淋巴細胞。本試驗的原理為：淋巴細胞與用溴花二氨基異硫氫化物（簡稱AET）處理的綿羊紅細胞（SRBC）混合后，其中全部T淋巴細胞均能吸附AET—SRBC，形成牢固穩定而巨大
T、B淋巴細胞分離試驗
實驗概要淋巴細胞主要分T淋巴細胞和B淋巴細胞兩大亞群，它們具有不同的特性和功能，為此在進行某些免疫學實驗時，首先需分離出純的T淋巴細胞和B淋巴細胞。本實驗介紹了T、B淋巴細胞分離試驗的操作步驟。實驗原理本試驗的原理為：淋巴細胞與用溴花二氨基異硫氫化物(簡稱AET)處理的綿羊紅細胞(SRBC)混合后，
人外周血B、T淋巴細胞的分離方法
目前常用Ficoll密度梯度離心法直接分離和純化外周血單個核細胞。方法: 1. 在短中管中加入適量淋巴細胞分離液。 2. 取肝素抗凝靜脈血與等量Hank's液或RPMI1640充分混勻，用滴管沿管壁緩慢疊加于分層液面上，注意保持清楚的界面。水平離心2000rpm×20分鐘。 3. 離心
流式細胞術分離法分離T淋巴細胞和B淋巴細胞
一、試劑及配制1. RPMI-1640培養基：應選購不含酚紅的，使用時加入5%的小牛血清。2. FITC-抗CD3單克隆抗體：FITC為異硫氰酸熒光素，CD3為T細胞表面特有的蛋白質分子（分化抗原）。二、操作方法1. 用聚蔗糖-泛影葡胺密度梯度離心法分離單個核細胞，用RPMI-1640培養基配成1×
T淋巴細胞的分離技術
（一）原理 ?混合單個核細胞懸液在通過尼龍毛柱時，B細胞、漿細胞、單核細胞和一些輔助細胞被選擇性粘附于尼龍毛上，而多數T細胞則通過尼龍毛柱，這是獲得富含T細胞群的有效方法。（二）材料及試劑1．尼龍毛（Femwall Laboratories,LP－1 Leukoqak leukocyte Filte
T淋巴細胞的分離技術
（一）原理混合單個核細胞懸液在通過尼龍毛柱時，B細胞、漿細胞、單核細胞和一些輔助細胞被選擇性粘附于尼龍毛上，而多數T細胞則通過尼龍毛柱，這是獲得富含T細胞群的有效方法。 （二）材料及試劑 1．尼龍毛（Femwall Laboratories,LP－1 Leukoqak leukocyte F
T淋巴細胞的分離技術
（一）原理 混合單個核細胞懸液在通過尼龍毛柱時，B細胞、漿細胞、單核細胞和一些輔助細胞被選擇性粘附于尼龍毛上，而多數T細胞則通過尼龍毛柱，這是獲得富含T細胞群的有效方法。 （二）材料及試劑 1．尼龍毛（Femwall Laboratories,LP－1 Leukoqak leu
T淋巴細胞要如何分離
操作方法1．尼龍毛的清洗與干燥（1）戴上已經洗去滑石粉的一次性手套，將尼龍毛（1包或2包，每包35g）放入燒杯中，加入蒸餾水或去離子水，用鋁箔蓋上燒杯并煮沸約10min。（2）冷卻至常溫，倒入漏斗內，使水滴干。（3）重復（1）、（2）步驟6次。（4）將尼龍毛攤在鋪有紗布的方盤內，37℃溫箱干燥2～3
T－細胞及B－細胞的分離
將淋巴細胞懸液通過尼龍棉柱，B 細胞粘附于尼龍棉上，T細胞則不粘附，先用RPMI l640 培基洗脫尼龍棉柱，流下的細胞懸液含有豐富的T 細胞。然后用力反復擠壓尼龍柱、擠出粘附在尼龍棉上的B 細胞，并用少量的RPMI l640 培基洗脫，此細胞懸液含有豐富的B 細胞。尼龍柱（塑料管）的長短和尼龍棉的
T淋巴細胞轉化實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 T 細胞在體外培養時，受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激后，可出現細胞體積增大，代謝旺盛，蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化。淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平，因此可作為測定機體免疫功能的指標之一
T淋巴細胞轉化實驗
實驗方法原理T 細胞在體外培養時，受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激后，可出現細胞體積增大，代謝旺盛，蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化。淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平，因此可作為測定機體免疫功能的指標之一。?淋巴細胞轉化試驗有形態計數法、MTT 法和同位素法三種。
T淋巴細胞轉化實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 T 細胞在體外培養時，受到非特異性有絲分裂原（如PHA、ConA）刺激后，可出現細胞體積增大，代謝旺盛，蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉化。淋巴細胞轉化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平，因此可作為測定機體免疫功能的指標之一
T－淋巴細胞增殖實驗
實驗步驟基 本 方 案 1 未 致 敏 T 淋巴細胞的活化材 料備選方案1 用抗體激活未致敏的T 細胞這種方法適用于當抗C D 3/T C R 復合物抗體不能有效結合小鼠輔助細胞上的F c 受體 ，或其可溶形式不能有效活化T 細胞時。值得注 意 的 是 ，在 某 種 抗 體（如 抗 G 7、Thy-
T淋巴細胞分離技術的注意事項
1．此種分離法，T淋巴細胞也常有一部分被吸附，吸附的多少與尼龍毛的質量有關，與裝柱的松緊也有關系。 2．此法的T淋巴細胞的回收率約20%～30%。 3．用過的尼龍毛可回收，以鹽水洗滌，然后浸入0.1Mol/L的HCl中過夜，然后再同前法清洗。
T淋巴細胞的分離技術尼龍毛法
（一）原理?混合單個核細胞懸液在通過尼龍毛柱時，B細胞、漿細胞、單核細胞和一些輔助細胞被選擇性粘附于尼龍毛上，而多數T細胞則通過尼龍毛柱，這是獲得富含T細胞群的有效方法。（二）材料及試劑1．尼龍毛（?Nylon Wool Fiber）。2．燒杯、鋁箔、漏斗、一次性手套等。3．裝填尼龍毛柱，一次性注射
磁珠法分離T細胞和B細胞
基 本 方 案 1 用 AUTOMACS 系 統 進行 總 T 細胞、 CD4 + 細 胞 或 CD8+T細胞的自動分離材 料小鼠HBSS 洗滌緩沖液基 本 方 案 2 使 用 AUTOMACS 系 統 進 行 B 細胞的自動分選材 料小鼠HBSS 洗滌緩沖液MACS 緩沖液CD45R (B2 2
關于T－細胞及B－細胞的分離介紹
將淋巴細胞懸液通過尼龍棉柱，B 細胞粘附于尼龍棉上，T細胞則不粘附，先用RPMI l640 培基洗脫尼龍棉柱，流下的細胞懸液含有豐富的T 細胞。然后用力反復擠壓尼龍柱、擠出粘附在尼龍棉上的B 細胞，并用少量的RPMI l640 培基洗脫，此細胞懸液含有豐富的B 細胞。尼龍柱（塑料管）的長短和尼龍
從PBMC中進一步分離T.B淋巴細胞可采用哪些方法
先從PBMC中分離得到淋巴細胞的混合物，然后用CD4+T細胞的單抗,免疫磁珠法分離；或者利用流式細胞儀進行分選。如果精確的話得用專門儀器了，要后續培養干擾小建議磁珠分，這個操作比較簡單，對設備要求不高，如果是要純度高推薦流式細胞術了，這個需要有分選的儀器，一般分析儀器只能分析比例。
從PBMC中進一步分離T.B淋巴細胞可采用哪些方法
先從PBMC中分離得到淋巴細胞的混合物，然后用CD4+T細胞的單抗,免疫磁珠法分離；或者利用流式細胞儀進行分選。如果精確的話得用專門儀器了，要后續培養干擾小建議磁珠分，這個操作比較簡單，對設備要求不高，如果是要純度高推薦流式細胞術了，這個需要有分選的儀器，一般分析儀器只能分析比例。
磁珠法分離小鼠T細胞和B細胞
PriCells: 磁珠法分離小鼠T細胞和B細胞?基本方案用AUTOMACS系統進行總T細胞、CD4+細胞或CD8+T細胞的自動分離?實驗材料1、小鼠2、HBSS洗滌緩沖液3、MACS緩沖液4、磁珠5、RPMI-10完全培養基6、AUTOMACS系統和分選柱7、30μm尼龍網或40μm預分離濾膜?實
淋巴細胞的分離和激化實驗
實驗試劑1. PBS（Dulbecco）：?? 0.10g/L 無水CaCl2?? 0.20g/L KCl?? 0.20g/L KHPO4?? 0.10g/L MgCl2.6H2O?? 8.00g/L NaCl?? 2.16g/L NaH2PO4.7H2O?? 調pH至7.42. 生長培養基：??
淋巴細胞的分離和激化實驗
實驗試劑1. PBS（Dulbecco）：?? 0.10g/L 無水CaCl2?? 0.20g/L KCl?? 0.20g/L KHPO4?? 0.10g/L MgCl2.6H2O?? 8.00g/L NaCl?? 2.16g/L NaH2PO4.7H2O?? 調pH至7.42. 生長培養基：??
淋巴細胞的分離和激化實驗
實驗概要本實驗從全血中收集富含白細胞的血漿，然后通過Ficoll-Hypaque離心，沉淀細胞懸于含不同細胞分裂劑的培養基中，刺激細胞生長。主要試劑1. PBS（Dulbecco）： ?? 0.10g/L 無水CaCl2 ?? 0.20g/L KCl ?? 0.20g/L KHPO4 ?? 0.10
哮喘大鼠模型的制作和T淋巴細胞的分離
大鼠哮喘模型的分組及建立實驗大鼠分組：根據隨機化原則，將24只雄性Wistar大鼠（體重190-250g） 按體重編號，采取隨機排列表法分為以下4組：（1）正常對照組、（2）哮喘一周組（激發一周）、（3）哮喘兩周組（激發二周）和（4）哮喘四周組（激發四周及以上）。哮喘模型的建立：第一天三組哮喘組大鼠
離心機分離生物T淋巴細胞的技術介紹
（一）原理 混合單個核細胞懸液在通過尼龍毛柱時，B細胞、漿細胞、單核細胞和一些輔助細胞被選擇性粘附于尼龍毛上，而多數T細胞則通過尼龍毛柱，是獲得富含T細胞群的有效方法。（二）材料及試劑1．尼龍毛（Femwall Laboratories,LP－1 Leukoqak leukocyte Filters
免疫學實驗T淋巴細胞亞群介紹
T淋巴細胞亞群介紹： T淋巴細胞亞群的測定是檢測機體細胞免疫功能的重要指標，且對某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、惡性腫瘤、血液病、變態反應性疾病等)的輔助診斷，分析發病機制，觀察療效及監測預后有重要意義。T淋巴細胞亞群正常值： 免疫熒光法、橋聯酶免疫檢測法、SPA花環法： CD3+細胞陽性
B淋巴細胞分化
?? 哺乳類動物B細胞的分化過程主要可分為前B細胞、不成熟B細胞、成熟B細胞、活化B細胞和漿細胞五個階段。其中前B細胞和不成熟B細胞的分化是抗原非信賴的，其分化過程在骨髓中進行。抗原依賴階段是指成熟B細胞在抗原刺激后活化，并繼續分化為合成和分泌抗體的漿細胞，這個階段的分化主要是在外周免疫器官中進行的
Calcein釋放實驗檢測細胞毒性T淋巴細胞活性實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 Calcein acetoxymethy1酯（Calcein-AM）是一種胞漿熒光標記物，本身無熒光，滲入細胞后細胞內酯酶催化生成的水溶性綠色熒光物質不易透出細胞。靶細胞用其標記后與效應細胞共育，再加Fluoro-Quen