蛋白上游研究之Sanger測序原理與方法
在分子生物學研究中，DNA的序列分析是進一步研究和改造目的基因的基礎。目前用于DNA測序的技術主要有Frederick Sanger發明的Sanger雙脫氧鏈終止法（Chain Termination Method）。快速DNA測序方法的出現極大地推動了生物學和醫學的研究和發現。 測序原理 利用一種DNA聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物，直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每一次序列測定由一套四個單獨的反應構成，每個反應含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸(dNTP)，并混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基團，使延長的寡聚核苷酸選擇性地在G、A、T或C處終止。終止點由反應中相應的雙脫氧而定。每一種dNTPs和ddNTPs的相對濃度可以調整，使反應得到一組長幾百至幾千堿基的鏈終止產物。它們具有共同的起始點，終止點由反應中相應的雙脫氧而定。 測序方法 基因分......閱讀全文
高通量測序技術及原理
高通量測序技術及原理介紹如下：1.什么是高通量測序高通量測序技術也被稱作二代測序技術（Next Generation Sequencing, NGS），這是相對一代測序技術（Sanger Sequencing）而言的，同時由于高通量測序的出現使得我們能對一個物種的基因組和轉錄組進行全面、細致的分析成
高通量測序技術及原理介紹
高通量測序技術及原理介紹如下：1.什么是高通量測序高通量測序技術也被稱作二代測序技術（Next Generation Sequencing, NGS），這是相對一代測序技術（Sanger Sequencing）而言的，同時由于高通量測序的出現使得我們能對一個物種的基因組和轉錄組進行全面、細致的分析成
淺議基因測序技術的代際
相對于較早出現的Sanger雙脫氧核苷酸測序技術（簡稱Sanger測序），2005年后出現的NGS測序技術，使得基因組研究進入高通量時代，促進了基因組學科學研究及技術轉化應用。在基因組學領域，NGS通常是next-generation sequencing的縮寫，意為下一代或者新一代測序技術，亦
研究發現滲透脅迫上游信號重要元件
近期，中國科學院分子植物科學卓越創新中心上海植物逆境生物學研究中心研究員趙楊研究組和朱健康研究組合作完成的題為BONZAI Proteins Control Global Osmotic Stress Responses in Plants的研究論文，發表在Current Biology上。研究
黑河上游固氮細菌群落結構與多樣性研究獲得進展
氮是高寒生態系統的限制性營養元素，對固氮細菌多樣性及其影響因素的研究有助于解決高寒生態系統土壤氮缺乏的難題。 中國科學院寒區旱區環境與工程研究所科研人員在祁連山區冰溝選擇了兩種典型植被進行樣方調查和土壤樣品采集。通過對其土壤理化性質進行測定，對兩種植被土壤中的固氮細菌多樣性和豐度用克隆文庫（
將基因測序與醫學研究相結合
由于科技的進步，基因組測序的價格從2001年的1億美元降至如今的幾千美元。因為價格較低，現在很多人僅僅因為受到好奇心的驅使就開始嘗試基因測序技術。 但是基因測序尚未普及。國家人類基因組研究所的Leslie G. Biesecker表示，能夠體驗這一先進科技的人數不超過五位數。部分原因是很多人對
小麥粉檢測項目之粉色與鼓星檢測方法研究
??? 在小麥制粉過程中，小麥粉加工精度越高，出粉率越低，混入其中的鼓皮就越少，顏色也越白，其商品價值越高。因此，加工精度是小麥粉最重要的質量指標之一，也是小麥粉檢測項目之一，小麥粉加工精度直接影響小麥粉的產量和質量，影響小麥粉的市場價格，也影響小麥粉加工企業的經濟效益。 目前，我國現行的國家標準
DNA測序前為什么純化
第一代測序技術第一代DNA測序技術用的是1975年由桑格（Sanger）和考爾森（Coulson）開創的鏈終止法或者是1976-1977年由馬克西姆（Maxam）和吉爾伯特（Gilbert）發明的化學法（鏈降解）. 并在1977年，由桑格老人家測定了第一個基因組序列——噬菌體phiX-174，全長只
【分享】質譜分析蛋白的原理與方法
質譜技術具有較好的靈敏度、準確度，能準確測定蛋白質。目前質譜主要測定蛋自質一級結構包括分子量、肽鏈氨基酸排序及多肽或二硫鍵數目和位置，在對蛋白質結構分析的研究中占據了重要的地位。[1,2]質譜有進樣器、離子源、質量分析器、離子檢測器、控制電腦及數據分析系統等組成。傳統的質譜僅用于小分子揮發物質
PNAS：新測序方法助力癌癥研究
在去年圣誕節期間的加拿大落基山脈冰攀之旅中，兩位來自華盛頓大學的年輕研究人員：Michael Schmitt和Jesse Salk突發奇想，談到了一個簡單但功能強大，可用于檢測癌細胞，獲得更好結果的新方法――如果他們能降低DNA測序中的錯誤率，那么就可以更好的檢測出這些細胞中的變異，這種改進
第二代基因測序的意義
基因測序只是基因檢測的方法之一，其又叫基因譜測序，是國際上公認的一種基因檢測標準。?基因測序廣為人知的還有針對唐氏綜合征篩查的無創產前基因檢測。只需要孕婦5毫升血，通過化驗血液中甲型胎兒蛋白（AFP）、人類絨毛膜促性腺激素（β-hCG）的濃度，就可以算出胎兒出現唐氏綜合征的危險性。最近公眾關注的H7
DNA測序的測序原理
DNA測序的測序原理是：利用一種DNA聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物。直到摻入一種鏈終止核苷酸為止。每一次序列測定由一套四個單獨的反應構成，每個反應含有所有四種脫氧核苷酸三磷酸(dNTP)，并混入限量的一種不同的雙脫氧核苷三磷酸。由于ddNTP缺乏延伸所需要的3-OH基團，使延長的寡聚核苷酸
－DNA測序市場將超100億美元－我國上游產業弱勢明顯
DNA測序是測定每個人的核苷酸序列，目前應用領域廣泛,涉及醫學、生物學、地質學和農業等。DNA測序技術的進步和測序成本的大幅降低顯示其巨大的市場潛力：如無創檢測、疾病診斷和個性化的治療。2013年,全球DNA測序的市場規模(包括設備和耗材、服務等方面)接近46億美元,比前一年
三代測序技術和原理介紹（一）
??摘要：從1977年第一代DNA測序技術（Sanger法）1，發展至今三十多年時間，測序技術已取得了相當大的發展，從第一代到第三代乃至第四代，測序讀長從長到短，再從短到長。雖然就當前形勢看來第二代短讀長測序技術在全球測序市場上仍然占有著絕對的優勢位置，但第三和第四代測序技術也已在這一兩年的時間中快
蛋白鑒定方法之圖象分析技術
“滿天星”式的2-DE圖譜分析不能依靠本能的直覺，每一個圖象上斑點的上調、下調及出現、消失，都可能在生理和病理狀態下產生，必須依靠計算機為基礎的數據處理，進行定量分析。 在一系列高質量的2-DE凝膠產生（低背景染色，高度的重復性）的前提下，圖象分析包括斑點檢測、背景消減、斑點配比和數據庫構建。
蛋白鑒定方法之質譜相關技術
質譜已成為連接蛋白質與基因的重要技術，開啟了大規模自動化的蛋白質鑒定之門。 用來分析蛋白質或多肽的質譜有兩個主要的部分，1）樣品入機的離子源，2）測量被介入離子的分子量的裝置。 首先是基質輔助激光解吸附電離飛行時間質譜（MALDI-TOF）為一脈沖式的離子化技術。 它從固相標本中產生離子，并在飛
蛋白質測序的目的和方法
所謂蛋白質測序，主要指的是蛋白質的一級結構的測定。蛋白質的一級結構(Primary structure)包括組成蛋白質的多肽鏈數目。很多場合多肽和蛋白質可以等同使用。多肽鏈的氨基酸順序，它是蛋白質生物功能的基礎。
PCR實驗技術指南之產物測序
1. DNA 直接測序：指直接分析不經分離的PCR 擴增產物，如果各個位點上堿基序列都是一致的，則所得信號是確定的，否則，在那些有相異堿基的位點出現模糊信號， 如果模板在多數情況下被正確擴增，則少數的突變將被掩蓋，這是結果顯示的是模板的序列.但是，當擴增的前幾輪即出現錯誤擴增并被后續的循環積累，這時
病理學的研究方法之組織培養與細胞培養
將某種組織或單細胞用適宜的培養基在體外加以培養，以觀察細胞、組織病變的發生發展、如腫瘤的生長、細胞的癌變、病毒的復制、染色體的變異等等。此外，也可以對其施加諸如射線、藥物等外來因子，以觀察其對細胞、組織的影響等。這種方法的優點是，可以較方便地在體外觀察研究各種疾病或病變過程，研究加以影響的方法，
干貨：三代測序技術和原理（一）
?? 摘要：從1977年第一代DNA測序技術（Sanger法）1，發展至今三十多年時間，測序技術已取得了相當大的發展，從第一代到第三代乃至第四代，測序讀長從長到短，再從短到長。雖然就當前形勢看來第二代短讀長測序技術在全球測序市場上仍然占有著絕對的優勢位置，但第三和第四代測序技術也已在這一兩年的時間中
九大測序平臺對比（一）
1.sanger企業：Life Technology推出時間：1977年發明，1986年第一臺商業化測序儀主流型號：3730XL樣品要求：PCR產物：濃度≥50ng/ul 體積≥10ul；質粒：含量≥5ug；菌液：體積≥1ml。測序原理:雙脫氧鏈終止法：Sanger法測序的原理就是，每個反應含有所有
DNA測序技術的基本內容
DNA測序技術，即測定DNA序列的技術。在分子生物學研究中，DNA的序列分析是進一步研究和改造目的基因的基礎。目前用于測序的技術主要有Sanger等（1977）發明的雙脫氧鏈末端終止法和 Maxam和 Gilbert（1977）發明的化學降解法。這二種方法在原理上差異很大，但都是根據核苷酸在某一
蛋白質測序的測序要求
●1 樣品必需純（>97%以上）； ●2 知道蛋白質的分子量； ●3 知道蛋白質由幾個亞基組成； ●4 測定蛋白質的氨基酸組成；并根據分子量計算每種氨基酸的個數。 ●5 測定水解液中的氨量，計算酰胺的含量。
Sanger采用SMRT測序技術獲得－NCTC－3,000株細菌基因組圖譜
英國著名的Wellcome Sanger研究所與Pacific Biosciences（PacBio）合作已完成了對英國公共衛生部國家標準菌庫NCTC中 3,000多株細菌的基因組的測序工作，其中包括一些世界上最危險的細菌，如引起鼠疫、痢疾和霍亂的細菌。通過解碼DNA，研究人員能夠更好地了解細菌
DNA測序技術的測序原理
化學修飾法測序原理化學試劑處理末段DNA片段，造成堿基的特異性切割，產生一組具有各種不同長度的DNA鏈的反應混合物，經凝膠電泳分離。化學切割反應：包括堿基的修飾，修飾的堿基從其糖環上轉移出去在失去堿基的糖環處DNA斷裂。Sanger法測序的原理就是利用一種DNA聚合酶來延伸結合在待定序列模板上的引物
DNA測序的測序原理介紹
化學修飾法測序原理 化學試劑處理末段DNA片段，造成堿基的特異性切割，產生一組具有各種不同長度的DNA鏈的反應混合物，經凝膠電泳分離。化學切割反應：包括堿基的修飾，修飾的堿基從其糖環上轉移出去在失去堿基的糖環處DNA斷裂。 Sanger法測序的原理 就是利用一種DNA聚合酶來延伸結合在待定
基因測序：上游三四代技術是趨勢，下游樣本積累是關鍵
基因測序全產業鏈劃分為上游的測序儀器與試劑耗材市場，中游的基因測序服務市場和下游的生物信息學分析市場。中下游市場面向群體包括醫院、藥廠、科研機構以及消費者等，可分為醫療和非醫療兩個領域。 醫療領域可分為人體基因組和人體微生物基因組兩個子領域。針對人體基因組的主要產品有腫瘤學（診斷篩查與治療、靶
基因測序前景：上游市場增速放緩－中下游市場潛力巨大
基因測序服務市場增速快，預計2016年超過測序儀器市場。據Markets&Markets預測，2014-2020年上游市場中測序儀的復合增長率是15.4%。中游測序服務市場重資產、技術附加值低，將是產業鏈中增速最快的，據BCC Research預測2011-2016年復合增長率為29%。下游生物
降鈣素原與C反應蛋白臨床之應用
? 降鈣素原（PCT）和C-反應蛋白（CRP）是近年來隨著醫學檢驗技術的發展逐漸在臨床普遍應用的實驗室檢查。早期識別和診斷感染，及時給予針對性的治療措施、合理的經驗性抗感染治療及評估和監控療效，可避免因抗生素的濫用而產生多重耐藥性，也可明顯改善患者預后，因而，快捷有效地實驗室監測指標對于感染性疾病的
縮短蛋白質療法的上游生物工藝時間
?過去十五年來，蛋白質療法在全世界范圍內的應用急劇增長。因此，對于很多生物制藥公司而言，當務之急是尋找更經濟和更有效的方法提升上游生物工藝生產。??? 提高上游生產的策略之一是使用生物工藝模型模仿大型生物反應器，以幫助選擇最合適的克隆，并優化培養基、補料和過程參數。識別最佳的蛋白質生產克隆株并優化其