端粒長度原來可以用數字方法來測量
新加坡國立大學的研究人員近日設計了一種名為單端粒絕對長度快速分析（STAR）的新方法，能夠快速測量端粒的絕對長度。 端粒長度的異常往往與多種衰老相關疾病有關，比如糖尿病、神經退行性疾病和心血管疾病，還與多種癌癥的預后相關。目前，測量端粒的金標準方法需要大量的起始DNA，而且操作繁瑣，不適合臨床使用。 新加坡國立大學的研究人員近日設計了一種名為單端粒絕對長度快速分析（STAR）的新方法，能夠快速測量端粒的絕對長度。他們在《Science Advances》雜志上報告稱，該方法準確靈敏，并且能夠測定癌細胞中的染色體外端粒重復序列（ECTR）。 “我們希望這種簡單而全面的檢測方法將被廣泛地采用，作為端粒檢測的標準方法，”研究人員在論文中寫道。 圖1. STAR分析的流程（圖片來自原文） 研究人員指出，評估端粒長度的現有方法存在缺陷。例如，基于Southern blotting的末端限制性片段（TRF）分析一直被認為是端粒......閱讀全文
端 粒 長 度 和 端 粒 酶 活 性 的 分 析
實驗步驟?基 本 方 案 I Southern 雜 交 檢 測 傳 統 凝 膠 電 泳 中 末 端 端 粒 D N A 限制性片段(TRF) 的端粒長度材 料基 因 組 D N A (試劑盒分離）和 限 制 性 內 切 核 酸 酶 和 反 應 緩 沖 液瓊 脂 糖（D N A 級）1 〇 X T B
定量PCR儀引物長度設定
① 引物長度 一般引物長度為18~30堿基。總的說來，決定引物退火溫度（Tm值）最重要的因素就是引物的長度。有以下公式可以用于粗略計算引物的退火溫度。 在引物長度小于20bp時：[4(G+C)+2(A+T)]-5℃ 在引物長度大于20bp時：62.3℃+0.41℃(%G-C)-
定量PCR儀引物長度設定
① 引物長度 一般引物長度為18~30堿基。總的說來，決定引物退火溫度（Tm值）最重要的因素就是引物的長度。有以下公式可以用于粗略計算引物的退火溫度。 在引物長度小于20bp時：[4(G+C)+2(A+T)]-5℃ 在引物長度大于20bp時：62.3℃+0.41℃(%G-C)-
數字PCR新方法來測量端粒長度
近日，新加坡國立大學利用數字PCR技術，開發出一種新穎、快速的端粒測量方法—單端粒絕對長度快速分析法(SATR)，可在臨床環境中快速確定癌癥和年齡相關疾病中的端粒酶異常，有助于臨床醫生更快地為患者進行診斷與計劃治療對策。相關研究日前已發表在《Science Advances 》期刊上。STAR分
提高RT-PCR的靈敏度與產物長度
摘要RT－PCR 已經成為研究者確定感興趣的器官、組織或細胞中mRNA 轉錄本出現、結構和表達水平的基本方法。RT－PCR的基本步驟包括：首先對樣品中出現的所有mRNA 合成一個cDNA拷貝，接著擴增感興趣的基因。因為兩個步驟中使用的反應緩沖液不能兼容，所以這兩個步驟（RT 和PCR）通常分別進行。
提高RT-PCR的靈敏度和產物長度
RT－PCR 已經成為研究者確定感興趣的器官、組織或細胞中mRNA 轉錄本出現、結構和表達水平的基本方法。RT－PCR的基本步驟包括：首先對樣品中出現的所有mRNA 合成一個cDNA拷貝，接著擴增感興趣的基因。因為兩個步驟中使用的反應緩沖液不能兼容，所以這兩個步驟（RT 和PCR）通常分別進行。即使
PCR擴增產物的克隆——平端連接法
PCR擴增產物的克隆可以：（1）獲得目的DNA片段；（2）用于原核表達的研究；（3）廣泛應用于分子生物學相關研究。實驗方法原理平頭連接是將制備好的平頭載體和補平或削平的PCR產物直接進行連接。載體可用EcoR V或Sma I切成平頭；PCR產物純化后，可以在22℃用DNA聚合酶I作用30min（利用
以磁性顆粒為基礎純化 PCR 產物實驗
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 乙醇 PCR 樣品 儀器、耗材 自動定位器 吸頭
以磁性顆粒為基礎純化 PCR 產物實驗
MagneSil 是一種順磁性硅質顆粒，能夠充當可移動的固相物質而用于捕獲雙鏈 DNA 片段。通過洗滌黏附于硅質顆粒上的靶復合物來去除殘留污染，從而純化的目的 DNA。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。 試劑、試劑盒 乙醇PCR 樣品 儀器、耗材
以磁性顆粒為基礎純化 PCR 產物實驗
試劑、試劑盒 乙醇PCR 樣品 儀器、耗材 自動定位器吸頭液體處理自動機械分離裝置平板密封條PCR 純化系統 實驗步驟 一、材料 1. 緩沖液、溶液和試劑 乙醇，80% 2. 核酸和寡核苷酸 在 96 孔板中的 PCR 樣品（不多于100ul/孔）